化學發光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應用

范紅松眉山市人民醫院檢驗科，四川眉山 620010

化學發光免疫測定在梅毒螺旋體抗體檢測中的臨床應用

范紅松
眉山市人民醫院檢驗科，四川眉山 620010

目的 探討化學發光免疫法（CLIA法）應用于檢測梅毒螺旋體抗體（TPA）的臨床價值。方法 隨機選取2014年12月—2015年1月間的100例健康人為對照，將300例TPA陽性患者作為研究對象，分別進行TPPA和TRUST檢測和CLIA法檢測，以CV、靈敏度等為指標，評價CLIA法的臨床應用價值。 結果 ①組內、組間在不同TPA濃度下的CV均＜10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統計學義（P＜0.05）。②CLIA、TPPA檢測的陽性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300），差異無統計學意義（P＞0.05），但均高于TRUST法42.3%（127/300）（P＜0.05）。其中陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。 結論 CLIA法檢測TPA的結果準確率高，CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在干擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應用。

化學發光免疫測定法；梅毒螺旋體抗體；臨床應用

梅毒螺旋體（TP）是梅毒病的常見致病因素之一，其臨床表現復雜、具有傳播性和全身性，很容易誤診、漏診，嚴重者可致全身的病變、損害等[1]。據相關的調查結果顯示[2]，從2006年至今，梅毒發病率呈現明顯的上升趨勢，檢測患者血清中的TPA是其目前診斷方法的主要根據之一。因此，怎樣才能對患者進行有效的、準確的、迅速的檢測有著十分重要的臨床意義，CLIA的研究能夠為診斷梅毒病提供可靠的檢測依據，以保證盡早治療，具有靈敏度高、特異性強的特點。該研究選取2014年12月—2015年1月間該院收治的400例患者為研究對象，對比分析了使用CLIA檢測和其他方法檢測的結果，得到較滿意結果，現將其總結果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究中研究對象共400例：陽性患者共300例，均是于2014 年12月—2015年1月來該院就診的，且符合梅毒診斷標準[3]，另外陰性對照患者共100例。其中，年齡8～20歲37例，21～30歲96例，31～40歲245例，41～50歲22例，平均年齡（38±1.8）歲。陽性患者組男、女患者分別有219例、181例。陰性患者組男、女患者分別有67例、33例。

入選標準：年齡在8～50歲之間；自愿作為試驗對象者。臨床診斷明確者。

[作者簡介]范紅松（1970.9-），男，四川眉山人，大專，檢驗技師，研究方向：醫學檢驗免疫。

排除標準：需要維持服用精神類安定藥、鎮靜藥的患者以及心臟、肝、腎功能有損害者；患有其他重癥疾病者。

1.2 方法

①采集本試驗中所有研究對象的血清（空腹狀態下）、留樣。②將留取的血清標本置于備好的真空促凝管內，分離血清，低溫冷藏（4～8℃）。③檢測：用CLIA（試劑盒，I2000型，雅培，美國）、TPPA（試劑盒，日本）、TRUST（試劑盒，中國）方法參照其各自說明書進行檢測。④重復性實驗：取S/CO（吸光度/臨界值）24（高）、3（中）、0.05（低）的三個水平，對組內及組間分別在連續的2 h和20d內進行TPA標準品的CLIA檢測5次、2次。計算其靈敏度。⑤檢測攜帶污染率：參照國際標準[4]，使用富士G1200CLIA分析儀對TPA的高、低值標準品進行檢測，各連續、平行三次得h1、h2、h3、l1、l2、l3值。⑥干擾試驗：將干擾物（膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白）加入到不同TPA濃度的患者血清中，以富士G1200CLIA分析儀進行檢測，記錄、計算。⑦在CLIA檢測后，對陽性組、陰性組患者分別進行TPPA、TRUST檢測，對比3種方法的結果，進行分析。

1.3 觀察指標

①以變異系數（CV）為觀察指標評價儀器重復性。②以攜帶污染率為指標評價其儀器攜帶污染情況。攜帶污染率=（l1-l3）/ （h3-l3）×100%。

1.4 統計學方法

應用SPSS 17.0軟件進行數據分析，對計數資料采用χ2檢驗進行統計處理，分析數據結果，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2 結果

