錢雯婕等
摘要 介紹北冬蟲夏草人工栽培技術,包括培養基配方、接種、菌絲培養、出草管理、采收等方面內容,以為提高北冬蟲夏草的栽培效益提供參考。
關鍵詞 北冬蟲夏草;人工栽培;接種;菌絲培養;出草管理;采收
中圖分類號 S567.3+5 文獻標識碼 B 文章編號 1007-5739(2015)14-0074-02
北冬蟲夏草[Cordyceps militaris(vuill.)Fr.],又名蛹蟲草,與冬蟲夏草同屬。其子實體及蟲體也可作為冬蟲夏草入藥,與冬蟲夏草的功能一致,具有益腎補陽(即補腎陽,又補肺陰)、保肝益腎、秘精益氣、止血化痰等功效。北冬蟲夏草是一種具有極高的醫療、滋補價值的珍貴中草藥,被譽為“東方神草”,人工栽培的北冬蟲夏草是理想的冬蟲夏草替代品。
檢索相關中外文獻可知,其富含蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、甾醇類化合物及不飽和脂肪酸等多種活性成分,并已初步驗證部分化合物有抗腫瘤的作用,能有效抑制人體腎小球細胞的增生和改善病理組織作用等,因此北冬蟲夏草極具開發利用價值,國家已將北冬蟲夏草歸為國家新資源食品。人工培植北冬蟲夏草藥用成分經醫學臨床證明可以取代資源緊缺、價格昂貴的天然冬蟲夏草,對治療糖尿病、腎病、心腦血管疾病、各種癌癥有明顯療效,其被贊譽為“東方軟黃金”,在國內外具有廣泛的銷售市場??梢姡倍x夏草的市場前景非常廣闊。
近年來,哈密市第十三師農科所科研人員進行了北冬蟲夏草高產栽培和篩選優質菌種等方面的研究,采用大米代料培養基,其培植技術、菌種制作已獲成功。北冬蟲夏草生產周期短,見效快,一個生產周期90 d(其中草生產周期60 d),作為冬蟲夏草的替代品,具有廣闊的市場開發前景。現總結北冬蟲夏草培育技術,以供參考。
1 培養基配方
1.1 母種轉管培養采用PDA加富培養基
配方:葡萄糖20 g、蛋白胨3 g、磷酸二氫鉀1.5 g、硫酸鎂0.5 g、瓊脂18 g、馬鈴薯200 g。先將馬鈴薯切成小塊在鍋里煮到8成熟,用紗布過濾,只要濾液,然后加入上述其他成分,微沸后定容至1 000 mL,倒入試管中(試管的1/4)121 ℃、30 min高壓滅菌,滅菌后擺斜面。
1.2 液體菌種培養基
配方:葡萄糖20 g、蛋白胨10 g、磷酸二氫鉀1 g、硫酸鎂0.5 g、酵母粉5 g。按1 000 mL的比例配制栽培營養液(250 mL三角瓶,每瓶倒100 mL培養液,加10個玻璃珠),高壓滅菌(121 ℃、45 min),取出,冷卻,備用。
1.3 大米代料培養基
配方:大米75 g,上述液體培養基95 mL,置于栽培盒內高壓滅菌(121 ℃、45 min),取出,冷卻,待用。
2 接種
在無菌條件下,將發滿試管的北冬蟲夏草母種切成0.5 cm×0.5 cm的菌種塊3~5塊,接種到放有上述液體培養基的250 mL三角瓶中,接種后于黑暗處靜置24 h后,采用振蕩式搖床振蕩培養(振蕩頻率120 r/min,23 ℃)5~7 d,待液體培養基內菌絲球長至直徑0.5 mm左右用于北冬蟲夏草人工栽培[1-5]。再將此液體菌種接種到米飯培養基上,每瓶接種量8~10 mL,接種后放入培養室進行菌絲培養。
3 菌絲培養
將接種后的栽培盒放在光照、濕度、溫度可以調控的培養室進行培養,初始階段施以光照強度100 lx、60%濕度,室內溫度保持在24~26 ℃進行暗光培養。菌絲萌發后把溫度降到21~23 ℃繼續暗光培養10~15 d,菌絲鋪滿培養料面,并有局部吃透培養料后,即可移入栽培室上架給光,進行轉色培養,要求光照時長14 h、光照強度500~600 lx、溫度控制在21~23 ℃、空氣相對濕度85%。菌絲完全轉色后,用大頭針扎2~4個眼通氣,開孔在轉色后的1~2 d進行,光照時長14 h,光照強度500~700 lx,白天溫度控制在21~23 ℃,晚上溫度下降至17~20 ℃,空氣相對濕度80%,以刺激原基的分化。原基形成后,溫度控制在20~22 ℃,空氣相對濕度90%,利于子實體的生長,光照時長14 h,光照強度500~600 lx,每天早晚各通風1次,每次30 min。北冬蟲夏草子座發生期需要氧氣,通氣量不足會造成二氧化碳積累過多,子座不能正常分化或出現子座纖細、密度大的畸形蟲草[6-11]。
4 出草管理
當菌絲長滿培養基并在表面出現一些小小隆起時,表明培養基表面已有原基形成,此時要調節晝夜溫差(5~10 ℃)刺激,有利于原基分化,并進行透氣通風,以保證培養室內空氣清新為度。CO2濃度維持在0.03%~0.05%。提高濕度至80%~85%,在出草階段,嚴格做好濕度管理工作,若濕度太大通風透氣不夠,容易誘發氣生菌絲,不利于子實體的生長[10-13];若濕度太小,影響菌絲生長和子實體分化,容易使培養基失水而影響產量,本來通風和補濕就是相對矛盾的,必須把握好濕度和通風程度。在出草階段需要光照強度500~700 lx,如果光線過弱,原基分化困難,出草少,子實體呈淡黃色,產質量低,并且北冬蟲夏草子實體有很強的向光性,在前排放置的蟲草比后排放置的蟲草子座生長速度快[12-14]。在子實體生長期間,為保持良好的草行,應經常轉動栽培瓶。
5 采收
子座呈橘黃色或橘紅色棒狀不再生長時,打開瓶口用剪刀或小刀將其從基部采下,放入潔凈器具內及時烘干或晾干,勿曝曬,以免褪色[10-13],干燥后存放在密封塑料袋內。
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