苓桂術(shù)甘合三拗湯止咳、化痰、平喘作用的實(shí)驗(yàn)研究*

河北中醫(yī)學(xué)院 (石家莊050091)

溫瑞書(shū) 宋翠淼 鄧國(guó)興 許華洲 吳中秋 王文智 陳小玉△ 侯曉明△

咳嗽哮喘是臨床主要疾患之一，中醫(yī)對(duì)之有很好的療效，苓桂術(shù)甘湯和三拗湯均經(jīng)反復(fù)臨床實(shí)踐表明，療效滿意。苓桂術(shù)甘湯和三拗湯均可治療咳嗽哮喘，苓桂術(shù)甘湯針對(duì)宿病，三拗湯針對(duì)新疾，臨床多有宿病新發(fā)的咳嗽和哮喘，故理論上兩個(gè)方劑配合應(yīng)當(dāng)有協(xié)同作用。據(jù)此理論，筆者進(jìn)行了苓桂術(shù)甘合三拗湯的止咳、化痰、平喘療效的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 苓桂術(shù)甘合三拗湯的止咳、化痰作用

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物:昆明種小鼠，18～20 g，清潔級(jí)，雌雄各半，由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)709152 號(hào)。

1.1.2 藥物:苓桂術(shù)甘湯由茯苓、桂枝、白術(shù)、炙甘草四味藥組成。三拗湯由麻黃、苦杏仁、生甘草三味藥物組成，水煎時(shí)加生姜3 片。苓桂術(shù)甘合三拗湯為苓桂術(shù)甘湯和三拗湯等容劑混合液。氯化銨片，天津市力生制藥廠，批號(hào)0704003;桂龍咳喘寧膠囊(300 mg/粒)，山西桂龍醫(yī)藥有限公司，批號(hào)070301，國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào):Z20053135。咳必清(25 mg /粒)天津力生制藥股份有限公司，批號(hào)0703007。

1.1.3 試劑:氨水，石家莊市華迪化工工貿(mào)有限公司，批號(hào)20070313;0.25%苯酚紅，北京化工廠。氫氧化鈉(NaOH)，天津市化學(xué)試劑三廠。

1.1.4 儀器:721 型分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠。

1.1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:本實(shí)驗(yàn)資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較采用單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

1.2 方法與結(jié)果

1.2.1 止咳作用:昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量18～22 g，隨機(jī)分為9 組，每組8 只，分別為模型對(duì)照組、苓桂術(shù)甘合三拗湯(簡(jiǎn)稱(chēng)合方組)高、低劑量組、苓桂術(shù)甘湯高、低劑量組、三拗湯高、低劑量組、桂龍咳喘寧對(duì)照組、咳必清對(duì)照組。苓桂術(shù)甘湯和三拗湯均水煎，苓桂術(shù)甘合三拗湯合方為苓桂術(shù)甘湯和三拗湯等容劑混合液。模型對(duì)照組灌服等量蒸餾水，其他組灌胃給相應(yīng)藥。連續(xù)3 天，末次給藥1 h 后，分別將小鼠置于倒置的80 mL 燒杯中，內(nèi)放一棉球，用1 mL 注射器吸取氨水0.5 mL，注入棉球中，觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期。［1］

結(jié)果可見(jiàn)，苓桂術(shù)甘合三拗湯合方高低劑量組的小鼠咳嗽潛伏期明顯延長(zhǎng)，與模型對(duì)照組比較，差異有顯著性，P＜0.05;與三拗湯高、低劑量比較，潛伏期延長(zhǎng)，但差異無(wú)顯著性;與苓桂術(shù)甘湯高、低劑量比較，潛伏期明顯延長(zhǎng)，差異均有顯著性，P＜0.05。詳見(jiàn)表1。

表1 苓桂術(shù)甘合三拗湯對(duì)氨水致小鼠咳嗽的止咳作用 (±s)

表1 苓桂術(shù)甘合三拗湯對(duì)氨水致小鼠咳嗽的止咳作用 (±s)

注:與模型對(duì)照組比較，* P＜0.05;與苓桂術(shù)甘湯高低劑量組比較，☆P＜0.05;與咳必清對(duì)照組比較，◇P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)(只)劑量(g/kg)咳嗽潛伏期(s)53.88±22.00合方低劑量組 8 5 64.50±26.13＊☆◇合方高劑量組 8 10 76.13±20.75＊☆◇苓桂術(shù)甘湯低劑量組 8 6 45.38±18.00◇苓桂術(shù)甘湯高劑量組 8 12 52.50±35.00◇三拗湯低劑量組 8 4 56.25±20.75◇三拗湯高劑量組 8 8 64.88±17.63＊☆◇桂龍咳喘寧對(duì)照組 8 1.5 64.88±11.88＊☆◇咳必清對(duì)照組 8 0.3 32.00±8.73模型對(duì)照組8*