2.1 組內、組間重復性和靈敏度實驗結果

經重復性實驗，組內、組間在不同TPA濃度下的CV分別為6.72、8.31、8.51和6.69、8.44、8.49，均＜10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統計學意義（χ2=6.442,P＜0.05）。2.2 干擾實驗、攜帶污染率結果

經CLIA分析儀檢測的TPA攜帶污染率為0.14%，且干擾物加入前后測得的結果差異為3.21%（S/CO）。

2.3 3 種方法檢測結果對比

CLIA、TPPA、TRUST法的陽性率分別為 87.7%（264/300）、86.3%（250/300）、42.3%（127/300），前兩者差異無統計學意義（χ2=0.768,P＞0.05），但均高于TRUST法（χ2=45.300,χ2=42.169,P＜0.05）。其陰性組患者血清檢測的陰性率均為100%。

3 討論

目前，在世界范圍內梅毒發病率已經逐年上升，其嚴重危害著人類的健康生活。因此，各種診斷方法也不斷發展、應用，但早期的、有效的診斷方法尚不完善，有待于進一步研究，它們各有各的優勢和缺點，隨著現代醫學、科研與科技的不斷發展和進步，人們更加傾向于特異性強、準確、有效的TPA檢驗方法[5-7]。TPA是一種特異性的TP感染患者體內誘導產生的抗體，其往往最早出現，卻遲遲不消失，甚至在治愈后、乃至終生的患者仍然可以檢出TPA[8]。梅毒患者經感染后還可以產生一種nTsAb，這種抗體無特異性，容易受到多種因素、多種疾病的影響，所以經常使患者血清檢測結果呈現假陽性。同時，在使用TPPA法對患者進行檢測的時候也會得出假陰性結果，故這種檢測方法在梅毒患者不同期中都存在一定的盲區，都不如CLIA法準確、特異性強[9-10]。

該研究經對正常人和TP患者血清的檢測，從靈敏度、重復性、特異性、準確度等方面探討了CLIA法的應用特點和優勢，結果為：CLIA分析儀的靈敏度為1/16；且該法的TPA攜帶污染率、陽性率、陰性率分別為0.14%、87.7%（264/300）、100%。表明CLIA法重復性良好、精密度優良，檢測結果準確，且優于TPPA和TRUST。林炳柱[11]等研究者通過應用3種不同的方法（RPR法、CLIA法、TPPA法）檢測研究對象的血清TPA，進而探討了其各自臨床價值，研究發現：CLIA法準確、方便、特異性強，與該研究結果相似。

綜上所述，使用CLIA法作為檢驗TPA的手段，其結果準確率高；并且CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在干擾和限制、攜帶污染率低，值得推廣應用。

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Clinical Application of Chemiluminescence Immunoassay in Detection of Treponema Pallidum Antibody

FAN Hong-song
Department of Clinical Laboratory,Meishan People's Hospital,Meishan,Sichuan Province,620010 China

Objective To explore the clinical value of chemiluminescence immunoassay(CLIA)in the detection of treponema pallidum antibody (TPA).Methods 100 healthy people and 300 patients treated in our hospital during December 2014 and January 2015 were selected as the research object,all of whom underwent detection of TPA by TPPA,TRUST and CLIA.The clinical value of CLIA was evaluated based on its coefficient of variation (CV)and sensitivity.Results①Inner-group CV and across-group CV under varying concentration of TPA were lower than 10%,and the sensitivity of CLIA was higher than that of TPPA,1/16 vs 1/ 80,and the difference was statistically significant,P＜0.05.② the positive rates by CLIA and by TPPA were 87.7%（264/300）and 86.3%（250/300）,and the difference was not statistically significant P＞0.05,but both of them were higher than that by TRUST, 42.3%（127/300）with statistically significant differences,P＜0.05.Conclusion CLTA is worthy of promotion in the detection of TPA due to its higher accuracy and sensitivity,strong anti-interference capability,and low carry-over rate.

Chemiluminescence immunoassay;Treponema pallidum antibody;Clinical application

R446.6

A

1674-0742（2015）08（a）－0072-02

2015-05-05）