4種殺菌劑對紅花芍藥褐斑病的室內毒力

錢永生，蔡 蘇，馬婉琴，樓鈺函，倪炎棟，吳劍丙

(杭州師范大學,生命與環境科學學院,浙江杭州 310036)

4種殺菌劑對紅花芍藥褐斑病的室內毒力

錢永生，蔡 蘇，馬婉琴，樓鈺函，倪炎棟，吳劍丙*

(杭州師范大學,生命與環境科學學院,浙江杭州 310036)

紅花芍藥(Paeonia lactiflora‘Hong hua’)褐斑病是其生產上較為常見的病害之一。在實驗室前期研究工作中發現,總狀毛霉(Mucor racemosus)是引起紅花芍藥褐斑病的重要致病菌。本試驗測定總狀毛霉對4種常用殺菌劑的藥物敏感性,結果顯示,戊唑醇、腐霉利、異菌脲和多菌靈對總狀毛霉的抑制中濃度(EC50值)分別為12.01,168.58,691.02,6 249.66 μg·mL-1。由此可見,戊唑醇對由總狀毛霉引起的紅花芍藥褐斑病防治效果最佳。

紅花芍藥;褐斑病;總狀毛霉;藥敏試驗

文獻著錄格式:錢永生,蔡蘇,馬婉琴,等.4種殺菌劑對紅花芍藥褐斑病的室內毒力[J].浙江農業科學,2015,56(9):1454-1456.

DOI 10.16178/j.issn.0528-9017.20150937

芍藥(Paeonia lactiflora)為芍藥科芍藥屬多年生宿根草本花卉,花梗挺直,花色豐富,花姿典雅,是我國傳統名花,具有3 900年的栽培歷史,在庭院、景區栽培和盆栽等方面被廣泛運用,與牡丹并稱為“花王”與“花相”,在國外也有“花中皇后”的美稱。此外,芍藥是我國傳統的中草藥,是浙江省道地藥材“浙八味”之一,主要用于治療炎癥性的疾病,如關節炎、肝炎等[1-3]。近年來其中草藥品質逐漸被人們認識,種植面積不斷擴大[4]。然而在栽培種植過程中,芍藥的各種病害問題日漸突出,如輪紋病引起芍藥植株葉片枯黃;白粉病使整個植株布滿白粉狀物質,嚴重影響觀賞價值;灰霉病危害芍藥的葉、花和莖,造成花蕾枯萎、葉片焦枯等;每年8、9月高溫多雨季節,芍藥炭疽病發病嚴重,引起黑褐色病斑,天氣潮濕時,病斑表面產生粉紅色孢子堆[5-7]。化學農藥是防治植物病害最直接有效的方法。但農藥的不合理使用造成環境污染、藥品殘留超標及病菌耐藥等問題,對藥用植物的安全生產造成重大隱患。因此,提高中藥材的安全衛生質量,合理篩選殺菌劑,以達到最佳藥理品質,是當前藥用植物病害防治研究工作的重點。弄清化學農藥對病原菌的殺菌效果,可有效指導合理用藥,科學用藥[8]。

本試驗通過測定浙江省磐安地區紅花芍藥褐斑病病原菌——總狀毛霉對4種殺菌劑的藥物敏感性,確定常用化學殺菌劑最佳殺菌效果,為芍藥真菌病害合理用藥提供理論依據及科學指導。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌株紅花芍藥褐斑病病株于2013年6月采集自浙江省磐安地區,病原菌經鑒定為總狀毛霉,并保存在浙江省藥用植物種質改良與質量控制技術重點實驗室。

供試藥劑有80%多菌靈可濕性粉劑(江蘇省太倉市農藥廠有限公司),測試濃度為0,10,20, 160,320,640,1 280,2 560,10 240 μg·mL-1; 500 g·L-1異菌脲懸浮劑(拜耳作物科學(中國)有限公司),測試濃度為0,78,155,310,620, 1 250,2 500,5 000,10 000,20 000 μg·mL-1;鹽城利民農化有限公司生產的91.5%戊唑醇原藥,測試濃度為0,1.25,2.5,5,10,20,40 μg· mL-1;50%腐霉利可濕性粉劑(日本住友化學工業株式會社),測試濃度為0,1,2,4,8,16, 32,64,128,256,1 024 μg·mL-1。

1.2 處理設計

試驗設多菌靈、異菌脲、戊唑醇、腐霉利等4種殺菌劑不同處理濃度,殺菌劑按不同處理濃度加入新的PDA平板,以未加的PDA平板作對照,同一條件下接種直徑為0.5 cm的總狀毛霉病原菌,并于25℃恒溫黑暗倒置培養,重復6個,至對照病原菌直徑生長距平板邊緣0.5 cm處時停止培養。采用十字交叉法進行測量統計及拍照記錄。

根據藥物篩選結果,以設定的藥劑濃度為橫坐標,以病原菌生長相對直徑作縱坐標,采用SigmaPlot軟件繪制藥物敏感濃度回歸曲線,求出各藥劑對病原菌的毒力回歸方程、抑制中濃度(EC50值)及相關系數(R2)。

2 結果與分析

2.1 藥劑敏感性

測定紅花芍藥褐斑病致病菌總狀毛霉對4種殺菌劑敏感性。由圖1可見,4種殺菌劑對總狀毛霉均有抑制作用。其中,戊唑醇效果最佳,在40 μg· mL-1時真菌基本無法生長,而異菌脲和多菌靈在極高濃度下仍不能完全抑制真菌生長。此外,預實驗所用的腐霉利濃度128 μg·mL-1的抑菌效果不佳。

