紅瘰疣螈排泄系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)組織學(xué)研究

彭東燕 肖小柳 李紅梅

摘要：采用一般組織學(xué)的方法研究了紅瘰疣螈（Tylototriton shanjing）的排泄系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)。結(jié)果表明，紅瘰疣螈的腎為中腎，由腎小體和腎小管組成。腎小體卵圓形，由腎小球和鮑曼氏囊組成；腎小管包括頸段、第一近曲小管、第二近曲小管、間段、第一遠(yuǎn)曲小管、第二遠(yuǎn)曲小管、集合管。輸尿管可分為被膜、黏膜下層、黏膜層三層。膀胱為泄殖腔膀胱，其黏膜層中形成了初級(jí)隱窩和次級(jí)隱窩。紅瘰疣螈雌雄異體，精巢主要由精細(xì)管組成，卵巢內(nèi)部可分為周質(zhì)和髓質(zhì)兩部分；輸卵管管壁較厚，由外向內(nèi)可分為漿膜層、黏膜上皮下層、黏膜上皮層三層。

關(guān)鍵詞：紅瘰疣螈（Tylototriton shanjing）；排泄系統(tǒng)；生殖系統(tǒng)；組織學(xué)

中圖分類號(hào)：Q954.6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）14-3466-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.14.033

Studies on Histology of Excretory and Reproductive Systems in Tylototriton shanjing

PENG Dong-yan， XIAO Xiao-liu， LI Hong-mei

（Yuxi Normal University， Yuxi 653100， Yunnan， China）

Abstract： In this paper the excretory and reproductive system in Tylototriton shanjing were studied by the general microanatomy method. The results showed that the kidney in Tylototriton shanjing was mesonephros， and composed of renal corpuscles and renal tubular. Renal corpuscles was oval， and composed of the glomerulus and Bowman's capsule. Renal tubule included cervical， proximal convoluted tubule，inter-segment，distal convoluted tubule and collecting duct. The ureter had three layers such as the tunica， submucosal and mucosal layer. Bladder was Cloaca bladder， and formed the primary and secondary crypt in the mucous layer. Tylototriton shanjing was dioecious. Testis was mainly composed of fine tubes. The ovary internal could be divided into two parts， periplasm and medulla. Oviduct wall was thick， and could be divided ecto-entad into serous layer， submucosa and mucosal epithelium.

Key words：Tylototriton shanjing；excretory system；reproductive system；histology

紅瘰疣螈（Tylototriton shanjing）屬國(guó)家Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物，于2004年被《中國(guó)物種紅色名錄》列為“近危”等級(jí)[1，2]。很多學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了多方面的研究，如紅瘰疣螈的皮膚顯微結(jié)構(gòu)觀察[3]、繁殖生態(tài)[4]、生命活動(dòng)規(guī)律[5]、產(chǎn)卵行為[6]以及早期胚胎發(fā)育[7]等方面均有報(bào)道。本試驗(yàn)對(duì)紅瘰疣螈排泄系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)的組織學(xué)進(jìn)行了初步研究。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用的材料采自云南鳳慶和云南新平，2雄4雌，均為成體。

1.2 方法

試驗(yàn)所需的組織小塊用8%福爾馬林固定，石蠟包埋、切片，蘇木精-伊紅染色，封固，光鏡觀察，攝片。

2 結(jié)果與分析

2.1 排泄系統(tǒng)

紅瘰疣螈的排泄系統(tǒng)包括腎臟、輸尿管、膀胱，其中腎臟包括腎小體和腎小管。腎小體包括腎小球和鮑爾氏囊；腎小管可分為七段，即頸段、第一近曲小管、第二近曲小管、間段、第一遠(yuǎn)曲小管、第二遠(yuǎn)曲小管、集合管。

2.1.1 腎小體 腎小體卵圓形（圖1a），蘇木精-伊紅染成鮮紅色，腎小球?yàn)橐粓F(tuán)毛細(xì)血管網(wǎng)（圖1b），在毛細(xì)血管網(wǎng)管腔內(nèi)可見(jiàn)到橢圓形的紅細(xì)胞，胞核橢圓形或圓形，被染成藍(lán)紫色。包圍在腎小球外的是鮑爾氏囊（圖1b），鮑爾氏囊分為兩層，臟層界限不清，緊貼腎小球，而壁層在光鏡下清晰可見(jiàn)，鮑爾氏囊的臟層與壁層之間存在間隙，在尿極處與近曲小管相連，有保護(hù)腎小球、儲(chǔ)存少量尿液的功能。

