支氣管肺泡灌洗液中3種腫瘤標志物的檢測在肺癌診斷及病情評估中的價值

崔顯念

湖北省恩施土家族苗族自治州民族醫院檢驗科，湖北恩施 445000

支氣管肺泡灌洗液中3種腫瘤標志物的檢測在肺癌診斷及病情評估中的價值

崔顯念

湖北省恩施土家族苗族自治州民族醫院檢驗科，湖北恩施 445000

目的 研究支氣管肺泡灌洗液中3種腫瘤標志物的含量對肺癌診斷及病情的評估價值。 方法 將2013年5月～2014年5月期間在我院就診的80例肺癌患者納入研究的觀察組，將同期在我院就診的80例肺部良性病變患者納入研究的對照組，收集支氣管肺泡灌洗液，采用熒光定量PCR法檢測腫瘤標志物的mRNA含量、采用Elisa法檢測腫瘤標志物的蛋白含量。 結果 （1）TNM不同分期患者支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組，且TNM分期越高、腫瘤標志物含量越高，差異有統計學意義（P＜0.05）；（2）TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量于對照組差異無統計學意義（P＞0.05），TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論 肺癌患者血清中腫瘤標志物含量從TNMⅢ期開始升高，支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量從TNMⅠ開始升高，BALF中腫瘤標志物含量檢測有利于肺癌的早期診斷。

肺癌；支氣管肺泡灌洗液；腫瘤相關抗原細胞角蛋白19片段抗原21-1；腫瘤特異性生長因子；鱗狀細胞癌相關抗原

肺癌是我國發病率最高的惡性腫瘤，且近年來的發病率不斷升高，尋找更為靈敏的早期診斷指標一直是臨床研究的熱點[1]。血清腫瘤標志物含量檢測可以為肺癌的診斷提供參考，但是在腫瘤發生早期，血清腫瘤標志物含量升高并不明顯，無法靈敏的對疾病做出診斷[2]。支氣管肺泡灌洗液（BALF）是一種更為靈敏的采樣標本，BALF中腫瘤標志物在腫瘤早期即發生改變[3]。在下列研究中，我們分析了支氣管肺泡灌洗液中3種腫瘤標志物的含量對肺癌診斷及病情的評估價值。

1　資料與方法

1.1一般資料

將2013年5月～2014年5月期間在我院就診的80例肺癌患者納入研究的觀察組，所有患者均經病理學活檢確診，其中男62例，女18例，平均年齡62.84歲；將同期在我院就診的80例肺部良性病變患者納入研究的對照組，其中男59例，女21例，平均年齡63.14歲。兩組患者均告知研究事項并簽署知情同意書，一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

表1　兩組患者支氣管肺泡灌洗液及血清中的腫瘤標志物含量比較

1.2方法

1.2.1標本采集方法 采用日本Pentax公司生產的EPS3500型電子支氣管鏡進行支氣管鏡檢查，將支氣管鏡末端置于病灶末端所在的肺葉或者支氣管開口處，保證鏡末端以楔形方式緊密置入，經活檢口將200mL，37℃的無菌生理鹽水分子緩慢注入，每次注入30～50mL，每次注入后均通過-19.95～-13.33kPa的負壓吸取灌洗液，以3000r/min離心15min后收取上清液，保存于-80℃冰箱用于下一步檢測。

1.2.2蛋白含量檢測 采用酶聯免疫吸附法檢測灌洗液中腫瘤相關抗原細胞角蛋白19片段抗原21-1（Cyfra21-1）、鱗狀細胞癌相關抗原（SCC）、腫瘤特異性生長因子（TSGF）含量。

1.3統計學方法

采用SPSS18.0軟件錄入數據，兩組間比較采用t檢驗，不同TNM分期間比較采用方差分析、兩兩比較采用LSD法。

2　結果

TNM不同分期患者支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組，且TNM分期越高、腫瘤標志物含量越高；TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量與對照組比較差異無統計學意義（P＞0.05），TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

