二陳止嗽顆粒中揮發油的β-環糊精包合物制備工藝研究

吳莉莉 楊 飛

（1河南省藥品審評認證中心，鄭州450000；2河南省鄭州市食品藥品檢驗所，鄭州450006）

二陳止嗽顆粒中揮發油的β-環糊精包合物制備工藝研究

吳莉莉1楊 飛2*

（1河南省藥品審評認證中心，鄭州450000；2河南省鄭州市食品藥品檢驗所，鄭州450006）

目的優選二陳止嗽顆粒中揮發油的β-環糊精(β-CD)包合最佳工藝。方法以揮發油包封率為評價指標，對飽和水溶液法、研磨法及超聲法進行比較實驗。采用正交實驗法對優選出的包合方法的最佳包合工藝條件進行考察。結果優選出的包合方法為研磨法，最佳包合工藝條件為：揮發油與β-環糊精(β-CD)的投料比為1 mL∶7 g，加3倍量水，研磨1 h。結論該工藝切實可行，重復性好，適合于工業化生產。

二陳止嗽顆粒；揮發油；β-環糊精；包合物；制備工藝

二陳止嗽顆粒由陳皮、茯苓、清半夏、紫蘇子四味藥物組成，具有燥濕化痰、止咳平喘的功效，臨床上主要用于治療痰濕咳喘，痰多，氣逆喘促，嘔惡胸悶等。陳皮為蕓香科植物橘（Citrus reticulata Blanco）及其栽培變種的干燥成熟果皮［1］，為方中君藥，其揮發油具有平喘、鎮咳和抗變應性炎癥等作用［2］。陳皮揮發油易揮發，遇光、氧、熱和水分易氧化分解，穩定性較差，從而嚴重影響陳皮的功效。為了提高陳皮揮發油的利用率和穩定性，本研究采用β-環糊精（β-CD）對陳皮揮發油進行包合，揮發油與β-環糊精制成環糊精包合物后，能顯著改善藥物理化性質，以降低其揮發性，增加穩定性和水溶性，并有利于顆粒劑的成型。

1 儀器與試藥

揮發油提取器（北京分析儀器廠）；AEL-300A電子天平（日本島津）；恒溫磁力攪拌器（上海雷磁新涇儀器有限公司）；DM1000顯微鏡（德國徠卡）；TU-1800型紫外可見分光光度計（北京普析）；陳皮經河南中醫學院第一附屬醫院陳天朝主任藥師鑒定為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮，符合2010版《中國藥典（一部）》項下的相關規定；β-CD（曲阜天利藥輔）；陳皮揮發油為實驗室提取，水為純化水，所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 揮發油β-環糊精包合方法的選擇

2.1.1 包合物的制備制備β-CD包合物，常用的方法有三種［3］，飽和水溶液法，研磨法和超聲法。本實驗采用三種方法分別對揮發油進行包合，優選包合方法。

研磨法：稱取β-CD 5 g，加入15 mL純化水，研勻。加入l mL揮發油(用無水乙醇預先配成50%的溶液)，研磨2小時后，減壓濾過。棄去濾液，再用石油醚沖洗3次(每次10 mL)，抽濾，放入真空干燥箱中，40℃真空干燥至白色粉末狀包合物，稱重，備用。

飽和水溶液法：稱取β-CD 5 g，置于燒杯中，加入純化水125 mL，加熱溶解，冷卻并于磁力攪拌器上恒溫于50℃，加入1 mL揮發油(用無水乙醇預先配成50%的溶液)，恒溫攪拌3小時，冷卻置室溫，放入冰箱冷藏24 h，抽濾，石油醚沖洗3次(每次10 mL)，40℃真空干燥至白色粉末狀包合物，稱重，備用。

超聲法：精密稱取β-CD 5g，置于具塞錐形瓶中，加入純化水125 mL，混合均勻。精密量取1 mL揮發油(用無水乙醇預先配成50%的溶液)，逐滴加入β-CD水溶液中，同時超聲處理，超聲3h，取出，冷藏24h，抽濾，包合物用石油醚沖洗3次(每次10 mL)，40℃真空干燥至白色粉末狀包合物，稱重，備用。

2.1.2 包合物中揮發油含量及包合物空白收率的測定分別取“2.1.1”項下三種方法制備的包合物置于揮發油測定器中，按《中國藥典》（2010年版一部）附錄XD揮發油測定法（甲法）進行操作，讀取揮發油量，即得包合物中實際含油量。

另精密量取1 mL揮發油(用無水乙醇預先配成50%的溶液)，置500 mL的圓底燒瓶中，加150 mL蒸餾水，按《中國藥典》（2010年版一部）附錄XD揮發油測定法（甲法）測定，收集揮發油，至油量不再增加時為止，計算揮發油空白回收率。揮發油空白回收率=［收集揮發油體積（mL）/加入揮發油體積（mL）］×100%。

2.1.3 揮發油包封率計算公式揮發油包封率(%)=包合物中實際含油量/（揮發油加入量×空白回收率）× 100%。以揮發油包封率為指標，比較3種包合方法，結果見表1。

表1 不同包合方法對揮發油包封率的影響（%）

由表1可見，研磨法明顯優于飽和水溶液法和超聲法，因此選擇研磨法作為包合物的制備方法。

2.2 正交試驗法篩選研磨法制備陳皮揮發油β-CD包合工藝條件在確定包合方法為研磨法的基礎上，選擇揮發油與β-CD的投料比、加水倍數及研磨時間為考察因素［4］，以陳皮揮發油包封率為考察指標，優選出最佳工藝條件，因素水平見表2，試驗安排及方差分析見表3、表4。