2.1.2 腎小管 頸段（圖1b）：連接鮑爾氏囊間隙與第一近曲小管的節(jié)段，該段較短，管腔較粗，細(xì)胞界限清晰，該段由4～5個(gè)細(xì)胞排列而成，細(xì)胞核著色較深，呈長(zhǎng)橢圓形。

第一近曲小管（圖1c）：緊接在頸段之后，該段是腎小管中最長(zhǎng)的一段，單層柱狀上皮，細(xì)胞界限不清，排列疏松，細(xì)胞質(zhì)被染成紅色，細(xì)胞核被染成藍(lán)紫色，游離面有非常發(fā)達(dá)的刷狀緣（Brushborder）。

第二近曲小管（圖1c）：緊接第一近曲小管，管腔較第一近曲小管小，細(xì)胞排列疏松，界限較清楚，細(xì)胞核分布均勻，有刷狀緣。

間段（圖1c）：連接近曲小管和遠(yuǎn)曲小管，該段較短且管腔狹窄，管壁由4～8個(gè)上皮細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞界限清楚，核大小不一，呈橢圓形，細(xì)胞質(zhì)染色較淺。

第一遠(yuǎn)曲小管（圖1b，圖1c）：該段上皮細(xì)胞為矮柱狀細(xì)胞，細(xì)胞排列緊密，染色較深，細(xì)胞核大，不規(guī)則，居中，幾乎占據(jù)整個(gè)細(xì)胞，游離面無(wú)刷狀緣。

第二遠(yuǎn)曲小管（圖1c）：緊接在第一遠(yuǎn)曲小管之后，該段由單層的柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成，排列非常緊密，管腔較大，細(xì)胞核呈橢圓形，分布于基底，著色深。

集合管（圖1a，圖1c）：細(xì)胞排列緊密，幾乎無(wú)間隙，細(xì)胞核大多呈橢圓形，細(xì)胞質(zhì)染色較淺，是腎小管的最末端，由第二遠(yuǎn)曲小管集合而成，管腔很大，管壁為單層柱狀上皮，隨著集合管后行，管腔越來(lái)越大。

2.1.3 輸尿管 輸尿管由外向內(nèi)可分為被膜、黏膜下層、黏膜層（圖1a，圖1d）。最外層為被膜，細(xì)胞散亂分布，界限不清。在被膜之下為黏膜下層，是一層極厚的結(jié)締組織，其內(nèi)分布著豐富的纖維和血管以及一些零星細(xì)胞。靠近集合管一端的黏膜層為假?gòu)?fù)層柱狀上皮，隨著輸尿管后行，逐漸變?yōu)樽円粕掀ぃ?xì)胞2～3層，排列疏松，著色較黏膜下層深。

2.1.4 膀胱 膀胱壁由外向內(nèi)可分為被膜、肌層、黏膜下層和黏膜層（圖1e，圖1f）。最外層為被膜，是一層較薄的膜，光鏡下透亮。肌層由1～2層排列不規(guī)則的環(huán)平滑肌組成，細(xì)胞核大，橢圓形。黏膜下層由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，與黏膜層和肌層之間無(wú)明顯界限。最里層為黏膜層，都是變移上皮，這些上皮細(xì)胞排列成2～5層不等，內(nèi)兩層近腔面的蓋細(xì)胞（Cover cells）較大，呈長(zhǎng)橢圓形，細(xì)胞質(zhì)著色較淺，核大，形狀不規(guī)則；中間層細(xì)胞相對(duì)較小，形狀不規(guī)則，核橢圓形；基層細(xì)胞小，核小，著色深。變移上皮之下有結(jié)締組織構(gòu)成的固有膜，固有膜與變移上皮一起向內(nèi)凹陷，形成皺襞，皺襞再向內(nèi)凹陷，形成初級(jí)隱窩和次級(jí)隱窩（圖1f）。

2.2 生殖系統(tǒng)

