論食品微生物檢驗中培養基的質量控制

肖　巍

（開封市疾病預防控制中心，河南開封　475000）

論食品微生物檢驗中培養基的質量控制

肖巍

（開封市疾病預防控制中心，河南開封475000）

在食品微生物檢驗過程中，由于操作過程相對復雜，影響食品檢驗結果準確性的因素較多，培養基的質量在食品微生物檢測中起著決定性的作用。有效的對培養基進行質量控制，也是提高微生物檢驗質量的重要環節。做好食品微生物檢驗培養基的質量控制工作，必須從培養基的制備、驗收、質量控制方法、培養基的性能測試入手，在提高檢驗人員水平素質的基礎上嚴格實施實驗室的質量控制措施，保證培養基和試劑的質量，真正意義上實現食品檢驗的高質量、高水準目標。本文就如何在食品檢測過程中對培養基進行有效的質量控制作簡要闡述

微生物檢驗培養基質量控制

培養基是食品微生物檢測實驗室重要檢測試劑之一，其自身質量優劣、保存是否得當、配制使用是否正確、產品性能是否符合標準要求等都直接關系到分離培養的成敗。培養基的質量由基礎成分的質量、制備過程的控制、微生物污染的消除、性能測試及包裝和儲存條件等因素決定。供應商和制備者應確保培養基的理化特性滿足相關標準的要求。

1　培養基的質量保證

1.1證明文件

（1）生產企業提供的文件生產企業應提供以下資料：培養基的各種成分、添加成分名稱及產品編號；批號；最終PH；儲存信息和有效期；標準要求質控報告；必要的安全和（或）危害數據。（2）產品的交貨驗收對每批產品應記錄接收日期，并檢查產品合格證明、包裝的完整性、產品的有效期、文件的提供，并記錄培養基的名稱、數量、批號、保質期等，做好登記入庫工作。

1.2貯存要根據日常的工作需要制定計劃

（1）脫水合成的培養基，實驗室應保存有效的培養基目錄清單，清單應包括容器密封性檢查。（2）即用型培養基應嚴格按照供應商提供的貯存條件、有效期和使用方法進行保存和使用。（3）實驗室自制的培養基應在規定的環境中儲存，平板不超過2-4周，瓶裝及試管裝培養基不超過3-6個月。在使用前應觀察是否有顏色變化、蒸發（脫水）或微生物生長情況，當培養基發生這類變化時，應禁止使用。開封日期、內容物的感官檢查等內容。

1.3培養基的實驗室制備

（1）一般要求正確制備培養基是微生物檢驗的最基礎步驟之一，應按照配方準確配置并記錄相關信息，如；培養基的名稱和類型、制造商、批號、重量（體積）、PH制備日期、滅菌條件無菌措施、配置日期、人員等，以便溯源。（2）實驗用水實驗用水的電導率在25℃時不應超過25uS/cm，水的微生物污染不應超過103CFU/ml。（3）PH的測定和調整用PH計測定，必要時在滅菌前進行調整，滅菌后冷卻至25℃時測定的PH，允許偏差士0.2%。（4）滅菌要定期用多種方法對高壓鍋的壓力是否達到要求進行測試，以保證滅菌質量。每周用嗜熱芽胞桿菌生物監測管，每次用化學指示卡方法來進行檢測滅菌效果。（5）平板的制備和儲存皿厚度至少3mm，直徑90mm的平皿通常加18-20m1培養基，培養時間或培養溫度增加時，要適當增加厚度，凝固后的培養基應立即放入密封的袋子中冷藏保存，并做好標記，內容包括名稱、制備日期和有效期。

2　培養基質量控制方法

2.1培養基的采購

購買培養基時，要盡量選擇通過ISO 9000認證的生產廠家。購買到培養基后應有相關工作人員做好驗收工作，使用之前先對外觀，批號，pH值等方而進行初步的評估。首先仔細審核生產廠家提供的培養基的相關信息，然后專業檢測人員對培養基進行相關的檢測工作，檢測達到相關質量要求后的產品方可使用。

2.2培養基的儲存

干粉培養基應在陰涼干燥處進行儲存，避免陽光直射，應在6個月內使用完畢，注意防潮。對儲存中的培養基應定期做好常規檢查，如首次開封的日期、容器密閉情況、內容物的外觀等，若發現培養基變質的跡象，應禁止使用。

3　培養基的性能測試方法

（1）生長率定量測試方法將同一稀釋度的目標菌分別涂布于測試培養基和參考培養基，經培養后，計算RP，RP=SN/ON

NS：待測培養基平板上得到的菌落總數。

NO：參考培養基平板上獲得的菌落總數，應≥100cfu

要求：非選擇性培養基上目標菌的生長率最低應為0.7，該類培養基應易于目標菌生長；選擇性培養基上目標菌的生長率最低應為0.l。

（2）生長率半定量測試方法用接種環在平板上劃線，計算生長指數G，每條有菌落生長的劃線記作1分，每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分，沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半，則記作0，將該值與已知的測定值或參考培養基的G值相比較，確保變化范圍不超過標準要求。

（3）選擇性定量測試方法為定量評價培養基的選擇性，應按規定以適當器具將適量測試菌株的工作培養物接種至選擇性培養基和參考培養基，計算選擇因子SF，培養基的選擇性應達到規定值。

DO：能在參考培養基上生長至少10個菌落的最高稀釋度。

DS：能在測試培養基上顯示生長的最高稀釋度非目標菌在選擇性培養基上的SF至少為2。半定量和定量法中，非目標菌應部分或全部被抑制。

4　討論

食品安全問題已成為全社會廣泛關注的熱點問題，食品檢測機構只有定期對市場上的食品開展風險監測和評估工作才能使消費者的健康和生命安全得到有效保障，因此食品檢驗就成為確保食品安全的重中之重。微生物實驗室的質量控制是一項長期、艱苦、細致而又繁瑣的工作，質量控制貫穿于從樣品生成到最終檢驗報告發出的整個過程。只有保證檢驗結果的準確性、安全性才能真正意義上實現民眾對食品安全的期望。

［1］呂蠅凱.NCCLB關于商品微生物培養基的保證［J］.上海醫學檢驗雜志，2010（02）：117-118.

［2］劉楊.提高食品檢驗準確性的控制因素探析［J］.中國新技術新產品，2012（20）：95.

肖巍（1985—），男，河南開封人，本科，畢業于平頂山工學院，微生物檢驗技師，現就職于開封市疾病預防控制中心。