免疫固定電泳和骨髓細胞形態學檢查在多發性骨髓瘤臨床分期中的價值比較

崇慧峰， 孫 蕓， 王傳發， 汪亞勤， 曹春鸞， 周 萍

(銅陵市人民醫院檢驗科，安徽銅陵244000)

多發性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一種骨髓中單克隆漿細胞異常增殖的惡性腫瘤，在我國發病率約為1/10萬，約占造血系統腫瘤的10%，多發于中老年人群。隨著我國人口的老齡化，MM的發病率有逐年增高的趨勢。由于MM的臨床表現可出現在全身多個系統，患者首診科室較雜，常會造成誤診和漏診。因此，應將患者的臨床表現與各項輔助檢查相結合，以便早期發現和診斷MM［1］。而MM的實驗室輔助診斷指標中以M蛋白和骨髓瘤細胞比例最為重要。因此，我們回顧性統計了89例MM患者血清免疫固定電泳(immunofixation electrophoresis，IFE)檢驗結果和骨髓細胞形態學檢驗結果，并將患者按International Staging System(ISS)分期標準進行臨床分期，探討它們之間的相關性以及臨床意義。

材料和方法

一、患者來源

選取銅陵市人民醫院2008年5月至2015年3月住院收治89例初診MM患者，其中男58例、女31例，年齡35～84歲。根據ISS分期標準將MM患者分為ISSⅠ～Ⅲ期，其中ISSⅠ期18例、ISSⅡ期23例、ISSⅢ期48例。

二、診斷標準

參考《血液病診斷及療效標準》［2］進行診斷和分期。具體診斷標準參考世界衛生組織(World Health Organization，WHO)相關標準判定，主要診斷指標:(1)骨髓漿細胞增多＞30%;(2)活檢證實為漿細胞瘤;(3)血清M蛋白增多(IgG＞35 g/L、IgA＞20 g/L，尿本周蛋白＞1 g/24h)。次要診斷指標:(1)骨髓漿細胞增多(10%～30%);(2)血清M蛋白存在，但低于主要診斷指標;(3)有溶骨病變;(4)正常免疫球蛋白減少50% 以上(IgG＜6 g/L、IgA＜1 g/L、IgM＜0.5 g/L)。患者有MM相關臨床表現，具備至少1項主要指標和1項次要指標，或具備3項次要指標且其中必須包含第(1)項和第(2)項，即可診斷為MM。臨床分期參照ISS分期標準，Ⅰ期:β2微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)＜3.5 mg/L，血清白蛋白(albumin，Alb)＞35 g/L;Ⅱ期:介于Ⅰ期和Ⅲ期之間;Ⅲ期:β2-MG＞5.5 mg/L。

三、儀器和試劑

采用法國Sebia全自動電泳儀及原裝配套試劑進行IFE;采用日立7600全自動生化分析儀及原裝配套試劑測定血清Alb;采用美國雅培i1000化學發光分析儀及原裝配套試劑測定血β2-MG。

骨髓細胞形態學分析:行骨穿后，常規骨髓涂片瑞-姬染色，按FAB分型方法進行鏡檢分類，計數200個有核細胞，計算骨髓瘤細胞所占百分比。所有檢測均嚴格按操作規程進行。

四、統計學方法

采用SPSS18.0軟件進行統計分析，計數資料比較采用配對χ2檢驗;骨髓瘤細胞比例以±s表示，均數比較采用秩和檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、ISS各期MM患者蛋白分型結果

89例MM患者中ISSⅠ期18例(20.2%)、ISSⅡ 期 23例 (25.8%)、ISS Ⅲ 期 48例(53.9%)。ISS各期中均以IgG型為主(占50%以上)。見表1。

表1 ISS各期MM患者蛋白分型結果比較 ［例(%)］

二、ISS各期MM患者骨髓瘤細胞檢測結果

ISSⅡ期和Ⅲ期MM患者骨髓瘤細胞比例明顯高于ISSⅠ期(P＜0.05)，而 ISSⅡ期和Ⅲ期之間骨髓瘤細胞比例差異無統計學意義(P＞0.05)。見表2。

表2 ISS各期MM患者骨髓瘤細胞檢測結果比較(±s，%)

表2 ISS各期MM患者骨髓瘤細胞檢測結果比較(±s，%)

注:與Ⅰ期比較，*P＜0.05

Ⅲ48 27.2±17.2*合計89 23.1±15.8

三、ISS各期MM患者M蛋白和骨髓瘤細胞檢測陽性率比較

IFE以檢出M蛋白為標準，骨髓細胞形態學方法以骨髓涂片中骨髓瘤細胞比例≥10%為標準。ISSⅢ期患者M蛋白陽性率和總體陽性率均明顯高于骨髓細胞形態學(P＜0.05)。ISS 3期之間的M蛋白和骨髓瘤細胞陽性率差異有統計學意義(χ2=7.356，P=0.025;χ2=6.967，P=0.031)。見表3。

表3 MM患者ISS各期M蛋白和骨髓細胞形態學陽性率比較 ［例(%)］

討 論

MM臨床表現比較復雜，并缺乏特異性，由于其起病緩慢，癥狀隱匿，而骨髓瘤細胞增生程度、浸潤部位及程度不同，導致各臟器受損程度各不相同，常會引起骨痛、病理性骨折、貧血、反復感染、乏力和腎功能不全等一系列臨床癥狀［3］。MM患者所處腫瘤分期階段不同，預后也不同，治療措施也有差別。盡管臨床有報道ISS分期不能用于治療風險分層，也不能提供很好的腫瘤負荷評估［4］，但業內普遍認為確立多發性骨髓瘤的診斷和免疫球蛋白分型診斷后，應用ISS進行分期，可為判斷預后和指導治療提供依據。