紅瘰疣螈雌性生殖系統(tǒng)主要包括卵巢、輸卵管。雄性生殖系統(tǒng)主要包括精巢、輸精管。

2.2.1 精巢 精巢主要是由精細(xì)管和其間的結(jié)締組織組成，內(nèi)含有豐富的血管和間質(zhì)細(xì)胞，精細(xì)管內(nèi)有各級(jí)生殖細(xì)胞，其中精子細(xì)胞較多。精細(xì)管外有一薄層基膜，連有支持細(xì)胞。支持細(xì)胞呈圓形，被包圍在支持細(xì)胞里面的是生精細(xì)胞，呈橢圓形（圖1g）。生精細(xì)胞增殖后形成成團(tuán)精原細(xì)胞，精原細(xì)胞排列緊密，核大，幾乎充滿整個(gè)細(xì)胞（圖1g）。初級(jí)精母細(xì)胞排列較精原細(xì)胞稀疏，次級(jí)精母細(xì)胞與初級(jí)精母細(xì)胞相似，只是細(xì)胞體積稍變小（圖1h）。精子細(xì)胞體積明顯變小，著色較深，精子細(xì)胞之間有一薄層相連，最后精子細(xì)胞發(fā)育成成熟精子（圖1i）。其中，精子細(xì)胞一開(kāi)始是形成成束未成熟的精子（圖1h），像蓑衣，頭并頭排列在一起，形成成熟的精子后，才變成典型的蝌蚪狀，主要由頭和尾兩部分組成，頭前端略尖，后部稍圓，核大，著色深，尾側(cè)扁，有刷狀緣，能擺動(dòng)，控制著精子游動(dòng)的方向。另外，部分的精子細(xì)胞發(fā)育成變態(tài)精子（圖1j）。

2.2.2 卵巢 卵巢表面是一層上皮組織，向里為卵粒（圖1k），卵粒分布均勻，呈橢圓形，大小不一，相互擠壓排列，被染成黑灰色。卵巢內(nèi)部可分為周質(zhì)（Periplasm）和髓質(zhì)（Medulla）兩部分（圖1m），周質(zhì)染色較淺，髓質(zhì)染色較深，被染成血紅色。在光鏡下可見(jiàn)卵母細(xì)胞間有膠帶相連，卵母細(xì)胞中卵黃分布均勻，膠帶細(xì)胞界限不清，核分布不均（圖1l）。在卵巢內(nèi)有一些大的、疏松的、沒(méi)有細(xì)胞核的、封閉的卵泡（圖1n），呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，卵泡最外層是單層的上皮細(xì)胞。

2.2.3 輸卵管 紅瘰疣螈輸卵管的橫切面為一管腔結(jié)構(gòu)，管壁較厚。由外向內(nèi)可分為漿膜層、黏膜上皮下層、黏膜上皮層三層（圖1o）。最外層為漿膜層，是一層較薄的結(jié)締組織，細(xì)胞排列疏松，核形狀不一，多為長(zhǎng)橢圓形。向下為黏膜上皮下層，該層較厚，分布著各種腺細(xì)胞，光鏡下可見(jiàn)到最多的腺細(xì)胞有兩種（圖1p），一種是核呈長(zhǎng)棱形的分泌細(xì)胞，另一種是核呈圓形的分泌細(xì)胞，它們共同圍成單腺管。靠近管腔的一層是黏膜上皮層，細(xì)胞2～3層，分布不均，該層細(xì)胞染色較深，形狀不一，胞質(zhì)豐富。

3 小結(jié)與討論

3.1 紅瘰疣螈腎臟與其他兩棲類動(dòng)物的差異

脊椎動(dòng)物的腎臟一般朝著結(jié)構(gòu)緊密以及與生殖系統(tǒng)分離的趨向發(fā)展。兩棲綱動(dòng)物的腎臟較圓口綱和某些硬骨魚(yú)類的腎臟進(jìn)化，為中腎[8，9]。紅瘰疣螈腎臟的腎小體數(shù)目少，特別是腎臟前段。蚓螈目版納魚(yú)螈（Ichthyophis bannanica）[10]及無(wú)尾目的中華蟾蜍（Bufo gargarizans）[11]的腎小體數(shù)目比紅瘰疣螈腎小體的數(shù)目多，但紅瘰疣螈腎小體較大，這就提高了腎小體吸收和濾過(guò)效率，彌補(bǔ)了腎小體數(shù)目少的不足。

紅瘰疣螈腎小管與大鯢（Megalobatrachus davidianus）[12]相似，分為七段，較為復(fù)雜，近曲小管有發(fā)達(dá)刷狀緣，利于水分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的重吸收；但與中華蟾蜍的腎小管有所差異[11]，中華蟾蜍的腎小管長(zhǎng)而卷曲，分化程度更高。

