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補硒-VE及授精方法對薩??搜虺瑪蹬怕押褪芫实挠绊?/h1>
2015-12-02 05:40:21李愛朵趙建華杜俊芳秦劍平李增開李新春
中國畜禽種業 2015年7期

李愛朵 趙建華 杜俊芳 秦劍平 李增開 李新春

(1,陜西省榆林市神木縣畜牧獸醫技術推廣站 719300; 2,陜西省絨山羊工程技術研究中心 719000)

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李愛朵1趙建華1杜俊芳1秦劍平1李增開1李新春2*

(1,陜西省榆林市神木縣畜牧獸醫技術推廣站 719300; 2,陜西省絨山羊工程技術研究中心 719000)

選擇做胚胎移植供體120只薩??四秆颍捎?因素4重復試驗,在飼養管理和激素處理相同的條件下,進行補加亞硒酸鈉-VE和不同輸精方式試驗,研究其對供體母羊排卵和受精率的影響。結果表明:肌注亞硒酸鈉-VE的試驗組受體母羊,每只平均沖胚11.5枚,顯著高于對照組(8.9枚)(p<0.01),且組內各重復間差異不顯著(p>0.05),可見,在缺硒地區在配種前給母羊補充硒-VE對其排卵有明顯的影響;采用內窺鏡子宮角輸精法,受精率97.02%,而采用常規子宮頸口輸精法,受精率82.57%,二者差異顯著(p<0.05),說明內窺鏡子宮角輸精法,是一種效果很好的人工授精輸精方法。

薩福克母羊;繁殖;胚胎移植;亞硒酸鈉VE注射液;內窺鏡子宮角輸精法;常規輸精法;超數排卵;受精率;試驗

胚胎移植技術在家畜的育種繁育中應用很普遍,而且越來越商業化。為了增加純種薩??巳庋虻臄盗?,神木縣從2010年起就引進該技術對薩??巳庋蜻M行胚胎移植。但是移植供體羊排卵數量少、受體受精率低是制約這項技術推廣的瓶頸。為此我們分析了影響供體母羊超數排卵的諸多因素,比如有供體羊的體況、年齡、胎次、季節,前期的營養水平,超排處理選用的激素類型、劑量以及配種的方法等。在微量營養方面, 《動物營養學》、 《動物營養與代謝病防治》等教程描述,硒缺乏明顯影響繁殖性能,對家畜繁殖的影響主要表現在公畜精液不良,母畜受胎率低下甚至不孕,妊娠畜會出現流產、早產、死胎等現象[1,2]。吳森研究,添加適量硒可使超數排卵試驗羊黃體飽滿,回收胚胎數和可利用胚胎數均顯著提高,超數排卵情況較好。補硒在一定程度上提高了母羊的超排效果[3]。神木縣屬于硒缺乏地區,本次試驗擬探討補充外源硒和VE對超排的影響,在體況、年齡、胎次和季節、超排處理選用的激素及劑量等因素盡可能一致的情況下,給供體試驗羊使用微量元素硒和VE注射液與不使用的羊對比,同時探討選用內窺鏡人工授精法與普通子宮角輸精法的不同效果。

1 材料和方法

1.1 試驗的時間和地點

本次試驗從2013年的8月20日開始,在神木縣爾林兔鎮的神木縣西農畜牧科技示范牧場(以下簡稱為一場)、瑞章農林牧發展有限公司(以下簡稱為二場)、神木縣沃源農業有限公司(以下簡稱為三場)和中雞鎮的神木縣旺升農民專業合作社(以下簡稱為四場)開展試驗。

1.2 試驗材料

1.2.1 供體羊

供體母羊的選擇:選健康無病、有正常的產羔記錄,膘情適中的2~4.5周歲的純種薩福克母羊120只,所有供體羊120只全來自神木縣西農畜牧科技示范牧場,將所選的供體羊隨機分成4組投放到四大羊場由專人飼喂,以備試驗用;配種公羊的選擇:純種薩??斯?,要求2周歲以上,體況健壯,膘情較好,有豐富的配種經驗。這次配種用的公羊均來自神木縣西農畜牧科技示范牧場,共4只,由神木縣西農畜牧科技示范牧場飼養,以備配種用。

