RCAS1和CD105在胸腔積液中的表達及臨床意義

楊 榮李小芬黃 昕陳春霞江 亮黃 碧

1.廣東省湛江市結核病防治所結核病科，廣東湛江 524008；2.廣東醫學院附屬醫院腫瘤中心，廣東湛江 524001

RCAS1和CD105在胸腔積液中的表達及臨床意義

楊 榮1李小芬1黃 昕2陳春霞1江 亮2黃 碧1

1.廣東省湛江市結核病防治所結核病科，廣東湛江 524008；2.廣東醫學院附屬醫院腫瘤中心，廣東湛江 524001

目的 研究癌性胸水和結核性胸水患者血清及胸水中SiSo細胞表達的受體結合腫瘤抗原 （RCAS1）和CD105的表達水平和臨床意義。 方法 根據病理類型將76例胸腔積液患者分為惡性胸腔積液（癌性組）40例和結核性胸腔積液患者（結核組）36例，應用酶聯免疫吸附試驗法（ELISA）分別對兩組血清及胸水中的RCAS1和CD105的水平進行檢測，比較兩組血清和胸水中RCAS1和CD105表達水平的差異以及兩者與臨床之間的關系。 結果 40例惡性胸腔積液（癌性組）血清及胸水中RCAS1和CD105表達水平均高于36例結核性胸腔積液患者（結核組），癌性胸腔積液患者和結核性胸腔積液患者血清中RCAS1水平分別為（36.1988±5.6195） U/mL和（13.6022±3.2608）U/mL，癌性胸腔積液患者和結核性胸腔積液患者血清中CD105的水平分別為（6.2090±0.2608）μg/L和 （5.1536±0.1872） μg/L，癌性胸腔積液患者和結核性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平分別為（50.3008±5.3298） U/mL和（21.1433±3.1365） U/mL，癌性胸腔積液患者和結核性胸腔積液患者胸水中CD105 的水平分別為（4.1133±0.1695） μg/L和 （3.2492±0.1305） μg/L，兩者相比差異有統計學意義（P＜0.01）。 結論 監測胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105 的表達水平對惡性胸腔積液和結核性胸腔積液的鑒別診斷有一定的臨床應用價值。

RCAS1；CD105；胸腔積液

胸腔積液是由于局部或全身病變而引起胸膜腔液體濾過及吸收不平衡，導致其形成過快或吸收過慢形成，胸腔積液病因復雜多樣，臨床中以結核及惡性腫瘤引起的胸腔積液為大多數，兩者不易鑒別，不同性質的胸腔積液治療方法截然不同，患者的預后相差亦甚大，目前主要依據胸膜組織病理活檢、胸水脫落細胞學等檢查確診，但敏感性不高，陽性率較低，臨床上大約有 20%～30%的胸腔積液患者雖然已經過全面檢查，仍然難于給予確診，探討判斷胸腔積液良惡性的有效檢查方法，已成為臨床關注的熱點[1-2]；SiSo細胞表達的受體結合腫瘤抗 原 （receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells，RCAS1）是一種腫瘤的相關抗原，是存在于癌癥細胞中的一種抗原因子，一般情況下在癌癥細胞中有較高的表達，同時，RCAS1 蛋白具有特殊的分子結構，使得其具有較強的分泌功能，研究發現RCAS1在多種腫瘤細胞膜上呈高表達，RCAS1表達與腫瘤的分化、侵襲、凋亡和惡性程度密切相關[3-4]；CD105又稱為Endoglin，研究表明CD105由腫瘤組織及其轉移灶中新生血管內皮細胞產生，與腫瘤的發生、發展、侵襲和轉移密切相關，是腫瘤血管生成的標志物[5-6]；本研究通過檢測不同性質的胸腔積液患者血清及積液中RCAS1和CD105的表達水平，以期為胸腔積液性質的鑒別提供新的方法和思路。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2009年3月～2013年7月36例結核性胸腔積液患者（結核組），其中男25例，女11例，中位年齡45歲，經臨床確診為結核性胸膜炎，予以抗結核治療后已治愈。40例同期惡性胸腔積液（癌性組），入選標準：（1）初治患者，首次發現胸腔積液；（2）既往未行手術、放化療、內分泌治療或基因靶向治療；（3）經胸水細胞學、穿刺活檢或術后病理組織學等檢查確診；（4）排除嚴重心臟疾病或低蛋白血癥引起的胸腔積液；其中男27例，女13例，中位年齡46歲。

