罕見Rh分型引起輸血反應一例*

朱鑫方范亮峰烏宇波楊李輝方勇夏榮*（.復旦大學附屬華山醫(yī)院輸血科 上海 00040;.上海市血液中心血型參比實驗室 上海 00050)

罕見Rh分型引起輸血反應一例*

朱鑫方1**范亮峰2烏宇波1楊李輝1方勇1夏榮1***
（1.復旦大學附屬華山醫(yī)院輸血科 上海 200040;2.上海市血液中心血型參比實驗室 上海 200050)

Rh血型 抗C 抗E 輸血反應

Rh血型系統(tǒng)是紅細胞血型系統(tǒng)中最復雜的一個系統(tǒng)，臨床重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，患者血清中產(chǎn)生的Rh血型抗體也是導致遲發(fā)型輸血反應最多的抗體[1]。出現(xiàn)不規(guī)則抗體的患者很多都有多次輸血史，輸血時患者Rh抗原陰性的細胞遇到Rh抗原陽性的血液制品，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體，導致交叉配血不合，當輸入的Rh抗原陽性紅細胞激發(fā)回憶反應時，即會發(fā)生輸血反應?，F(xiàn)將1例罕見Rh分型R0產(chǎn)生抗C和抗E抗體引起的輸血反應報道如下。

1　病例介紹

患者男，87歲，漢族，因肝硬化、上消化道出血入院，實驗室檢查示血紅蛋白32 g/L，總膽紅素168 μmol/ L?；颊咴?014年11月底和12月20日分別輸血2 U，效果不佳，末次輸血后出現(xiàn)醬油色尿。本次入院輸血科交叉配血不合，送至血液中心行血液特配。①ABO血型定型及RH分型：采用試管法，將患者紅細胞洗滌3次后配成3%懸液，標記好試管后分別加抗體-A、-B、 -D、-C、-c、-E、-e，以上各管加患者紅細胞懸液；患者血清加ABO細胞，設自身對照管，具體按免疫血液學試驗方法操作[2]。②不規(guī)則抗體篩查及鑒定：采用鹽水法及快速間接抗人球蛋白法進行抗體篩查；用進口譜細胞，使用微柱凝膠檢測卡進行抗體鑒定，具體按說明書操作。③直接抗球蛋白試驗、間接抗球蛋白試驗：患者3%紅細胞懸液分別加多特異性抗球蛋白試劑、單特異性抗-IgG、單特異性抗-C3d，立即離心看結(jié)果?？焖匍g接抗人球蛋白法是血清加紅細胞加10滴liss液，37 ℃，10 min后洗3次，最后1次扣干后加1滴多抗或單抗，離心看結(jié)果。經(jīng)典間接抗人球蛋白法不加liss液，37 ℃，30 min，具體見免疫血液學試驗方法[2]。④吸收放散試驗：取正常獻血源中篩選Rh分型為dce/dce的紅細胞，洗滌3次后離心取1 ml壓積細胞，加患者1 ml血清，充分混勻，置37 ℃、30 min，離心后留取上清，如自身抗體強，可進行2次吸收[2]。患者紅細胞酸放散：取洗滌3次后患者壓積紅細胞1 ml，加1 ml酸試劑，充分混勻后離心取上清，用堿液滴定至中性，譜細胞采用微柱凝膠檢測卡檢測放散液格局，具體按試劑盒說明書操作。⑤毛細血管法：取患者紅細胞離心去盡上清液充分混勻。將紅細胞裝入10根毛細管中至60 mm，用密封物質(zhì)封閉毛細管一端。離心5 min(封閉端置于遠心端方向)后，割下毛細管中近心端和遠心端各5 mm紅細胞。將割下的毛細管分別置于試管中，加入鹽水充分搖動，將毛細管中的紅細胞沖出，以1 000 g離心1 min，去除空玻璃管，將紅細胞配制成2%～5%的紅細胞懸液備用[3]。⑥交叉配血：采用鹽水法、聚凝胺法、快速間接抗人球蛋白法，操作按血液免疫學試驗方法[2]。

