腦卒中陰虛風動型頸動脈硬化與HP CagA-VacA-相關(guān)性研究

李 霞，劉麗芳*，于紅霞

（1．長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，長春130021；2．空軍航空大學校務(wù)部門診部，長春130022）

?臨床研究?

腦卒中陰虛風動型頸動脈硬化與HP CagA-VacA-相關(guān)性研究

李 霞1，劉麗芳1*，于紅霞2

（1．長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，長春130021；2．空軍航空大學校務(wù)部門診部，長春130022）

目的 研究幽門螺旋桿菌（HP）CagA-VacA-感染在陰虛風動型腦卒中頸動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用。方法 對108例腦卒中患者運用病例對照的方法，對腦卒中組和健康組的血清HP不同亞型抗體和相關(guān)基因進行檢測。結(jié)果 陰虛風動證腦卒中患者頸動脈粥樣硬化HP陽性率明顯高于健康組（P＜0.05）；HP CagA-VacA-感染率（62.0%）占優(yōu)勢（P＜0.05），比值比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）是2.04（1.10～3.93），經(jīng)調(diào)整各匹配因素后OR及95%CI為3.18（2.40～5.18）。結(jié)論 陰虛風動型腦卒中頸動脈粥樣硬化患者與HP感染相關(guān)，其中CagA-VacA-菌株作用明顯。

陰虛風動；腦卒中；CagA-VacA-菌株

病原體感染和動脈粥樣硬化的關(guān)系的研究是個古老課題，早在一百年前就有人提出感染和動脈粥樣硬化有關(guān)。由于脂質(zhì)浸潤學說和損傷反應(yīng)學說逐漸占據(jù)了主導(dǎo)地位，而被人們忽視。但近年來，隨著對動脈粥樣硬化發(fā)病機制的研究不斷的深入，病原體感染與動脈粥樣硬化性疾病的關(guān)系再次成為了該研究領(lǐng)域的熱點問題。國內(nèi)外的大量流行病學調(diào)查結(jié)果顯示，在患動脈粥樣硬化性心腦血管病的人群中，病原體抗體的陽性率明顯高于健康人群，病原體感染是心腦血管疾病發(fā)病的獨立危險因素，并認為HP［1］、influenza virus、EBV等與動脈粥樣硬化的發(fā)生密切相關(guān)。筆者在臨床工作期間對近年來收治的缺血性中風的患者與HP感染的相關(guān)性進行了分析。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 腦卒中組為2010年2月—2012年8月長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院腦病科住院的52例腦卒中患者。其中男32例，女20例，年齡52～76歲，平均年齡（62.4±9.8）歲，其發(fā)病時間都在24 h之內(nèi)的急性期，符合中華醫(yī)學會神經(jīng)病學分會腦血管病學組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組制定的《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010》和中國中西醫(yī)結(jié)合學會神經(jīng)科專業(yè)委員會制定的《腦梗死和腦出血中西醫(yī)結(jié)合診斷標準》［2］。健康組為同時期性別、發(fā)病年齡、文化程度、收入水平、既往病史相匹配的健康合并頸動脈粥樣硬化者56例，其中男30例，女26例，年齡52～78歲，平均年齡（61.9±10.2）歲。2組在性別、發(fā)病年齡、文化程度、收入水平、既往病史等情況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 108例腦卒中患者與健康者臨床資料比較分析

2組均予飛利浦IU-22型彩色多普勒對頸內(nèi)外動脈分叉處及直徑1.5 cm的范圍內(nèi)進行超聲檢查，頸動脈粥樣硬化的判定標準為頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）的結(jié)果。IMT值在1.0～1.5 mm的為頸動脈硬化初期；IMT值超過1.5 mm，且向血管內(nèi)腔凸出增厚的內(nèi)膜為有頸動脈粥樣斑塊形成。參照國家中醫(yī)藥管理局制定的《腦梗死和腦出血中西醫(yī)結(jié)合診斷標準》、高等醫(yī)藥院校第7版《中醫(yī)診斷學》和《中醫(yī)臨床診療術(shù)語——證候部分》中的相關(guān)內(nèi)容，將眩暈耳鳴，煩躁不寐，手足心熱，咽干口燥，舌質(zhì)紅或體瘦有裂紋，少苔或無苔，脈弦細數(shù)的患者定為陰虛風動型頸動脈粥樣硬化患者。入組的108例在入組前1個月均無抗生素的治療史。

1.2 研究方法 2組患者血清均用由鄭州華美生物工程公司提供試劑盒進行間接酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定，以幽門螺旋桿菌特異抗HP-IgG抗體來判斷是否存在HP感染。由上海元谷科技發(fā)展有限公司提供試劑盒進行血清抗HP CagA-IgG抗體及抗-HP VacAIgG抗體檢測。HP感染呈陽性研究對象中抗HP-IgG血清，均用免疫印記法進行抗-HP CagA-IgG抗體和抗HP VacA-IgG抗體的檢測。判斷HP為何種毒力亞型感染是依據(jù)CagA、VacA抗體的檢測情況。Ⅰ型為CagA＋VacA＋HP菌株感染，Ⅱ型即中間型為CagA＋／VacA＋HP感染；Ⅱ型即CagA-VacA-HP菌株感染。對3例感染CagA-VacA-菌株患者，對動脈粥樣斑塊行頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)，進行3 S柱提取法，以SS1菌株的HP做陽性對照，陰性對照是去離子水代替模板，用PCR方法進行擴增，對擴增的產(chǎn)物進行凝膠電泳、DNA測序分析。

