HIV快速檢測在替代策略中的應用研究

吳學美 王禹鑫 雷壽熊 白子匡 王興金

【摘 要】目的 通過對昭通市2015年1-6月445份艾滋病病毒（HIV）抗體檢測結果、2006年-2014年的123例確證陰性標本和110例不確定標本用2種快速試劑復核及WB帶型的分析，探討HIV抗體快速檢測替代策略應用的可行性。方法 對所有篩查陽性標本同時用2種免疫層析試驗（RT）、1種酶聯免疫吸附試驗（ELISA）及免疫印跡法（WB）檢測，并對檢測結果進行分析。結果 445份初篩陽性的標本中：434份兩種快速檢測結果均為陽性的，426份WB結果為陽性，8份WB結果為不確定；11份2種快速檢測結果為1陰1陽的，5份WB結果為不確定，6份WB結果為陰性；110份WB不確定樣本中，41份兩種快速檢測結果為陽性，69份兩種快速檢測結果為1陰1陽；123份WB結果為陰性的樣本，快速檢測結果均為1陰1陽。結論 兩種快速試劑檢測結果均為陽性與WB結果符合率為98.16%，兩種快速試劑檢測結果為1陰1陽的WB結果無1例為陽性。

【關鍵詞】HIV；快速檢測；替代策略

經典的HIV確證檢測免疫印跡試驗（WB）成本比較高，檢測要求高，確證實驗室集中檢測，開展的頻率有限，時效性并不高。作為控制傳染源的重要措施之一，早發現早治療感染者已成為防治艾滋病的一個非常重要的環節。探討尋求一種成本低、檢測方便、時效高的檢測方法是控制好傳染源方法之一。

一.材料及方法

1.樣本來源

選取2015年1-6月昭通市各檢測實驗室篩查陽性送確證樣本445份：其中男性290例，女性155例，年齡2-84歲；2006年-2014年確證檢測不確定樣本110例和陰性樣本123例。

2.試劑

1）篩查試劑 酶聯免疫吸附試驗（ELISA），采用英科新創（廈門）科技有限公司生產的HIV1+2抗體診斷試劑盒；高敏感性快速檢測試劑為美國雅培HIV1+2型膠體硒法試劑，高特異性快速試劑為韓國SD膠體金法試劑。

2）確證試劑 新加坡MP生物醫學亞太私人有限公司生產的Gene lab HIV Blot2.2人類免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗體免疫印跡試驗。

所有試劑批檢合格，在有效期內使用。

3.儀器

1）洗板機美國寶特（Bio-Tek）ELx50，酶標儀美國BioTek ELx808。

2）全自動免疫印跡儀TECAN ProfiBlt 48。

3）快速法用目測。

4.方法

對所有HIV初篩陽性送檢樣本均進行復檢，用兩種快速檢測和酶聯免疫吸附實驗（ELISA）進行檢測，三種結果均陰性，則報告陰性，有一種、兩種或三種陽性者則進行免疫印跡試驗（WB）。對于既往確證不確定及陰性的樣本用兩種快速試劑復核。

5.判定標準

快速試驗依據雅培、韓國SD試劑說明書、《艾滋病病毒抗體快速檢測技術手冊》2011年版【2】的要求進行判讀。免疫印跡試驗（WB）依據《全國艾滋病檢測技術規范》2009年版【3】和MP生物醫學亞太私人有限公司Gene lab HIV Blot2.2試劑使用說明書的結果判斷標準，HIV抗體陽性為特異性條帶出現滿足陽性標準的既判為陽性。

二.結果

1.445份標本快速檢測結果與WB結果見表1

表1.快速檢測結果與WB結果

快速法 數量 WB結果 陽性符合率（%）

陽性 不確定 陰性

雙陽

1陰1陽 434

11 426

0 8

5 0

6 98.16

0

合計 445 426 13 6 95.73

445份篩查陽性的樣本中，WB結果為陽性的僅占95.73%，不確定的占2.92%，陰性的占1.35%；兩種快速檢測結果均為陽性的434份樣本中，WB結果為陽性的率高達98.16%，1.84%為不確定，沒有陰性樣本；兩種快速檢測結果為1陰1陽的11份樣本中，WB結果沒有陽性，只有45.45%的為不確定，54.55%的為陰性。

2.110份不確定樣本和123份陰性樣本復核結果見表2

表2.不確定及陰性樣本復核結果

樣本 數量 快速檢測

雙陽 單陽 陰性

WB不確定 110 41 69 0

WB陰性 123 0 123 0

合計 233 41 192 0

110份WB不確定樣本中，兩種快速試劑檢測結果均為陽性的樣本有41份（37.3%），結果為1陰1陽的樣本有69份（62.7%）；而在123份WB陰性的樣本中，兩種快速試劑檢測結果均為陽性的樣本為0，結果為1陰1陽的樣本有123份（100%）。

三、討論

目前，全國艾滋病（AIDS）疫情流行快速增長的趨勢已經得到控制，但昭通市的疫情卻處于不斷上升趨勢。現行的HIV抗體篩查和確證實驗[酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和免疫印跡試驗（WB）]策略成本高、檢測要求高、篩查到確證的時效性不高，導致HIV檢測的可及性受到一定的影響，成為艾滋病檢測的不利因素【4】。使艾滋病的預防和控制工作受到影響。因此，研究HIV抗體檢測經典確證方法的替代策略，應用現有的用于HIV抗體檢測的幾種快速試劑聯合檢測，代替經典的ELISA和WB的確證組合，以期在檢測結果的可靠性和準確性不降低的情況下，使檢測時間、檢測成本降低，從而提高檢測的可及性。

本次研究的445例樣本中，兩種快速試劑檢測結果均為陽性的434例樣本，免疫印跡試驗陽性率為98.16%，不確定的8例樣本（1.84%）；而兩種快速試劑檢測1陰1陽的11例樣本，免疫印跡試驗無1例陽性結果，只有5例不確定和6例陰性結果。進一步對2006年-2014年的110例不確定樣本和123例免疫印跡試驗陰性樣本用兩種快速試劑復核，發現110例樣本中有41例復核結果為雙陽，69例為1陰1陽；123例陰性樣本復核結果全為1陰1陽，無雙陽結果。

鑒于兩種快速試劑檢測均為陽性的樣本，免疫印跡試驗（WB）陽性率僅為98.16%，所以單純快速檢測陽性不能替代確證試驗；兩種快速試劑檢測結果為1陰1陽的樣本，免疫印跡試驗（WB）無陽性，只有一半不到的樣本為不確定結果，其余均為陰性，所以兩種快速試劑檢測結果為1陰1陽的樣本建議隨訪觀察。

參考文獻：

[1]中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心，艾滋病病毒抗體快速檢測技術手冊，2011年版。

[2]中國疾病預防控制中心，全國艾滋病檢測技術規范，2009年版。

[3]秦淑文，蔣巖，汪寧，HIV抗體免疫印跡法的替代策略及應用進展，中國艾滋病性病，2005年5期。

[4]楚承霞，趙山平，劉芳芳等.HIV抗體不確定標本158例的結果及隨訪轉歸觀察[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（6）：659-660，662.

[5]曹棟卿，胡雪娜，趙丹燕等.HIV抗體不確定樣品的隨訪結果[J].浙江預防醫學，2015，26（1）：68-70.