3　討論

支氣管肺癌是臨床最為常見的惡性腫瘤，在支氣管肺泡上皮細胞發生惡變的過程中，惡變的細胞可以新合成或過表達某些物質（腫瘤標志物）并使患者血清及支氣管肺泡表面被覆液中相應的物質含量升高，臨床上也常用腫瘤標志物含量的檢查來診斷疾病[4]。近年來對肺癌的相關研究表明，由腫瘤細胞合成和分泌的腫瘤標志物首先釋放到病灶局部的支氣管肺泡內，而后經由血液和淋巴液回流進入血液循環[5]。在肺癌的發生發展過程中，腫瘤標志物含量最先在支氣管肺泡局部發生改變，而后進行血液循環并引起血清腫瘤標志物含量升高[6]。因此，血清腫瘤標志物含量在惡性腫瘤發生的早期變化并不明顯，血清含量檢測不利于腫瘤的早期發現；而通過肺泡灌洗的方法獲取支氣管肺泡灌洗液（BALF）可以檢測支氣管肺泡局部腫瘤標志物的含量，也有越來越多的研究報道了BALF中腫瘤標志物含量變化比血清更為靈敏，是診斷肺癌更為理想的方式[7]。

近年來，臨床學者致力于探尋能夠準確診斷肺癌的腫瘤標志物，且越來越多的研究表明腫瘤相關抗原細胞角蛋白19片段抗原21-1（cytokeratin 19 fragment antigen21-1，Cyfra21-1）、腫瘤特異性生長因子（TSGF）、鱗狀細胞癌相關抗原（SCC）與肺癌的發生密切相關，可以作為肺癌診斷的腫瘤標志物[8]。Cyfra21-1是一類酸性蛋白，在正常上皮細胞中以寡聚物的形式廣泛存在，主要位于細胞質中，而極少進入外周血液循環，當上皮細胞發生惡變時，蛋白酶被大量激活并介導Cyfra21-1脫落進入局部氣道和血液循環中[9]。TSGF是一類與惡性腫瘤發生發展相關的糖類物質和代謝物的統稱，由腫瘤細胞合成，并通過不同的信號通路來實現對腫瘤惡性生物學行為的調節[10]。SCC是鱗癌細胞中一類較為特殊的蛋白質，正常組織中含量極低，異常升高多見于惡變的鱗狀上皮細胞[11]。

為了明確以上3種腫瘤標志物對肺癌的診斷價值，本研究分別對血清和支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量進行了檢測和分析，研究結果顯示：TNM不同分期患者支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組；而只有TNMⅢ、TNMⅣ期患者血清中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量均高于對照組，TNMⅠ和TNMⅡ期患者血清中腫瘤標志物的含量與對照組無差異。這就說明肺癌患者血清中腫瘤標志物含量從TNM者期開始出現異常，而支氣管肺泡灌洗液中Cyfra21-1、SCC、TSGF的含量從TNM從開始出現異常，BALF中腫瘤標志物含量檢測有利于肺癌的早期診斷。

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Detection of three kinds of tumor marker in bronchoalveolar lavage fluid and its value in diagnosis and assessment of lung cancer

CUI Xiannian
Department of Clinical Laboratory,National Hospital in Hubei Province,Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture,Enshi 445000,China

Objective To study the contents of three kinds of tumor marker in bronchoalveolarlavage fluid and its value in diagnosis and assessment oflung cancer. Methods 80 cases of lung cancer patients in our hospital from 2013 May to 2014 May were enrolled in observation group,80 cases of benign lung lesions patients over the same period were enrolled in control group.Bronchoalveolar lavage were collected,mRNA content of tumor marker were detected by fluorescence quantitative PCR method,protein content of tumor marker were detected by Elisa method. Results (1)Cyfra21-1,SCC,TSGF content in bronchoalveolar lavage fluid of different TNM stage were different;as TNM stage increase,Cyfra21-1,SCC,TSGF content in BALF increase,difference had statistical significance(P＜0.05);(2)Cyfra21-1,SCC,TSGF content in serum of TNMⅠ stage and TNMⅡ stage were no different;Cyfra21-1,SCC,TSGF content in serum of TNMⅢ stage and TNMⅣ were different,difference had statistical significance(P＜ 0.05); Conclusion tumor markers content in serum in lung cancer patients increase from TNM III stage,Cyfra21-1,SCC,TSGF content in bronchoalveolar lavage fluid increase from TNMⅠ stage,tumor markers content detection in BALF is helpful for early diagnosis of lung cancer.

Lung cancer;Bronchoalveolar lavage fluid Cyfra21-1;SCC;TSGF

R734.2

B

2095-0616（2015）09-130-03

（2015-01-16）