受體羊1000只(實際施行胚移手術的955只),由進行試驗的4個場提供,主要為肉羊雜交個體和購買的小尾寒羊雜交個體,體格較大,健康無病。

1.2.2 同期發情藥物、微量元素和VE

同期發情所用藥物:促卵泡素(FSH)、促排 3號(LRH-A3)由寧波第二激素廠生產;氯前列醇鈉注射液(PG)由寧波三生藥業有限公司生產;孕酮陰道海綿栓由西北農林科技大學研制。

微量元素硒和VE:用亞硒酸鈉VE注射液(以下簡稱“硒-VE”),由哈爾濱摩天農科獸藥有限公司生產。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗設計

試驗設計為2因素4個重復(場)試驗,將120只試驗羊隨機分成8組,分到4個羊場,即1-Ⅰ,1-Ⅱ;2-Ⅰ,2-Ⅱ;3-Ⅰ,3-Ⅱ;4-Ⅰ,4-Ⅱ。硒-VE因素試驗:每場-Ⅱ為試驗組,-Ⅰ為對照組,試驗組補加硒-VE,對照組不補,其他條件一致;輸精方法試驗:1-Ⅰ,1-Ⅱ;2-Ⅰ,2-Ⅱ為試驗組,采用內窺鏡子宮角人工輸精法,3-Ⅰ,3-Ⅱ;4-Ⅰ,4-Ⅱ為對照組,采用常規子宮頸口人工輸精法。

1.3.2 試驗期飼養管理

將選出進行胚胎移植的供、受體羊和其它的羊分開,逐只進行B超檢查,采血化驗布病,分別單獨組群;每一場的供體母羊隨機分成Ⅰ、Ⅱ組,每組15只,飼喂相同的粗飼料和精飼料。粗飼料是青貯玉米、沙打旺和紫花苜蓿干草,自由采食;精飼料(玉米78%、菜粕4%、豆粕12%、食鹽1%)。每只羊補飼0.6kg/日。專人飼養,加強飼養管理。

1.3.3 供體羊補加硒-VE的處理

從2013年8月21日(配種前15d)開始,對每場的Ⅱ組供體羊(作為試驗組)開始注射硒-VE,直至配種結束,劑量為每天3ml/只,方法是每天上午一次性分點肌肉注射。Ⅰ組供體羊作為對照組,不注射任何藥物,其他飼養管理與試驗組相同只。

1.3.4 對供體羊同期發情、超數排卵、配種以及胚胎收集

對每場的供體羊Ⅰ、Ⅱ組同時處理,一場是從8月22號開始肌注PG,每只1ml,以后每隔兩天分別處理二場,三場,四場;注射PG后2d開始觀察發情,并對發情情況做了記錄;發情2d后開始置栓,12d后去栓,去栓后對正常發情的供體羊肌注FSH,每只2.5ml,每12h注射1次,連續用3d,然后進入配種階段。供體羊發情8h后開始配種,每8h配種一次,對首次配種的發情母羊肌注促排3號,每只10μl,供體羊前期處理結果見表1、2。

表1 供體羊同期發情處理記錄表

表2 供體羊超排處理記錄表

供體羊發情后開始肌注促排3號,每只10μl,發情8h后開始配種,所有的供體羊都進行人工配種。為了比較內窺鏡子宮角輸入法與常規人工授精的效果,對一、二場的羊采用內窺鏡法進行子宮角輸精法配種,此種方法是在供體羊發情8h后通過手術只配種一次。具體操作是將配種羊保定在手術臺上,局部麻醉,用手術刀在羊下腹部兩淺窩距離中線2cm處各打開一個1~1.5cm的小口,內窺鏡放入右邊刀口里觀察子宮角,用腸鉗放入左邊的刀口取出一側的子宮角,用1ml的注射器將稀釋好的精液注入子宮角0.5ml,輸完后將子宮角放回原處,然后找出另一側的子宮角用同樣的方法輸入后再放回原處,最后將傷口縫合;而三、四場的羊采用常規人工輸精法配種。此法就是將配種羊保定在輸精架上,利用羊的輸精槍將裝好的精液通過陰道進入子宮頸口輸入子宮,用此種方法每只羊每8h配種一次,一個情期共配種3次。