1.2.2 祛痰作用:昆明種小鼠，體質(zhì)量18～22 g，雌雄各半，隨機(jī)分為9 組，每組8 只，分別為模型對(duì)照組、苓桂術(shù)甘合三拗湯合方(簡(jiǎn)稱(chēng)合方組)高、低劑量組、苓桂術(shù)甘湯高、低劑量組、三拗湯高、低劑量組、桂龍咳喘寧對(duì)照組及氯化銨對(duì)照組，各給藥組連續(xù)3 天灌胃給藥，容量為0.2 mL/10 g 體質(zhì)量，模型對(duì)照組給予等量蒸餾水，末次給藥1 h 后，腹腔注射酚紅0.1 mL (5 mg)/10 g 體質(zhì)量，0.5 h/L 后處死動(dòng)物，剝?nèi)夤苤車(chē)M織，剪下自甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管，濾紙擦后，放入盛有2 mL 生理鹽水的試管中，再加0.1 mL NaOH (1 mol/L)，用721 型分光光度計(jì)(波長(zhǎng)546 μm)測(cè)OD 值，［2－4］(用OD 值表示酚紅排泌量多少，OD 值大表示酚紅排泌量多)。

結(jié)果可見(jiàn)，各給藥組氣管酚紅排泌量均高于模型對(duì)照組，苓桂術(shù)甘合三拗湯合方高、低劑量組、苓桂術(shù)甘湯高、低劑量組、三拗湯高、低劑量組的氣管酚紅排泌量均高于模型對(duì)照組，差異有顯著性，P＜0.05。說(shuō)明苓桂術(shù)甘合三拗湯合方高、低劑量組、苓桂術(shù)甘湯高、低劑量組、三拗湯高、低劑量組均顯示氣管酚紅排泌增加，而以苓桂術(shù)甘合三拗湯合方高劑量組為更佳。詳見(jiàn)表2。

2 苓桂術(shù)甘合三拗湯的平喘作用

表2 苓桂術(shù)甘合三拗湯對(duì)小白鼠氣管段酚紅排泌量的影響 (±s)

表2 苓桂術(shù)甘合三拗湯對(duì)小白鼠氣管段酚紅排泌量的影響 (±s)

注:動(dòng)物數(shù)減為7 只，是因?yàn)槿夤芏螘r(shí)有不成功的。與模型對(duì)照組比較，* P＜0.05;與苓桂術(shù)甘湯高低劑量組比較，☆P＜0.05;與桂龍咳喘寧對(duì)照組比較，◇P＜0.05;與氯化銨對(duì)照組比較，△P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)(只) 劑量(g/kg) 氣管酚紅排泌量(OD 值)0.036 88±0.003合方高劑量組 8 10 0.077 75±0.024＊☆◇△合方低劑量組 8 5 0.062 88±0.034＊◇△苓桂術(shù)甘湯高劑量組 7 12 0.054 00±0.041*苓桂術(shù)甘湯低劑量組 7 6 0.051 71±0.024*三拗湯高劑量組 8 8 0.072 25±0.027＊☆◇△三拗湯低劑量組 7 4 0.059 00±0.040*桂龍咳喘寧對(duì)照組 8 1.5 0.042 25±0.013氯化銨對(duì)照組模型對(duì)照組7 0.5 0.042 25±0.012 8

2.1 材料和方法

2.1.1 藥物:苓桂術(shù)甘湯(伏苓12 g，桂枝9 g，白術(shù)6 g，炙甘草6 g)三拗湯(麻黃、苦杏仁各9 g，生甘草3 g，水煎時(shí)加生姜3 片)。氨茶堿(100 mg/片)石家莊歐意藥業(yè)有限公司，批號(hào)040070401，國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào):H13021033。

2.1.2 動(dòng)物:DH 豚鼠，清潔級(jí)，體質(zhì)量200～250 g，雌雄兼用，由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)710096 號(hào)。

2.1.3 試劑:磷酸組織胺，上海楷洋生物技術(shù)有限公司，批號(hào)0703131;氯化乙酰膽堿，上海楷洋生物技術(shù)有限公司，批號(hào)0703151。

