紫萁孢子粉中脂肪酸成分的含量分析

林棟，陳新，史資，劉梁

（武漢輕工大學生物與制藥工程學院，湖北武漢430023）

紫萁孢子粉中脂肪酸成分的含量分析

林棟，陳新*，史資，劉梁

（武漢輕工大學生物與制藥工程學院，湖北武漢430023）

采用回流提取法，以95%乙醇溶液為提取劑，從紫萁孢子粉中提得到8個脂肪酸成分；通過GC-MS技術及面積歸一化法測定了所得各脂肪酸成分的含量。結果顯示，紫萁孢子粉中各脂肪酸含量分別為棕櫚酸50.20%，亞油酸16.96%，油酸13.48%，硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，豆蔻酸0.60%。

紫萁孢子粉；脂肪酸；GC-MS

紫萁（又稱薇菜）（Osmunda japonica Thunb.）屬于厥類植物門，紫萁科（Osmun-daceae），紫萁屬（Osmunda）的一種多年生植物［1］，主要分布在我國南方，在秦嶺以南山地海拔300 m～2 400 m均有分布［2］。其孢子儲藏于孢子葉羽片沿中肋兩側背面密生的孢子囊，紫萁孢子一般4月～5月成熟，成熟孢子囊呈綠色，基部微黃。紫萁葉株全草皆可入藥并可作為飼料；地下莖可作貫眾并開發成中成藥制劑；其孢子體嫩葉可加工成野菜，營養豐富，味道鮮美；其幼葉上所覆蓋的絨毛具有抗菌凝血和促進細胞修復等功效［3］。紫萁孢子量大，成本低，然而對其孢子食用藥用的價值研究報道甚少，其中的化學成分中脂肪酸的測定鮮見報道。本文采用GC-MS聯用的方法對四月中旬采集的薇菜孢子粉中的脂肪酸含量進行了分析，為薇菜孢子的進一步開發和利用的提供理論參考。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

GC-MS聯用儀（Agilent 7890 GC System/Agilent 5975 MS System）；KQ-400DB型數控聲波清洗器；離心機。

石油醚（60℃～90℃），氫氧化鉀，氯化鈉，硫酸（均為分析純，國藥）；甲醇，正己烷（均為色譜純，Fisher Scientific公司生產）；薇菜孢子粉為4月中下旬采集于湖北恩施。

1.2GC-MS聯用條件

色譜條件：HP-FFAP毛細管柱（G35），30 m× 0.25 mm×0.25 μm（膜厚）；程序升溫：初溫140℃→5℃/min→190℃（停留1 min）→3℃/min→220℃（停留10 min）；分流比：10∶1；進樣量：1 μL；進樣口溫度：230℃；載氣：高純氦氣（純度99．999%），流速：0.8mL/min。

質譜條件：電離方式：EI；電離能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；采集方式：全掃描Scan，質量掃描范圍40 amu～390 amu，標準質譜圖庫NIST08版。

1.3樣品處理

將薇菜孢子粉200 g用95%乙醇回流提取2次每次3 h，回收乙醇，加入適量的水，用石油醚（60℃～90℃）萃取數次至石油醚層接近無色，濃縮后用適量的硅膠（200目～300目）拌樣，干燥成粉末后經硅膠柱色譜柱石分離，用石油醚洗脫。收集石油醚組分，濃縮，即的黃綠色油狀樣品。

取黃綠色油狀樣品0.2 g于20 mL具塞試管中，加入4 mL正己烷，搖勻。再加入4 mL 0.5 mol/L的氫氧化鉀-甲醇溶液，震蕩，50℃回流20 min，加飽和氯化鈉水溶液至刻度，靜置分層，將上液轉移至10 mL離心管中，于離心機上以2000r/min的轉速離心沉淀10min，取上清液為GC-MS進樣樣品。

