DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達及意義

陳曉燕泰安市婦幼保健院病理科，山東泰安 271000

DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達及意義

陳曉燕
泰安市婦幼保健院病理科，山東泰安 271000

目的 探討DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達。方法 整群選擇2005年1月—2013年12月該院收治的62例宮頸鱗狀細胞癌標本、38例宮頸上皮內瘤變標本、26例正常宮頸組織標本，以免疫組化SP法檢測3組標本中DLC-1 和cyclinD1的表達。結果 DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達率分別為27.4%、76.3%、92.3%，差異有統計學意義(P<0.05)；高、中、低病理分級DLC-1陽性表達率分別為42.9%、27.9%、16.7%，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ～Ⅱa期DLC-1陽性表達率為41.4%，明顯高于Ⅱb～Ⅳ期的15.2%，差異有統計學意義(P<0.05)；無淋巴結轉移DLC-1陽性表達率為34.9%，明顯高于有淋巴結轉移的10.5%，差異有統計學意義(P<0.05)。cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達率分別為66.1%、5.3%、0%，差異有統計學意義(P<0.05)；高、中、低病理分級cyclinD1陽性表達率分別為42.9%、67.4%、75.0%，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ～Ⅱa期cyclinD1陽性表達率為48.3%，明顯低于Ⅱb～Ⅳ期的81.8%，差異有統計學意義(P<0.05)；無淋巴結轉移cyclinD1陽性表達率為58.1%，明顯低于有淋巴結轉移的84.2%，差異有統計學意義(P<0.05)。DLC-1與cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達呈負相關性(r=-0.519，P<0.05)。結論DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌的陽性表達較低，而cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌的陽性表達較高，兩者均與宮頸鱗狀細胞癌發展、侵襲、轉移等密切相關。

宮頸鱗狀細胞癌；DLC-1；cyclinD1

宮頸癌是婦女臨床常見性惡性腫瘤，其發病率僅低于乳腺癌，而其中又以鱗狀細胞癌的發病率最高，約70%[1]。當前，鱗狀細胞癌的發病率逐年增加，且早期臨床無明顯癥狀，常在體檢中發現。病理學研究顯示，宮頸癌的發病過程復雜，涉及癌基因改變和細胞生長的變化[2]。DLC-1為抑癌基因，在多數正常組織中的表達較高，在多數腫瘤中的表達較低[3]。cyclinD1是原癌基因，高表達可促進細胞增殖[4]。當前，DLC-1和cyclinD1在鱗狀細胞癌中表達的研究不多見，基于此，通過分析該院2005年1月—2013年12月間收治的62例宮頸鱗狀細胞癌標本、38例宮頸上皮內瘤變標本、26例正常宮頸組織中DLC-1和cyclinD1的表達情況，探討了DLC-1和cyclinD1與鱗狀細胞癌發展、侵襲、轉移的關系，并對兩者的相關性進行了分析。以期為宮頸癌的防治提供數據。現報道如下。

[作者簡介]陳曉燕(1971-)，女，山東泰安人，本科，主治醫師，研究方向：臨床病理診斷。

1 資料與方法

1.1 一般資料

62例宮頸鱗狀細胞癌標本、38例宮頸上皮內瘤變標本、26例正常宮頸組織標本均整群選自該院2005年1月—2013年12月病理科，且均經病理證實。62例宮頸鱗狀細胞癌中，年齡35～ 76歲，平均(52.7±12.5)歲；高分化癌7例，中分化癌43例，低分化癌12例；FIGO分期：Ⅰ～Ⅱa期29例，Ⅱb～Ⅳ期33例；無淋巴結轉移者43例；有淋巴結轉移者19例。患者術前均未進行放療及化療的治療，且標本經病理醫師復檢。