綜上，可以看出紅瘰疣螈的腎臟較蚓螈目進(jìn)化，但是不如無(wú)尾目發(fā)達(dá)，處于兩棲動(dòng)物的中間過(guò)渡階段。

3.2 紅瘰疣螈膀胱與其他兩棲類動(dòng)物的差異

紅瘰疣螈的膀胱壁結(jié)構(gòu)與同屬尾斑瘰螈[13]相似，與版納魚(yú)螈[10]相比多了肌層，肌層與膀胱的收縮和舒張有關(guān)。中華蟾蜍黏膜下層下有多層肌層[11]，鳥(niǎo)綱和哺乳綱等高等動(dòng)物的膀胱黏膜下層下都存在著豐富的平滑肌層，而紅瘰疣螈膀胱黏膜下層與被膜之間僅存1～2層環(huán)形排列的平滑肌，可見(jiàn)紅瘰疣螈在進(jìn)化地位上還比較低。紅瘰疣螈黏膜層的變移上皮有2～5層，向內(nèi)凹陷形成皺襞，形成初級(jí)隱窩和次級(jí)隱窩，與中華蟾蜍[11]相似，大大加強(qiáng)了其膀胱儲(chǔ)存尿液的功能，使之更加適應(yīng)陸地生活環(huán)境。紅瘰疣螈被膜和黏膜下層與版納魚(yú)螈[10]、中華蟾蜍[11]都相似，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成。由此可見(jiàn)，紅瘰疣螈膀胱重吸收水分的能力比版納魚(yú)螈強(qiáng)，但分化程度相對(duì)來(lái)說(shuō)還比較低。

3.3 紅瘰疣螈雄性生殖系統(tǒng)與其他兩棲類動(dòng)物的差異

一般魚(yú)類、哺乳動(dòng)物由精原細(xì)胞發(fā)育成精子的過(guò)程，要經(jīng)過(guò)精原細(xì)胞-初級(jí)精母細(xì)胞-次級(jí)精母細(xì)胞-精子細(xì)胞-精子五個(gè)階段[14]；紅瘰疣螈精子形成過(guò)程與一般魚(yú)類、哺乳動(dòng)物的情況相似，也經(jīng)過(guò)以上五個(gè)階段，較為復(fù)雜。與中國(guó)林蛙（Rana temporaria chensinensis）[15]精子形成過(guò)程相比，多了精原細(xì)胞和精母細(xì)胞兩個(gè)時(shí)期。

中國(guó)林蛙生精細(xì)胞1～2層排列，細(xì)胞大而圓，細(xì)胞核明顯，生精細(xì)胞之間有錐形的支持細(xì)胞，支持細(xì)胞外形不規(guī)則[15]。而紅瘰疣螈的生精細(xì)胞是被包圍在大而圓的支持細(xì)胞內(nèi)，數(shù)量多，體積相對(duì)較小，核橢圓形，著色深，與中國(guó)林蛙的生精細(xì)胞存在差異。

紅瘰疣螈正常的成熟精子與中國(guó)林蛙[15]相似，由頭部和尾部組成；與中國(guó)大鯢（Andrias davidianus）[16]相比少了中片，結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單。

以上這些特征的比較，可以看出紅瘰疣螈生殖細(xì)胞的分化程度高，但精子結(jié)構(gòu)相對(duì)還比較簡(jiǎn)單。

3.4 紅瘰疣螈雌性生殖系統(tǒng)與其他兩棲類動(dòng)物的差異

紅瘰疣螈卵巢表面是一層結(jié)締組織，向里分布著卵粒，內(nèi)部分為周質(zhì)和髓質(zhì)兩部分，與中國(guó)林蛙[15]相似。中國(guó)林蛙與中國(guó)大鯢卵細(xì)胞外均有三層膜，由內(nèi)向外分別為卵黃膜、內(nèi)膠膜、外膠膜，在顯微鏡下清晰可見(jiàn)[15，17]，而紅瘰疣螈卵細(xì)胞外并未明顯觀察到這三層，說(shuō)明紅瘰疣螈卵細(xì)胞分化程度較低。

紅瘰疣螈的輸卵管結(jié)構(gòu)與中國(guó)大鯢[17]相比缺少漿膜下層，但兩者的漿膜層相似。中國(guó)大鯢的腺細(xì)胞主要分布在黏膜上皮層[17]，而紅瘰疣螈的腺細(xì)胞主要分布在黏膜上皮下層，且形狀與中國(guó)大鯢有差異，腺細(xì)胞之間分界明顯。中國(guó)林蛙與中國(guó)大鯢輸卵管黏膜上皮都存在纖毛柱狀上皮細(xì)胞，且細(xì)胞內(nèi)都有線粒體，只是中國(guó)大鯢纖毛頂端的線粒體較少[15，17]，而紅瘰疣螈輸卵管中并沒(méi)有明顯看到纖毛柱狀上皮細(xì)胞。棘胸蛙（Rana spinosa David）輸卵管分為漿膜層、肌層、黏膜層三層，肌層較薄，不發(fā)達(dá)[18]，紅瘰疣螈與棘胸蛙相比少了肌層，這就大大降低了輸卵管的舒張性，與紅瘰疣螈受精卵不在體內(nèi)發(fā)育的特性相適應(yīng)。

從以上這些特征分析可知，紅瘰疣螈雌性生殖系統(tǒng)分化程度低，較無(wú)尾目原始。

致謝：感謝李澤君老師及茶云肖、段生麗同學(xué)對(duì)本研究提供的幫助。

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