復方麝香注射液內毒素的方法研究

陳　君

（湖北省襄陽市食品藥品檢驗所，湖北 襄陽 441021）

復方麝香注射液內毒素的方法研究

陳君

（湖北省襄陽市食品藥品檢驗所，湖北 襄陽 441021）

目的 建立復方麝香注射液細菌內毒素檢查法。方法 按中國藥典2010年版二部附錄細菌內毒素檢查法進行試驗。結果 該注射液經過30倍稀釋后，對鱟試劑測定細菌內毒素無干擾。結論 復方麝香注射液可以采用細菌內毒素檢查法（凝膠法）進行細菌內毒素的限量檢查。

復方麝香注射液；細菌內毒素檢查；干擾試驗

復方麝香注射液是由6味中草藥制成，有豁痰開竅，醒腦安神的功效，臨床上用于痰熱內閉所致的腦卒中昏迷。目前該藥仍沿用家兔法檢測熱原，家兔法操作繁瑣、費時、成本高、靈敏度低，很多人都在研究該藥的內毒素方法，我們根據2010年版藥典二部附錄細菌內毒素檢查法和熱原家兔法的要求［1］，對該藥檢測進行了研究對比，結果表明，該藥是可以用細菌內毒素檢查法代替家兔法檢測熱原的。

1　儀器與材料

1.1儀器：旋渦式混懸器（天津藥典標準儀器廠，ZH-2型）；電熱恒溫水浴箱（江蘇金壇市中大儀器廠，420型）；無熱源移液器（上海求精生化試劑儀器有限公司）。

1.2材料：鱟試劑2批（湛江安度斯生物有限公司，靈敏度0.5 EU，批號1301241，批號1211241），細菌內毒素檢測用水（湛江安度斯生物有限公司，規格2.0，批號1404030，規格5.0，批號1404240），細菌內毒素工作標準品（湛江安度斯生物有限公司，規格10 EU/支，批號1301050）。熱源用家兔，經預測全部合格，復方麝香注射液（安徽金太陽生化藥業有限公司，批號131201。）

2　方法與結果

2.1內毒素限值的確定：藥品細菌內毒素限值（L）一般按以下公式確定：L=K/M，注射劑K=5EU/（kg?h），復方麝香注射液的用法用量中一次最大注射量為20mL，人均體質量按60 kg計算，L=15.15 EU/mL，以此計算出復方麝香注射液內毒素的限值應為15 EU/mL。

這里我們要提一下，以前有很多人在確立M的時候，帶入了家兔法的注射劑量，這個應該是不對的，2010年版藥典明確規定了M為人用每千克體質量每小時的最大供試品劑量，且指出人均體質量按60 kg計算，注射時間不足1 h按1 h計算。復方麝香注射液說明書上的用法用量，靜脈滴注，一次10～20mL，人均體質量按60 kg計算的話，M=0.33mL/（kg?h），而該藥現行標準中規定熱原檢查法劑量按家兔體質量每1 kg注射0.5mL，很多人直接將這里的0.5mL當做M帶入計算，會導致計算出的細菌內毒素限值相差1.5倍。

2.2確定最大有效稀釋倍數：L能準確確定后，MVD就很好計算了，我們此次試驗用哦鱟試劑的標示靈敏度為0.25 EU/mL，計算出MVD=cl/λ=30。

2.3鱟試劑靈敏度復核試驗：2010年版藥典規定，當使用了新批號的鱟試劑或實驗條件發生了任何可能影響檢驗結果的改變時，應進行鱟試劑靈敏度復核試驗。將120 EU/支的細菌內毒素國家標準品用細菌內毒素檢測用水溶解后，依法制成2、1、0.5、0.25 λ 4個濃度的內毒素標準溶液，經復核，本次試驗所用的0.5 EU/mL的鱟試劑標示靈敏度為0.5 EU/mL。

2.4干擾試驗

2.4.1預實驗：將供試品溶液按梯度稀釋至不超過最大有效稀釋倍數的溶液，按鱟試劑靈敏度復核試驗項下操作［1］，每個濃度平行做4支管。2批鱟試劑結果一致。見表1。

表1　凝膠法預試驗

從表1可知，復方麝香注射液對鱟試劑有干擾，稀釋30倍以上可去除干擾。

2.4.2干擾試驗［2］：按照中國藥典2010年版二部附錄XIE細菌內毒素檢查法項下干擾試驗表1制備溶液A、B、C、D，按鱟試劑靈敏度復核試驗項下操作。其中供試品溶液為稀釋30倍的溶液。結果見表2。

表2　凝膠法干擾試驗

當復方麝香注射液稀釋30倍時，干擾試驗通過。

2.5供試品用細菌內毒素檢查法與家兔法檢測結果比較：供試品稀釋30倍，參照2010年版藥典二部附錄XIE細菌內毒素檢查法，用0.5 EU/支的鱟試劑檢驗，結果為陰性。按照2010年版藥典二部附錄XID家兔法檢測，結果也為陰性，兩種方法結果完全一致。

3　討 論

復方麝香注射液為中成藥制劑，為臨床常用藥品，但是目前仍采用家兔法檢測熱原，費時費力，成本高。本次試驗，采用供試品30倍稀釋液，0.5 EU/mL的鱟試劑對樣品進行細菌內毒素檢測，結果與家兔法一致且無干擾。經論證，復方麝香注射液可以用細菌內毒素檢查法代替家兔熱原檢查法。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典二部［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄71-73.

［2］ 黃清泉，夏鎮明.藥品細菌內毒素檢查的試驗設計［J］.中國藥學雜志，1997，32（2）：72.

R284.1

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1671-8194（2015）10-0068-01