1.2 方法

標本經10%中性福爾馬林固定，用石蠟包埋，做4 μm的切片。以SP法進行免疫組化，操作依據試劑盒說明書進行。并用乳腺癌作為陽性對照，PBS組作為陰性對照。

1.3 結果判定

結果判定以雙評分法進行[5]，觀察DLC-1細胞質和cyclinD1的細胞核，當出現棕黃色顆粒、且染色的強度大于背景著色時，判定為陽性。細胞計分標準：0分，陽性細胞數＜5%；1分，5%～25%；2分，26%～50%；3分，51%～75%；4分，＞75%。顯色強度評分：0分，無著色；1分，淡黃色；2分，棕黃色；3分，棕褐色。兩評分乘積≤1，表示(－)；1～3分，表示弱(+)；＞3，表示(+)。

1.4 統計方法

以SPSS 16.0進行統計分析。計數資料用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組標本中DLC-1和cyclinD1的表達

DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達逐漸增大，差異有統計學意義(P<0.05)；cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達逐漸減小，差異有統計學意義(P<0.05)。結果見表1。

2.2 DLC-1和cyclinD1與宮頸鱗狀細胞癌的關系

DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的陽性表達與宮頸鱗狀細胞癌的分期、分級、淋巴轉移密切相關，差異有統計學意義(P<0.05)。結果見表2。

表1 三組標本中DLC-1和cyclinD1的表達[n(%)]

表2 DLC-1和cyclinD1與宮頸鱗狀細胞癌的關系[n(%)]

2.3 DLC-1與cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中表達的相關性

DLC-1與cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中表達的呈負相關性(r=-0.519)。結果見表3。

3 討論

對于DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達，該組研究結果顯示：DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達率分別為27.4%、76.3%、92.3%，差異有統計學意義(P<0.05)；高、中、低病理分級DLC-1陽性表達率分別為42.9%、27.9%、16.7%，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ～Ⅱa期DLC-1陽性表達率為41.4%，明顯高于Ⅱb～Ⅳ期的15.2%，差異有統計學意義(P<0.05)；無淋巴結轉移DLC-1陽性表達率為34.9%，明顯高于有淋巴結轉移的10.5%，差異有統計學意義(P<0.05)。結果提示了：DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌和宮頸上皮內瘤變中的陽性表達率顯著低于正常宮頸組織，并與宮頸鱗狀細胞癌的分化、分期、淋巴結轉移密切相關。早在1998年，張風林等[5]在肝癌細胞系染色體的研究中首次發現了DLC-1，在基因組染色體中具有低表達。病理研究顯示，DLC-1在人體腦、心、肝、肺、乳腺等組織都有表達，并可抑制肺癌、肝癌、前列腺癌等腫瘤細胞的生長，發揮抑癌作用。此外，Seng等[6]的研究發現宮頸癌會對DLC-1的啟動子進行甲基化修飾，造成DLC-1的失活，因此，DLC-1可以作為宮頸癌診治判斷的標記物。宋明芮等[7]的研究結果表明，DLC-1的低表達參與了宮頸鱗狀細胞癌的發生、發展、侵襲、及轉移，本組結果與其結果一致。

表3 DLC-1與cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中表達的相關性

對于cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達，該組發現：cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌、宮頸上皮內瘤變、正常宮頸組織中的陽性表達率分別為66.1%、5.3%、0%，差異有統計學意義(P<0.05)；高、中、低病理分級cyclinD1陽性表達率分別為42.9%、67.4%、75.0%，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ～Ⅱa期cyclinD1陽性表達率為48.3%，明顯低于Ⅱb～Ⅳ期的81.8%，差異有統計學意義(P<0.05)；無淋巴結轉移cyclinD1陽性表達率為58.1%，明顯低于有淋巴結轉移的84.2%，差異有統計學意義(P<0.05)。結果提示了：CyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌和宮頸上皮內瘤變中的陽性表達率顯著高于正常宮頸組織，并與宮頸鱗狀細胞癌的分化、分期、淋巴結轉移密切相關。CyclinD1是一種參與細胞周期精確調控的蛋白，維持細胞生長發育的平衡。CyclinD1基因的變化可引起細胞周期的異常調控，進而誘發細胞轉化、甚至癌變。病理研究顯示，CyclinD1可加速G1/S期的轉換，促進細胞周期的進程，當CyclinD1的過度表，會造成細胞的持續性增殖，進而形成腫瘤。此外，Shi等[8]的研究發現CyclinD1在宮頸癌組呈現高表達，可作為早期宮頸癌診治的標志物。王新華等[9]的研究顯示CyclinD1的高表達促進了細胞周期進程，引起細胞增殖的失控，促進宮頸癌的發生，該組結果與其一致。

