加味去傷片主藥的薄層色譜研究

趙嚴麗，張火旺

(廣東省河源市食品藥品檢驗所，廣東 河源 517000)

加味去傷片是由重樓、九節(jié)茶、延胡索、三七、毛冬青5味藥材[1]運用現(xiàn)代中醫(yī)藥提取工藝制成的復方制劑，具有活血化瘀、消腫止痛功效，用于骨折、軟組織扭傷、挫傷早期。加味去傷片是河源市中醫(yī)院制劑，原標準為廣東省食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療機構(gòu)制劑注冊標準，在該標準中僅有加味去傷片性狀描述和簡單的理化鑒別，無法控制該藥品的有效性和均一性。本試驗中對處方中重樓、延胡索進行了定性研究，建立了其薄層色譜(TLC)鑒別方法。

1 儀器與試藥

SartoriusCPA225D型電子分析天平(精確度0.01 mg，賽多利斯科學儀器＜北京＞有限公司);KQ－250DA型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。硅膠G薄層板(自制);硅膠G薄層板(青島海洋化工廠);硅膠G薄層板(MERK公司)。重樓對照藥材(供鑒別用，批號為121157－201003)，延胡索對照藥材(供鑒別用，批號為120928－201208)，延胡索乙素對照品(供含量測定用，批號為110726－201213)，均由中國食品藥品檢定研究院提供;加味去傷片(河源市中醫(yī)院，批號分別為 20140125，20140126，20140127，規(guī)格為每片0.3 g);乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚、甲苯、丙酮等試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 重樓的鑒別[2－4]

取本品10片，研成細粉，加乙醇10 mL，超聲處理30 min(功率250 W，頻率100 kHz)，濾過，濾液作為供試品溶液。取重樓對照藥材0.5 g，加乙醇10 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液作為對照藥材溶液。再取缺重樓的陰性對照樣品，同供試品溶液制備法制得陰性對照品溶液。照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB中TLC法試驗，吸取上述3種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光燈和紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點或熒光斑點，陰性對照無干擾(圖1)。

圖1 重樓鑒別薄層色譜圖

2.2 延胡索的鑒別[2，5]

取本品20片，研細，加甲醇50 mL，超聲30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，加濃氨試液調(diào)pH至9～10，用乙醚提取2次，每次10 mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取延胡索對照藥材1 g，同法制備對照藥材溶液。另取延胡索乙素對照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺延胡索的陰性對照品，同供試品溶液制備法制得陰性對照品溶液。照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB中TLC法試驗，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮(5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘缸中約3 min后取出，揮盡板上吸附的碘后，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜和對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾(圖2)。

圖2 延胡索鑒別薄層色譜圖

3 討論

不同薄層板比較，取手鋪硅膠G薄層板，預制硅膠G板和默克板;不同溫度比較，取點樣后的薄層板，分別在6℃和20℃中展開;不同濕度比較，取點樣后的薄層板，分別在用硫酸調(diào)節(jié)相對濕度20%和80%的層析缸中展開。試驗結(jié)果表明，不同條件對鑒別無明顯影響。對于重樓鑒別的展開劑，經(jīng)過多次試驗，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上層溶液為展開劑展開，取得了很好的效果，能有效排除陰性對照的干擾現(xiàn)象，其主斑點分離清晰。本方法重復性好，專屬性強，陰性對照無干擾，可作為制訂其質(zhì)量標準時參考。

[1]Z20070983，醫(yī)療制劑注冊標準標準[S].

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:243.

[3]童湘?zhèn)?三七血傷寧膠囊中主藥的薄層色譜研究[J].中國藥業(yè)，2010，19(14):45.

[4]孟 芹，郭永利，馬克堅.云南紅藥片質(zhì)量標準研究[J].中國藥業(yè)，2001，6(1):27 －28.

[5]肖滿民，劉燦輝，葉玉華.天元膠囊的質(zhì)量標準研究[J].中醫(yī)藥導報，2010(5):106－108.