結(jié)果顯示患者Rh分型為R0，血清中檢出抗C和抗E抗體。①血型及直接抗球蛋白試驗：患者血型為B型，正反定型一致，但自身對照有弱陽性?；颊叩腞h分型為ccDee（R0），其中C、E抗原有混合視野，提示輸血反應，毛細管法遠心端陳舊細胞CE抗原陽性，提示患者輸入了C、E抗原陽性細胞，遠端細胞直接抗球蛋白抗體強于近端（表1），提示遠端細胞表面有抗體結(jié)合被破壞，支持輸血反應。患者紅細胞直接抗球蛋白試驗多特異性抗-IgG 2+、單特異性抗-IgG 2+、單特異性抗-C3d陰性，直接抗球蛋白試驗陽性，進一步支持患者發(fā)生輸血反應。②抗體篩選和鑒定：抗體篩選鹽水法陰性，間接抗球蛋白試驗法（IAT）Ⅰ1+Ⅱ1+Ⅲ1+，自身對照管1+；患者血清及紅細胞放散液抗體鑒定細胞均為陽性，但有格局，為抗C抗體，抗E抗體不確定（表2）?；颊呒t細胞放散液細胞譜無格局，均為3+，提示患者有自身抗體，干擾抗體檢測，用Rh分型為dce/dce的細胞對患者血清行2次吸收試驗，去除自身抗體后再次鑒定，顯示為抗C和抗E抗體（表2）。③交叉配血：獻血源紅細胞懸液中50份未篩到對應的ccDee分型，在Rh陰性血源中篩選C、E抗原陰性的懸浮紅細胞，采用鹽水法、聚凝胺法、抗人球法交叉配血，鹽水法主次側(cè)均陰性，因患者有自身抗體同時直接抗球蛋白試驗陽性，聚凝胺法和抗人球蛋白法主次側(cè)均有弱凝集，因此給患者輸注ccdee的Rh陰性洗滌紅細胞，患者輸注后無輸血不良反應，輸注效果佳，血紅蛋白升至53 g/L。

2　討論

Rh血型系統(tǒng)包括D、C、c、E和e5種主要血型抗原。RhD血型是臨床輸血前常規(guī)檢測項目，而其他4種血型抗原在臨床并未常規(guī)檢測。許多試驗結(jié)果提示，由于輸血或妊娠原因而產(chǎn)生的紅細胞同種抗體大多為抗Rh系統(tǒng)抗體，且多為IgG型，雖然有天然的IgM型抗C、抗E抗體，但多數(shù)是有抗原刺激產(chǎn)生的IgG型[4-7]，本試驗中抗體篩選鹽水法為陰性，提示患者體內(nèi)無IgM型Rh相關(guān)抗體。D抗原目前是臨床常測抗原，患者產(chǎn)生抗D抗體機會不大，但C、c、E、e抗原在臨床并未常規(guī)檢測，極易因血型抗原不合而使患者產(chǎn)生抗體，當患者再次暴露于某種致敏性Rh血型抗原時，受者免疫系統(tǒng)回憶反應可迅速產(chǎn)生大量抗體，引起嚴重的輸血不良反應[8-9]。本文患者Rh分型為ccDee，部分地區(qū)統(tǒng)計只占人群的1.87%或更低[10-11]，而C、E抗原分布頻率高，患者很容易接觸到C、E抗原，從而產(chǎn)生抗體。利用毛細管法，檢測到患者體內(nèi)有陳舊的含CE抗原的紅細胞，與患者產(chǎn)生的抗C、抗E抗體發(fā)生反應，出現(xiàn)輸血反應。

表1　患者Rh分型及毛細管Rh分型

表2　患者血清抗體鑒定結(jié)果（凝膠卡法）

對于兩種或更多不規(guī)則抗體同時存在時，抗體鑒定尤需謹慎，防止漏檢，增加輸血風險，本文患者有自身抗體干擾，采用吸收試驗去除自身抗體后鑒定出抗C和抗E抗體。對于有輸血史或有輸血反應的患者，每次輸血前，建議進行抗篩及抗體鑒定檢測，同時可以檢測患者Rh分型，以減少輸血反應的發(fā)生。

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Transfusion reaction caused by rare Rh typing: case report

ZHU Xinfang1, FAN Liangfeng2, WU Yubo1, YANG Lihui1, FANG Yong1, XIA Rong1
(1.Department of Transfusion Medicine, Huashan Hospital, Fudan University, Shanghai 200040, China; 2.Blood Group Reference Room of Shanghai Blood Center, Shanghai 200050, China)

Rh typing; anti-C; anti-E; transfusion reaction

·社區(qū)衛(wèi)生管理·

R457.1+1

A

1006-1533（2015）14-0010-02

國家自然科學基金面上項目（81170530）；

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朱鑫方，女，碩士研究生，主要從事臨床輸血治療；

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簡介：夏榮，男，教授，主任醫(yī)師，復旦大學附屬華山醫(yī)院輸血科主任，博士研究生導師，主要從事血液病及臨床輸血治療、輸血相關(guān)免疫調(diào)節(jié)的研究。 E-mail:xiarongcn@126.com

2015-05-14）