1.2實驗方法

早晨空腹時抽取靜脈血3mL，室溫下靜置3.5h后，3000r/min離心10min，分離出血清1.5mL，同時收集同一患者胸腔積液20mL，離心取上清液，放入-70℃冰箱保存，成批量采用酶聯免疫吸附試驗法（ELISA）檢測RCAS1和CD105水平，檢測試劑盒購自日本MBL公司，由專人按說明書要求嚴格進行實驗操作。

1.3統計學方法

應用SPSS16.0統計軟件進行統計分析，RCAS1和CD105的測定數據用表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1兩組患者血清中RCAS1水平比較

36例結核性胸腔積液患者（結核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間血清中RCAS1水平比較：癌性組患者和結核組血清RCAS1水平分別為（36.1988±5.6195）U/mL、（13.6022±3.2608）U/mL，兩者比較差異有統計學意義（t=21.1286，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者血清RCAS1水平明顯高于結核性胸腔積液患者血清RCAS1水平。見表1。

2.2兩組患者血清中CD105水平比較

36例結核性胸腔積液患者（結核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間血清中CD105水平比較：癌性組患者和結核組血清CD105水平分

表1　兩組患者之間血清中RCAS1水平比較

表1　兩組患者之間血清中RCAS1水平比較

注：兩組血清中RCAS1水平比較，t=21.1286，P＜0.01

組別　n　　血清中RCAS1水平癌性組結核組36.1988±5.6195 13.6022±3.2608 40 36

別為（6.2090±0.2608）μg/L、（5.1536±0.1872） μg/L，兩者比較差異有統計學意義（t=20.0642，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者血清CD105水平明顯高于結核性胸腔積液患者血清CD105水平。見表2。2.3 兩組患者胸水中RCAS1水平比較

表2　兩組患者之間血清中CD105水平比較

表2　兩組患者之間血清中CD105水平比較

注：兩組血清中CD105水平比較，t=20.0642，P＜0.01

癌性組結核組6.2090±0.2608 5.1536±0.1872 40 36

36例結核性胸腔積液患者（結核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間胸水中RCAS1水平比較：癌性組患者和結核組胸水中RCAS1水平分別為（50.3008±5.3298）U/mL、（21.1433±3.1365）U/mL，兩者比較差異有統計學意義（t=28.6501，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平明顯高于結核性胸腔積液患者胸水中RCAS1水平。見表3。

表3　兩組患者之間胸水中RCAS1水平比較

表3　兩組患者之間胸水中RCAS1水平比較

注：兩組胸水中RCAS1水平比較，t= 28.6501，P＜0.01

組別　n　　胸水中RCAS1水平癌性組結核組50.3008±5.3298 21.1433±3.1365 40 36

2.4兩組患者胸水中CD105水平比較

36例結核性胸腔積液患者（結核組）患者與40例惡性胸腔積液（癌性組）之間胸水中CD105水平比較：癌性組患者和結核組胸水中CD105水平分別為（4.1133±0.1695）μg/L、（3.2492±0.1305）μg/L，兩者比較差異有統計學意義（t=24.6984，P＜0.01）；提示惡性胸腔積液患者胸水中CD105水平明顯高于結核性胸腔積液患者胸水中CD105水平。見表4。

3　討論

RCAS1蛋白為40kD的II型跨膜蛋白，由213個氨基酸組成，通過C端部分卷曲螺旋結構形成同源寡聚體，研究發現RCAS1還以可溶性形式存在，并且真正能發揮其生物學功能的可能是其可溶性蛋白，研究表明RCAS1可誘導外周免疫細胞生長抑制、凋亡，腫瘤新生血管形成及結締組織重塑，可促進腫瘤細胞生長、轉移及逃避機體免疫監測[7-8]；Sonoda等[9]應用ELISA檢測75例正常對照組、36例良性卵巢腫瘤患者和61例卵巢癌患者血清RCAS1水平，研究發現卵巢癌患者血清RCAS1水平明顯高于良性卵巢腫瘤患者和正常對照組血清RCAS1水平，提示血清RCAS1可能是卵巢癌生物學標記物，其作用是通過抑制免疫的治療效果；RCAS1可通過促進誘導腫瘤間質重塑及促進腫瘤新生血管形成，繼而促進血管通透性升高，顯著增加胸膜間皮層的通透性，從而形成胸腔積液；Aoe等[10-11]報道胸腔積液中RCAS1濃度的檢測對鑒別良惡性胸腔積液具有一定的價值，惡性胸腔積液中RCAS1濃度顯著高于良性胸腔積液。