2結果與討論

在對石油醚洗脫組分經甲酯化后進行GC-MS分析，其總離子流色譜圖（圖1）共有11個峰，經GC-MS聯用儀標準質譜圖庫NIST08的計數機檢索，鑒定出其中8種是脂肪酸，通過面積歸一法測定了各組分的相對百分含量，實驗結果如圖表1所示，薇菜孢子粉石油醚洗脫部分棕櫚酸（hexadecanoic acid）含量較高50.20%，其次是亞油酸16.96%和油酸13.48%，其中硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，而豆蔻酸0.60%。

圖1　薇菜孢子粉中脂肪酸總離子圖Fig.1Total ion chromatogram for delspray from Osmunda Japonica spore power

表1　薇菜孢子粉中脂肪酸成分分析結果Table 1Analysis of delspray from Osmunda Japonica spore power

多不飽和脂肪酸（PUFAs）是人類的必須脂肪酸，對人體有重要的生理功能，能調節人體的脂質代謝，治療和預防心腦血管疾病，抗癌，對抗肥胖，促進生長發育和提高幼體的成活率等［4］。薇菜孢子粉脂肪酸中不飽和脂肪酸占36%，其中多不飽和脂肪酸占22.56%（亞油酸16.96%，亞麻酸5.56%），亞油酸在我們日常食用的液體植物有中普遍存在，一般植物油中含量為40%左右，也有高達70%～80%如紅花籽油，而亞麻酸在亞麻籽油高達57%［5］，因此薇菜孢子粉多不飽和脂肪酸開發沒有優勢。薇菜孢子粉脂肪酸中棕櫚酸高達50%，并且棕櫚酸在醫藥，化妝品，顏料等領域都有應用，可以考慮作為棕櫚酸的來源。

3結論

本研究利用GC-MS聯用技術分析了薇菜孢子粉中脂肪酸的成分和含量，其中各脂肪酸含量分別為棕櫚酸50.20%，亞油酸16.96%，油酸13.48%，硬脂酸7.69%，亞麻酸5.56%，花生酸3.42%，山崳酸2.08%，豆蔻酸0.60%，為薇菜孢子粉的進一步開發和利用奠定理論基礎。

［1］中國科學院植物研究所.中國高等植物圖鑒［M］.北京：科學出版社，1980：124-125

［2］羅世家.薇菜生態環境的分析［J］.湖北民院學報，2001，19（4）：8-10

［3］王謀強，張朝君.我國南方薇菜的研究現狀及其發展對策［J］.貴州農業科學，2006，34（4）：135-136

［4］鮑建民.多不飽和脂肪酸的生理功能及安全性［J］.中國食品與營養，2006（1）：45-46

［5］黃寶璽，王大為，王金鳳.多不飽和脂肪酸的研究進展［J］.農業工程技術，2009（8）：26-30

Analysis for Delspray from Osmunda Japonica Spore Powder

LIN Dong，CHEN Xin*，SHI Zi，LIU Liang
（School of Biology and Pharmaceutical Engineering，WuHan Polytechnic University，Wuhan 430023，Hubei，China）

With 95%ethanol solution as the extraction agent，eight fatty acid composition were extracted form osmunda japonica spore powder by reflux extraction method.The content of each fatty acid composition was determined by GC-MS with area normalization method.The results showed，the fatty acid contents in osmunda japonica spore powder were hexadecanoic acid 50.20%，elinoleic acid 6.96%，oleic acid 13.48%，stearic acid 7.69%，linolenic acid 5.56%，arachidic acid 3.42%，docosanoic acid 2.08%，myristic acid 0.60%.

Osmunda japonica spore；delspray；GC-MS

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.10.027

2015-01-27

國家自然科學基金面上項目（批準號：31370369）

林棟（1996—），男（漢），碩士研究生，研究方向：天然產物研究與開發。

陳新（1978—），男（漢），副教授，博士，研究方向：食品活性物質研究與開發。