本研究將89例MM患者按ISS分期標準進行分期，對各期IFE和骨髓瘤細胞檢驗結果進行分析，結果顯示ISSⅢ期患者最多，占53.9%;Ⅰ期最少，占20.2%。ISSⅡ期和Ⅲ期患者骨髓瘤細胞比例明顯高于ISSⅠ期患者(P＜0.05)，而ISSⅡ期和Ⅲ期之間骨髓瘤細胞比例差異無統計學意義(P＞0.05)。另外，ISS各期患者的免疫球蛋白分型結果與總體結果相近，ISSⅡ期和Ⅲ期患者M蛋白陽性率明顯高于ISSⅠ期(P＜0.05)，與骨髓細胞形態學結果相吻合。

本研究結果還顯示，ISSⅠ期和Ⅱ期患者M蛋白和骨髓細胞形態學的陽性率差異無統計學意義(P＞0.05);但ISSⅢ期患者M蛋白的陽性率和總體陽性率均明顯高于骨髓細胞形態學(P＜0.05)。這一方面提示IFE敏感性高于骨髓形態學方法，與文獻報道［5-6］相一致;另一方面也說明這種優勢可能主要體現在ISSⅢ期患者中，ISSⅠ期和Ⅱ期患者這兩種方法可能還比較一致，進一步提示雖然血清IFE的靈敏度較高，但MM診斷中如能結合骨髓細胞形態學檢驗結果，其診斷價值更高。而對于出現M蛋白增高未達診斷標準，同時骨髓漿細胞比例低于最低標準(＜10%)的情況，此時更應強調漿細胞的質量，即如果存在原幼漿細胞和異常形態漿細胞，除外引起骨質破壞的其它疾病，仍可診斷為MM。而惡性漿細胞在骨髓中常呈不均勻灶性分布，不能以一次骨髓穿刺涂片中骨髓瘤細胞比例高低為定論，需多次、多部位骨髓穿刺才能做出正確診斷。

另外，本研究結果顯示IFE對M蛋白的檢出率為92.1%，略低于相關文獻報道［7-8］，與魯真真等［6］和馬海梅等［9］的報道一致，他們報道 MM 患者中均存在一定的未分泌型。免疫分型結果顯示最常見的是 IgG型(55.1%)、IgA型占14.6%、IgM型占2.2%、輕鏈型占20.2%、未分泌型占7.9%，與相關報道基本一致。表明IFE還可直接判斷M蛋白的類型，有較高敏感性和特異性，可作為MM的常規檢測方法［10］。另外，由于MM患者經治療好轉后，M蛋白可減輕或消失，所以IFE還可通過檢測M蛋白來評估MM患者的病情和療效，以便臨床及時調整治療方案。

綜上所述，MM患者隨著ISS分期的增高，M蛋白陽性率和骨髓瘤細胞比例有增高的趨勢，說明這兩項指標與MM的臨床分期及預后有一定聯系，可以與β2-MG、Alb等一同評估病情及預后。另外，在MM診斷中，血清IFE靈敏度高于骨髓細胞形態學方法，主要體現在ISSⅢ期患者中。因此，IFE結合骨髓細胞形態學檢查的診斷價值更高。

［1］楊蕊雪，高露，施菊妹.多發性骨髓瘤的診斷進展與分期［J］.中國癌癥雜志，2014，24(10):727-731.

［2］張之南，沈悌.血液病診斷及療效標準［M］.3版.北京:科學出版社，2007:232-234.

［3］王愛梅.多發性骨髓瘤誤診18例分析［J］.醫學信息(上旬刊)，2011，25(4):2454-2455.

［4］KDAJ M.Immunoglobulin chain/light chain pairs(HLC，HevyliteTM)assays for diagnosing and monitoring monoclonal gammopathies［J］.Adv Clin Exp Med，2014，23(1):127-133.

［5］康懿，劉華，王蕾，等.血清κ/λ輕鏈比值及蛋白電泳在診斷多發性骨髓瘤中的臨床應用［J］.檢驗醫學，2011，26(10):675-678.

［6］魯真真，欒芳，鞠瑛，等.免疫固定電泳在多發性骨髓瘤輔助診斷中的應用價值［J］.臨床輸血與檢驗，2014，16(2):125-128.

［7］肖敏敏，陳健康，徐小明.實驗室檢查在多發性骨髓瘤臨床診斷中的價值［J］.安徽醫藥，2012，16(1):78-80.

［8］張曉暉.多發性骨髓瘤的實驗室診斷評價［J］.現代中西醫結合雜志，2012，21(31):3505-3506.

［9］馬海梅，孟瑞芳，鄒文蓉，等.208例多發性骨髓瘤細胞形態學與血清免疫球蛋白比對分析［J］.中國實驗診斷學，2010，14(5):718-720.

［10］劉汐盈，孫淑艷，宋媛媛.血清免疫固定電泳、蛋白電泳、免疫球蛋白及輕鏈定量對多發性骨髓瘤臨床診斷價值探討［J］.中國實驗診斷學，2010，14(5):680-681.