表4　兩組患者與40例癌性組患者之間胸水中CD105水平比較

表4　兩組患者與40例癌性組患者之間胸水中CD105水平比較

注：兩組胸水中CD105水平比較，t=24.6984，P＜0.01

組別　n　　胸水中CD105水平癌性組結核組4.1133±0.1695 3.2492±0.1305 40 36

腫瘤血管新生是導致腫瘤發生、進展、浸潤和轉移的重要因素，為腫瘤組織的增殖提供了良好的條件[12-13]；CD105在大血管及小血管的內皮細胞中呈高度表達，在有血管生成的組織，如愈合中的傷口、銀屑病、胚胎組織及腫瘤組織的內皮細胞中呈特異性高表達，是內皮細胞增殖的相關標記物[14]；Kopczyńska等[15]研究發現， 37例Ⅰ期非小細胞肺癌患者手術后7d血漿可溶性Endoglin水平明顯低于手術前，而在隨后的30d又逐漸升高，提示血漿可溶性Endoglin 水平可作為非小細胞肺癌潛在的腫瘤標志物；隨著腫瘤的發展，CD105水平亦呈逐漸增高之勢，CD105可通過促進血管內皮細胞增生，誘導血管的生成和促進小靜脈、微靜脈通透性升高，使胸膜間皮層的通透性顯著增加，促使胸液的吸收少于生成，從而形成胸腔積液。

本研究通過對36例結核性胸腔積液患者患者與40例惡性胸腔積液患者的血清和胸水中RCAS1和CD105水平的監測，發現惡性胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105的水平均明顯高于結核性胸腔積液患者，比較差異有統計學意義（P＜0.01），綜合以上得知RCAS1和CD105 在惡性及結核性胸腔積液血清和胸水中表達水平有明顯的差異性，監測胸腔積液患者血清和胸水中RCAS1和CD105 的表達水平對惡性胸腔積液和結核性胸腔積液的鑒別診斷有一定的臨床應用價值。

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Expression of RCAS1 and CD105 in pleural effusion and clinical significance

YANG Rong1LI Xiaofen1HUANG Xin2CHEN Chunxia1JIANG Liang2HUANG Bi1
1.Department of Tuberculosis, Zhanjiang Tuberculosis Protective and Treatment Institution, Zhanjiang 524008, China;
2.Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China

Objective To study the expression and clinical significance of receptor-binding cancer antigen expressed on SiSo cells (RCAS1) and CD105 in different types of pleural effusion. Methods 76 cases of patients with pleural effusion were divided into malignant pleural effusion group (40 cases) and tuberculous pleural effusion group (36 cases) according to the pathological type. The level of RCAS1 and CD105 concentrations of serum and pleural fluid from patients with malignant pleural effusion and tuberculous pleural effusion were measured by the enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), the difference were analysed. Results The level of serum RCAS1 (36.1988±5.6195) U/mL and CD105 (6.2090±0.2608)μg/L of patients with malignant pleural effusion were higher than that of tuberculous pleural effusion[(13.6022±3.2608) U/mL, (5.1536±0.1872) μg/L]. The level of pleural effusion RCAS1(50.3008±5.3298) U/mL and CD105 (4.1133±0.1695) μg/L of patients with malignant pleural effusion were higher than that of tuberculous pleural effusion[(21.1433±3.1365) U/ml, (3.2492±0.1305) μg/L] (P＜0.01). Conclusion Examination of RCAS1 and CD105 in serum and pleural fluid has a certain clinical application value in differential diagnosis of patients with tuberculous pleurisy and malignant pleurisy.

RCAS1; Osteopontin; Pleural effusion

R561.3

A

2095-0616（2015）09-20-04

（2015-01-23）