2.1.4 儀器:超聲霧化器，Yc—Y800 型，亞都科技有限公司;噴霧裝置，自制。

2.1.5 敏感動(dòng)物的選擇:取豚鼠分別置入4 L玻璃杯中，以最大恒壓氣霧噴入0.1%磷酸組織胺和2%氯化乙酰膽堿等容積混合液5 s，吸入10 s，打開(kāi)風(fēng)門(mén)，觀察豚鼠哮喘發(fā)作的潛伏期(哮喘發(fā)作的時(shí)間以噴霧開(kāi)始至豚鼠出現(xiàn)抽倒起計(jì)算)，引喘潛伏期小于150 s 為敏感。

2.1.6 敏感動(dòng)物的分組與給藥:取預(yù)選合格的豚鼠(引喘潛伏期小于150 s)，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5 組，每組8 只，分別為模型對(duì)照組、苓桂術(shù)甘合三拗湯組(簡(jiǎn)稱(chēng)合方組)、氨茶堿組、三拗湯組、苓桂術(shù)甘湯組。氨茶堿組給予氨茶堿腹腔注射(0.1 g/kg)，其他各給藥組連續(xù)3 天噴吸相應(yīng)中藥15 min，模型組噴吸蒸餾水15 min，末次給藥1 h后將豚鼠放入噴霧裝置內(nèi)，噴入2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組織胺等容積混合液10 s，聞吸60 s，打開(kāi)風(fēng)門(mén)，記錄豚鼠哮喘潛伏期(噴霧開(kāi)始至出現(xiàn)抽搐或跌倒時(shí)間)，如潛伏期超過(guò)6 min，按360 s 計(jì)算，［1－3］分別比較各給藥組與模型對(duì)照組間的差異情況。

2.1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:本實(shí)驗(yàn)資料數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，應(yīng)用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較采用單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2.2 結(jié)果 苓桂術(shù)甘湯組、三拗湯組及合方組的哮喘潛伏期均較模型組延長(zhǎng)，與模型組比較，三拗湯組差異有顯著性(P＜0.05)，合方組差異有顯著性(P＜0.05);與苓桂術(shù)甘湯組比較，合方組差異有顯著性(P＜0.05);與三拗湯組比較，合方組差異有顯著性(P＜0.05)。以合方組的哮喘潛伏期最長(zhǎng)，詳見(jiàn)表3。

表3 苓桂術(shù)甘合三拗湯防治實(shí)驗(yàn)性哮喘統(tǒng)計(jì)表 (±s)

表3 苓桂術(shù)甘合三拗湯防治實(shí)驗(yàn)性哮喘統(tǒng)計(jì)表 (±s)

注:與模型對(duì)照組比較，* P＜0.05;與苓桂術(shù)甘湯組比較，△P＜0.05;與三拗湯組比較，☆P＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)(只) 給藥方法 劑量(g/kg)致喘潛伏期(s)15 min 128±31合方組 8 噴霧15 min 4.1 256±90＊△☆苓桂術(shù)甘湯組 8 噴霧15 min 5.0 151±35三拗湯組 8 噴霧15 min 3.2 184±81*氨茶堿組 8 腹腔注射 0.1 195±31模型對(duì)照組 8 噴霧*

3 討論

目前，臨床治療哮喘，中醫(yī)和西醫(yī)都有許多方法，西醫(yī)有藥物口服、皮下注射、靜脈注射、舌下含藥、灌腸等;中醫(yī)有內(nèi)服中藥、中藥?kù)F化吸入、皮膚敷帖、直腸給藥、注射給藥及針灸療法。雖然對(duì)其急性哮喘無(wú)論中醫(yī)、西醫(yī)都有許多方法使其緩解，但療效短暫，屢愈屢發(fā)，為了阻止本病的再次發(fā)作，醫(yī)療工作者們采取了許多方法，在眾多有效方劑的運(yùn)用中，有宣肺平喘作用的三拗湯在實(shí)踐中以重復(fù)性好為其顯著性特點(diǎn)。其組方藥物在近10年來(lái)出現(xiàn)在發(fā)作期哮喘證治方劑中占哮喘組方的42%，［4］成為一個(gè)具有典型意義的哮喘發(fā)作期方劑的組成部分。