表2 正交試驗因素水平表

移取1 mL揮發油（用無水乙醇預先配成50%的溶液）至研缽中，采用Lq(34)正交試驗表安排試驗，取β-CD適量，加入一定量蒸餾水中，研勻，研磨一定時間后，減壓濾過。棄去濾液，再用石油醚沖洗3次（每次10 mL），抽濾，放入真空干燥箱中，40℃真空干燥至白色粉末狀包合物，稱重，備用。取包合物置于揮發油測定器中，并照《中國藥典》一部2010年版附錄XD揮發油測定法(甲法)進行操作，讀取揮發油量，計算揮發油的包封率。

表3 正交實驗設計方案及數據分析

表4 正交試驗方差分析結果

方差分析結果表明：“因素A具有顯著性，故影響最大的因素為陳皮揮發油與β-CD的投料比，而加水倍數與研磨時間影響不大。”由此可見，因素A取A3，因素B、C取任意水平，故結合生產實際確定最優提取工藝條件為A3B1C1為最佳包合工藝，即陳皮揮發油與β-CD的投料比1∶7，加3倍量水，研磨1小時。

2.3 包合物的驗證

2.3.1 紫外光譜法對包合物的驗證以水、乙醇為溶劑（空白溶液與溶劑相對應），在190～400 nm波長范圍內，分別對混合揮發油、β-CD、β-CD和揮發油混合物、揮發油β-CD包合物作紫外光譜掃描（見圖1），從4圖的峰位變化可以看出，混合揮發油的紫外吸收峰在其包合物中已經消失，說明混合揮發油已經和β-CD形成包合物。

圖1 β-CD、β-CD包合物水溶液、回收揮發油和包合前揮發油醇溶液紫外掃描圖

2.3.2 薄層色譜法對包合物的驗證取β-CD揮發油包合物1 g，加乙醇5 mL攪拌，浸泡1 h后過濾，得濾液（樣2），與β-CD（樣1），包合物中提取的揮發油（樣4），用包合前揮發油作為對照品（3），將樣品和對照品分別溶解在乙醚中，點樣于同一硅膠薄層板，以醋酸乙酯-正己烷-氯仿（1∶9∶5）為展開劑展開，用5%香草醛濃硫酸噴霧顯色（見圖2）。包合前后揮發油斑點完全一致，說明包合前后揮發油主要成分無差異，在揮發油的斑點對應處，β-CD與β-CD包合物未見斑點。說明揮發油已形成包合物。

圖2 包合物中揮發油薄層圖

2.3.3 顯微成像法(EM)鑒別分別取β-CD、揮發油β-CD包合物適量，置于載玻片上滴加適量的純化水，使之分散，蓋上載玻片，用顯微鏡觀察其成像［5］，結果見圖3。對比β-CD、揮發油β-CD包合物的顯微成像圖，可以看到β-CD為透明無色立方體狀結晶，β-CD包合物為黑色團狀物質。包合前后β-CD形態的變化，表明新物相即包合物的形成，揮發油和β-CD形成了包合物。

圖3 β-CD(A)和β-CD包合物(B)顯微成像圖

3 討論

揮發油直接加入到顆粒劑中，隨貯存時間的延長，易揮發損失，揮發油與β-環糊精制成包合物后，使液體藥物為粉末狀，減少揮發散失，且把揮發油固化，易制成多種劑型，并增加其穩定性，便于制劑及儲存。本研究經過正交實驗對研磨法進行優選，并確定最佳包合工藝。采用研磨法對陳皮揮發油進行β-CD包合，具有操作方便、包封率高等優點，可用于大生產，為增加二陳止嗽顆粒及含陳皮中藥制劑揮發油的穩定性，提供了參考依據。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:176-177.

［2］蔡周權，代勇，袁浩宇.陳皮揮發油的藥效學實驗研究［J］.中國藥業，2006，15 (13):29.

［3］胡志林，陳衛軍，邊文貴，等.升白膠囊中揮發油β-環糊精包合物的制備研究［J］.時珍國醫國藥，2006，17(4):539-540

［4］嚴建業，夏新華.β-環糊精包合荊芥、陳皮揮發油的工藝研究［J］.中成藥，2010，25（8）:612-614

［5］張生潭，張帆，汪鐵山，等.正交實驗法優選春砂仁揮發油羥丙基-β-環糊精包合工藝［J］.中國藥房，2011，22(3):225-227.

Study on Preparation of β-cyclodextrin Inclusion Compound of Oils in Erchen Zhisou Granules

WU Lili1,YANG Fei2
（1 Drug Evaluation and Certification of Henan Province,Zhengzhou450000,China；2 Food and Drug Inspection Institute of Zhengzhou,Zhengzhou450006,China）

Objective To optimize the inclusion optimum particles of the oil of particles Erchen Zhisou Betacyclodextrin inclusion. Methods To volatile oil coating rate as the evaluation index,the saturated water solution method,grinding method and ultrasonic method on the basis of the comparison experiment.Using orthogonal experiment method for optimizing the inclusion of best inclusion process conditions was investigated.Results The inclusion of optimum seeking method for grinding method,the optimal inclusion technology conditions as follows:the essential oil and beta cyclodextrin(beta CD)weight ratio of 1 ml:7g,with three times the amount of water,grinding 1 h.Conclusion The technology is feasible,good repeatability,and suitable for industrial production.

erchen zhisou granules；volatile oil；betacyclodextrin；clathrate；preparation

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.05.070

1672-2779（2015）-05-0144-03

：楊杰本文校對：康輝

2015-02-09）

*通訊作者：18638775939@163.com