在DLC-1和cyclinD1的相關性分析中，發現DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌中的表達呈負相關性(r=-0.519，P<0.05)。結果提示了，DLC-1的低表達和cyclinD1的高表達在宮頸鱗狀細胞癌的發生、發展、侵襲中起重要作用。

綜上所述，DLC-1在宮頸鱗狀細胞癌的陽性表達較低，而cyclinD1在宮頸鱗狀細胞癌的陽性表達較高，兩者均與宮頸鱗狀細胞癌發展、侵襲、轉移等密切相關。

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[3]宋明芮,蓋大偉,張曉云,等.抑癌基因DLC-1的研究進展[J].現代生物醫學進展,2014,14(20):3970-3972,4000.

[4]車楊,郭天康,馬云濤,等.DLC-1與MMP-9在胃癌黏膜中的表達及臨床意義[J].寧夏醫科大學學報,2013,35(8):872-876.

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[6]Seng TJ,Low JS,Li H.The major 8p22 tumor suppressor DLC1 is frequently silenced by methylation in both endemic and sporadic nasopharyngeal,esophageal,and cervical carcinomas,and inhibits tumor cell colony formation[J].Oncogene,2007,26(6):934-944.

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Expression and Significance of DLC-1 and CyclinD1 in Cervical Squamous Cell Carcinoma

CHEN Xiao-yan
Pathology department,MCH of Tai'an city,Tai'an,ShandongProvince,271000 China

Objective To investigate the expression of DLC-1 and cyclinD1 in cervical squamous cell carcinoma.Methods 62 cases of cervical squamous cell carcinoma samples,38 cases of cervical intraepithelial neoplasia samples,26 cases of normal cervical tissue samples from January 2005 to December 2013 were selected,and the expression of DLC-1 and cyclinD1 were detected by immunohistochemistry SP method.Results The positive expression of DLC-1 in cervical squamous cell carcinoma,cervical intraepithelial neoplasia,and normal cervical tissue,were 27.4%,76.3%,and 92.3%respectively,the difference was statistically significant(P<0.05);The positive expression of DLC-1 in high,middle,and low pathological grade were 42.9%、27.9%、16.7%respectively,the difference was statistically significant(P<0.05);The positive expression of DLC-1 inⅠ～Ⅱa was 41.4%,which was significantly higher thanⅡb～Ⅳ15.2%(P<0.05);The positive expression of DLC-1 in patients without lymph node metastasis was 34.9%,which was significantly higher than patients with lymph node metastasis 10.5%(P<0.05)。The positive expression of cyclinD1 in cervical squamous cell carcinoma,cervical intraepithelial neoplasia,and normal cervical tissue,were 66.1%,5.3%,0% respectively,the difference was statistically significant(P<0.05);The positive expression of cyclinD1 in high,middle,and low pathological grade were 42.9%,67.4%,75.0%respectively,the difference was statistically significant(P<0.05);The positive expression of cyclinD1 inⅠ～Ⅱa was 48.3%,which was significantly higher thanⅡb～Ⅳ81.8% (P<0.05);The positive expression of cyclinD1 in patients without lymph node metastasis was 58.1%,which was significantly higher than patients with lymph node metastasis 84.2%(P<0.05).The expression of DLC-1 and cyclinD1 in cervical squamous cell carcinoma showed a negative correlation(r=-0.519,P<0.05).Conclusion The expression of DLC-1 in squamous cell carcinoma is lower,and expression of cyclinD1 in squamous cell carcinoma is higher,and both of them are closely related to the stage,grade,and lymph node metastasis of squamous cell carcinoma.

Squamous cell carcinoma;DLC-1;CyclinD1

R4

A

1674-0742（2015）08（a）－0014-03

2015-05-08）