圖1 總狀毛霉對異菌脲、腐霉利、多菌靈和戊唑醇的敏感性

2.2 EC50值

根據預實驗結果,設定殺菌劑濃度梯度,測定總狀毛霉對4種殺菌劑的EC50值,計算菌絲生長抑制率。

抑制率/%=(對照處理菌落直徑-殺菌劑處理菌落直徑)/(對照處理菌落直徑-0.5)×100。

由表1可見,多菌靈濃度為2 560 μg·mL-1時,對總狀毛霉的抑制率僅為35.47%,與使用異菌脲310 μg·mL-1時抑制效果相當,而戊唑醇10 μg·mL-1效果較前2種殺菌劑好。

表1 4種殺菌劑對紅花芍藥致病菌（總狀毛霉）菌絲生長的抑制效果

進一步計算4種殺菌劑對總狀毛霉的毒力回歸方程、抑制中濃度(EC50值)及相關系數(R2) (表2)。

表2 4種殺菌劑對紅花芍藥致病菌總狀毛霉的EC50測定

其中,多菌靈的EC50值最大,為6 249.66 μg· mL-1,戊唑醇EC50值最小,僅為12.01 μg·mL-1,其余異菌脲EC50值為691.02 μg·mL-1,腐霉利EC50值為168.59 μg·mL-1。這一結果與平板試驗相一致,戊唑醇對總狀毛霉的抑菌效果最佳。

3 小結與討論

近年來,隨著我國中藥材植物種植面積的不斷擴大和自然生態環境的不斷改變,造成藥用植物病害問題日漸突出,對藥材產量和質量產生很大威脅[9]。據有關資料統計,一般病害可造成藥用植物產量減少20%～30%,嚴重的高達50%,甚至絕收[10]。藥用植物的真菌病害屢見報道張爭等[11]報道可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)可引起白木香枝枯病;趙云青等[12]發現羅氏小核菌(Sclerotium rolfsii)可引起金線蓮白絹病;羅有強等[13]曾報道膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)可引起山麥冬葉枯病等。目前,對于中藥材農藥殘留檢測已引起生產者和研究人員的重視,吳加倫等[14]在白芍中檢測發現有機氯殘留。因此,如何篩選合適的殺菌劑,達到最佳防治效果及合理用藥,對于藥用植物栽培管理具有重要意義。本試驗采用生長速率法測定4種殺菌劑對紅花芍藥褐斑病病原菌總狀毛霉的室內毒力測定,結果顯示,多菌靈和異菌脲的防效較差,用藥濃度高,有殘留及污染的風險。戊唑醇殺菌效果最佳,可用于浙江地區紅花芍藥及其他藥用植物病害治理。此外,本研究僅提供了室內藥物敏感性分析,田間藥效還需進一步驗證,以期為解決浙江地區紅花芍藥及其他藥用植物存在的病害提供合理的防治策略。

[1] 肖仲久,李小霞,桑維鈞,等.幾種殺菌劑對芍藥炭疽病菌的室內毒力測定[J].遵義師范學院學報,2008,10 (1):49-51.

[2] 姜瑤,葛金濤,寧傳龍,等.芍藥病害種類及其品種感病性調查[J].江蘇農業科學,2013,41(1):125-127.

[3] Mo X Y,Zhao N N,Du X Y,et al.The protective effect of peony extract on acute myocardial infarction in rats[J]. Phytomedicine,2011,18:451-457.

[4] 李成忠,孫燕,趙大球,等.芍藥花莖生長形態指標與機械強度的關系[J].浙江農業學報,2015,27(2):182-188.

[5] 喻璋.牡丹、芍藥的六種真菌病害研究初報[J].河南農業大學學報,1987,21(4):435-438.

[6] 馬平,曹云翔.芍藥病害的發生及其綜合防治[J].江西植保,2004,27(1):5-6.

[7] 王建國,張佐雙.中國芍藥[M].北京:中國林業出版社, 2005.

[8] 成家壯.植物病原真菌的抗藥性與殺菌劑的混配[J].廣州化工,2008,36(4):1-5.

[9] 韓長志.植物病害生防菌的研究現狀及發展趨勢[J].中國森林病蟲,2015,34(1):33-37.

[10] 呂先真,鄭永利.“浙八味”中藥材病蟲原色圖譜[M].浙江:浙江科學技術出版社,2005.

[11] 張爭,楊云,魏建和,等.白木香枝枯病病原菌的鑒定[J].中國中藥雜志,2013,38(11):1707-1711.

[12] 趙云青,黃穎楨,陳菁瑛,等.金線蓮白絹病病原菌分離及分子鑒定[J].福建農業學報,2013,28(4):357-360.

[13] 羅有強,翟珍珍,宋水林,等.山麥冬葉枯病病原菌分離鑒定[J].江西植保,2010,33(3):119-120.

[14] 吳加倫,鄒耀華,李麗青.白芍和黃連中十五種有機氯和擬除蟲菊酯類農藥的多殘留分析方法[J].農藥學學報, 2006,8(1):65-70.

(責任編輯：張瑞麟)

S 482.2

A

0528-9017(2015)09-1454-03

2015-04-24

浙江省教育廳項目(Y201431430);浙江省自然科學基金(LY14C010003);浙江省大學生科技創新活動計劃暨新苗人才計劃(2015R423048);杭州市科技發展計劃項目(20130432B07);浙江省藥用植物種質改良與質量控制技術重點實驗室開放項目(201308,201313)

錢永生(1980-),男,浙江蕭山人,實驗師,主要從事植物真菌病害研究及管理工作。E-mail:qianyongsheng@163.com。

吳劍丙。E-mail:jianbingwu@zju.edu.cn。