供體羊在配種后6~6.5d開始沖胚,在沖胚手術前24h停食并做好手術前的準備。一場供體羊在9月17日手術沖胚,以后每隔兩天進行其它場的沖胚手術。

1.4 數據處理

試驗采用Excel軟件對試驗數據進行預處理,然后DPS7.05數據處理軟件進行顯著性檢驗[4]。試驗數據和分析結果均以 “平均數±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 補充硒-VE對胚移供體母羊排卵效果

此次試驗原設計處理并沖胚的供體羊總共是120只,結果四場Ⅰ組有一只供體羊沒有沖胚,所以實際沖胚胎的供體羊是119只,總回收卵1212枚。其中補充 “硒-VE”組供體羊60只,共回收卵689枚,每只平均11.5±3.5枚,且組內各場之間差異不顯著(p>0.05);對照組供體羊59只,總回收卵523枚,每只平均8.9±2.9枚,且組內各場之間差異不顯著(p>0.05)。Ⅰ、Ⅱ組回收卵均數之間差異極顯著(p<0.01),詳見表3。

表3 補硒對供體羊沖胚數的影響

2.2 內窺鏡子宮角輸精法與常規人工輸精法效果比較

一、二場采用內窺鏡子宮角輸精法,總回收卵604枚,受精卵586枚,受精率97.02%,而三、四場用常規人工輸精法,總回收卵608枚,受精卵502枚,受精率82.57%,二者差異顯著(p<0.05)。

3 討論與結論

3.1 使用硒-VE對胚移供體母羊排卵的影響

影響母羊同期發情排卵的因素很多,遺傳因素可能是最主要因素,不同品種羊的同期發情率差異較大,同一品種的同期發情主要受環境因素、激素水平和飼養管理等的影響[5-6]。在本試驗中,使用硒-VE組供體母羊排卵率極顯著高于不使用該注射液的,說明硒-VE對母羊卵巢和卵泡發育有著明顯的影響,可能是由于硒和VE不僅提供了供體母羊作為營養所必需的微量元素、維生素,還影響到多種繁殖激素水平,進而影響了受體羊的排卵效果[7]。

3.2 輸精部位和方法對供體母羊排卵受精率的影響

內窺鏡子宮角輸精與子宮頸口輸精相比,輸精次數只有1次,而子宮頸口輸精2~3次;在同等密度和活力的條件下,子宮角輸精的精液量比陰道子宮頸口輸精少;由于精液被直接輸入子宮角內,沒有了精子通過子宮頸管特殊構造阻攔因素而減少輸入精子,減少了精子在子宮內的運行距離和時間,縮短精子與卵子相遇距離和時間,促進和提高了精卵結合[8],所以母羊卵子受胎率顯著高于子宮頸口輸精。內窺鏡人工輸精法節省了公羊;雖然操作麻煩一點,但輸精次數減少,減少了工作量。

3.3 結論

在其他條件相同的情況下,使用硒-VE對提高薩??斯w母羊的超數排卵數量和胚胎發育有顯著的效果,值得在生產中應用推廣;使用內窺鏡人工輸精法供體母羊的卵子受精率顯著高于常規子宮頸口人工輸精法,在生產中也值得提倡。

[1]楊鳳(主編).動物營養學[M].北京:中國農業出版社,2009.

[2]張乃生(主編).畜禽營養代謝病防治[M].吉林:金盾出版社, 2005.

[3]吳森,陳福財,王燕燕,等.補硒對薩福克羊血清激素水平和超排效果的影響[J].中國農學通報,2011,27(23):32-35.

[4]唐啟義.DPS數據處理系統[M].北京:科學出版社,2010.

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[6]鄧凱偉,陳鳳曾,等.影響受體羊同期發情調控的因素[J].河南畜牧獸醫,2007,28(7):10-11.

[7]陳福財,張磊,王燕燕,等.外源Se對胚胎移植受體母羊黃體發育和血清激素水平的影響[J].家畜生態學報,2012,33(4):43-46.

[8]張劍,張銀國,等.盤羊雜交一代羊子宮角輸精對提高受胎效果的研究[J].2014(5):23-25.

陜西省科技統籌創新工程計劃項目資助(2014KTDZ02-01-01)。

李愛朵(1976-),女,陜西省神木縣人,畜牧師,主要從事畜牧技術推廣。

*通訊作者:李新春(1953-),男,陜西省佳縣人,教授,主要從事養羊技術教學與科研推廣工作。

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