三拗湯原名“還魂湯”，出自《金匱要略》，由麻黃、苦杏仁、甘草三味藥物組成，系由《傷寒論》麻黃湯(麻黃去節(jié)三兩、桂枝二兩、苦杏仁去皮尖七十個(gè)、甘草炙一兩)去桂枝加生姜而成主治鼻塞聲重、咳嗽痰多、頭痛目眩等外感風(fēng)寒咳嗽證。在《太平惠民和劑局方》中首次出現(xiàn)以“三拗湯”為名的成方，采用連節(jié)麻黃、連皮杏仁、連梢甘草，與常規(guī)炮制加工方法相拗，故名三拗湯。

咳嗽是臨床常見(jiàn)的病癥，中醫(yī)認(rèn)為，系肺氣不宣所致，哮喘也是臨床常見(jiàn)的病癥，多為宿病新發(fā)所致。即內(nèi)有伏飲，復(fù)有誘因引起，使痰氣搏結(jié)于氣道，這是哮喘發(fā)作的基本病理。而痰飲形成，又與肺脾腎三臟密切相關(guān)，故有“脾為生痰之源，肺為貯痰之器，腎為痰之本”之說(shuō)。其中以腎氣最為重要，蓋肺主氣，而脾陽(yáng)的運(yùn)行必得腎氣的溫煦濡養(yǎng)。本病患者體質(zhì)多弱，哮喘均因小有不慎即發(fā)，加之冬寒之襲損陽(yáng)，故用苓桂術(shù)甘湯溫化痰飲，以杜痰源，乃“病痰飲者，當(dāng)以溫藥和之”的代表方劑。

苓桂術(shù)甘湯出自張仲景《傷寒雜病論》，由茯苓、桂枝、白術(shù)、甘草四味藥組成，具有溫陽(yáng)化氣、健脾利水的作用，適應(yīng)于脾陽(yáng)不足、氣不化水、聚濕成飲的痰飲病。方中茯苓健脾利濕，桂枝溫陽(yáng)化氣，白術(shù)補(bǔ)益脾氣，運(yùn)化水濕，炙甘草調(diào)和諸藥，配合茯苓、白術(shù)兼能健脾，配合桂枝甘溫補(bǔ)陽(yáng)。四藥共奏健脾滲濕、溫化痰飲之功。

現(xiàn)代臨床對(duì)三拗湯的應(yīng)用主要集中在主癥為咳嗽和哮喘的應(yīng)用上。據(jù)報(bào)道采用辨證與辨病相結(jié)合的方法，以三拗湯為主方，治療感冒、支氣管炎、支氣管哮喘等上呼吸道疾病可取得穩(wěn)定的良好臨床療效。治療以咳嗽為主的病癥，主要用于咳嗽變異性哮喘，痰吐白沫狀，苔薄白的風(fēng)寒型患者;或經(jīng)治療表證不復(fù)存在，而咳嗽纏綿不愈者;或表證未解，入里久郁化熱等各種咳嗽;邪郁肺經(jīng)的喉源性咳嗽;各種疾病引起的咳嗽，報(bào)道療效在90%以上。治療以哮喘為主的病癥，主要用于支氣管哮喘、急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作。從近年報(bào)道來(lái)看三拗湯被作為平喘止咳的基礎(chǔ)方，用于各種咳喘病。對(duì)咳喘、哮鳴音、排痰、呼吸功能等具有顯著效應(yīng)，對(duì)IgE 等變態(tài)反應(yīng)性指標(biāo)有較為明確的影響。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，苓桂術(shù)甘合三拗湯組對(duì)氨水致小鼠咳嗽有明顯鎮(zhèn)咳作用，可增加小鼠氣管段酚紅排泌量，說(shuō)明有明顯化痰作用。對(duì)2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組織胺等容積混合液所致豚鼠哮喘，苓桂術(shù)甘湯和三拗湯均可使哮喘潛伏期延長(zhǎng)，而以三拗湯效果為佳，將兩方合用的苓桂術(shù)甘合三拗湯，則更好地增強(qiáng)了兩方的平喘作用，說(shuō)明將兩方相合的苓桂術(shù)甘合三拗湯更能明顯抑制豚鼠哮喘反應(yīng)，這為臨床應(yīng)用提供了藥效學(xué)依據(jù)。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局·中藥新藥研究指南(藥學(xué)·藥理學(xué)·毒理學(xué))［S］.衛(wèi)生部，1994.133－134

［2］陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1988.158

［3］宋翠淼，牛麗穎，李乾，等.小兒清肺止咳口服液的鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，1998，13 (2):1－3

［4］童黃錦，許惠琴.三拗湯類(lèi)方治療支氣管哮喘的作用機(jī)制研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008 (10)4:45－47