1.3 統(tǒng)計學方法 統(tǒng)計學數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計學分析軟件進行處理，定量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（±s）表示，檢驗方法采用 t檢驗，檢驗水準取α＝0.05。用χ2檢驗和Fisher精確檢驗進行率的比較；多因素分析用條件logistic回歸法。

2 結(jié)果

2.1 腦卒中患者HP感染狀況比較 見表2。

表2 腦卒中患者HP感染狀況比較 例（%）

2.2 陰虛風動型頸動脈粥樣硬化患者血清抗HPCagA-IgG抗體和抗HPVacA-IgG抗體檢測 見表3。

表3 陰虛風動型頸動脈粥樣硬化患者不同毒力亞型HP感染狀況 例（%）

2.3 動脈粥樣斑塊HP CagA、VacA和glmM基因檢測

對3例感染CagA-VacA-菌株患者，對動脈粥樣斑塊行頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)，進行3 S柱提取法，以SS1菌株的HP做陽性對照，陰性對照是去離子水代替模板，用PCR方法進行擴增，對擴增的產(chǎn)物進行凝膠電泳、DNA測序分析，結(jié)果為陰性。

3 討論

陰虛風動型腦卒中是腦卒中最常見的一個證型，由于肝腎陰虛，風陽內(nèi)動，上擾清竅所致。臨床上以突發(fā)口眼歪斜，言語不利，手足■動甚至半身不遂，伴舌質(zhì)紅，苔膩，脈弦細為主要證候。本研究從中醫(yī)辨證角度出發(fā)，采用病例對照研究方法，對本院52例腦卒中患者和56例健康者的幽門螺旋桿菌感染狀況進行調(diào)查分析，其腦卒中患者的HP感染率（61.5%）明顯高于健康組（44.6%），其 OR及95%CI是2.04（1.10～3.93），再次證實了HP感染不但與消化性潰瘍、活動性胃炎、胃癌以及胃黏膜相關(guān)淋巴瘤等疾病關(guān)系密切，也是腦卒中的危險因素之一［3-8］。Sebastian［9］、Farsak等［10］研究均發(fā)現(xiàn)，在人頸動脈粥樣硬化斑塊中存在HP，說明HP感染和頸動脈粥樣硬化斑塊密切相關(guān)［11］。

HP-CagA感染可造成頸部血管炎癥，誘導(dǎo)并參與頸動脈斑塊的形成，HP-CagA感染誘導(dǎo)并參與頸動脈斑塊形成的機制可能為HP-CagA可在細胞內(nèi)特定部位被磷酸化，引發(fā)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，快速引發(fā)肌蛋白的聚合及細胞骨架的重新排列，導(dǎo)致頸動脈內(nèi)膜細胞壞死［12］。在各種HP菌株中，CagA和VacA基因大多同時存在。感染的HP與HP中CagA和VacA基因的表達呈正相關(guān)，說明HP產(chǎn)生的兩種主要毒力因子正是CagA編碼的CagA蛋白和VacA編碼的VacA蛋白［13］。陰虛風動腦卒中患者的Ⅱ型（CagA-VacA-）HP菌株感染率比Ⅰ型（CagA＋VacA＋）和中間型（CagA＋／VacA＋）呈明顯增高趨勢，較健康組也升高。筆者認為Ⅱ型（CagA-VacA-）HP菌株可能與陰虛風動型腦卒中密切相關(guān)。但本研究樣本量小，患者來源單一，其結(jié)論尚待進一步加大樣本量和長期隨訪、多中心的深入研究。

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Stroke（type of yin deficiency pneumatic）carotid atherosclerosis and HP CagA-VacA-

LI Xia1，LIU Lifang1*，YU Hongxia2
（1．Medical Department of Nerves，The First Affiliated Hospital to Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130021，China；2．Department of Traditional Chinese Medicine，China-Japan Union Hospital of Jilin University，Changchun 130022，China）

Objectives To research the effects of helicobacter pylori（HP）CagA-VacA-in the developing of carotid atherosclerosis（type of stirring wind due to yin deficiency）．Methods According to 108 cases of stroke patients，the experiment stroke uses case control method to detect the serum hp antibody of different subjects of the stroke group and heal group and the related．Results HP positive rate of yin meumatic the stroke patientes with carotid atherosclerosis is signficantly higher than healthy group（P＜0．05）；HP CagA-VacA-an advantage infection rate（50．0%）（P＜0．05），the odds ratio confidence matching factors OR and 95%CI3．18（2．40-5．18）．Conclusion The type of Yin deficiency pneumatic stroke patients with carotid artery atherosclerosis is associated with HP infection，the CagA-VacA-strain effect is obvious．

type of yin deficiency pneumatic；strock；CagA-VacA-；bacterial strain

R255.2

A

2095-6258（2015）05-0970-03

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．05．032

2015-05-06）

吉林省教育廳課題（〔2013〕86號）。

李 霞（1974-），女，博士，副主任醫(yī)師，主要從事中醫(yī)腦病的研究。

*通信作者：劉麗芳，電話-13354307879，電子信箱-tigerluck75＠163．com