多指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在兒童細(xì)菌性和病毒性腦膜炎中的應(yīng)用價(jià)值

朱有森，沈 林，張 麗，李艷紅，張朝霞△

（1.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院學(xué)檢驗(yàn)中心，新疆烏魯木齊830054；2.烏魯木齊市第一人民醫(yī)院醫(yī)院檢驗(yàn)科，新疆烏魯木齊830000）

腦膜炎是兒童常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，細(xì)菌性腦膜炎是由各種細(xì)菌引起的以腦膜炎癥為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，以嬰幼兒多見(jiàn)，2歲內(nèi)發(fā)病者約占該病的75%［1］。是嚴(yán)重威脅兒童健康的疾病。及早鑒別診斷和采取有效的治療措施是降低細(xì)菌性、病毒性腦膜炎致死率和致殘率的關(guān)鍵［2］。細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎在起病方式、臨床癥狀、體征上有許多相似之處，在疾病早期，臨床上有時(shí)難以鑒別，以往常僅憑腦脊液常規(guī)、生化等檢查結(jié)果做出經(jīng)驗(yàn)性診斷和試驗(yàn)性治療，因?yàn)槟X脊液培養(yǎng)需送檢1周后才能得到結(jié)果；而抗菌藥物的早期廣泛使用，也可使腦脊液表現(xiàn)不典型，疾病鑒別困難。因此，尋求一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的鑒別診斷方法顯得尤為迫切需要。血清降鈣素原（PCT）是一種血漿蛋白，當(dāng)人體組織發(fā)生嚴(yán)重感染時(shí)，其水平會(huì)出現(xiàn)明顯的上升，PCT 的水平能反映出全身炎癥反應(yīng)的活躍程度，當(dāng)機(jī)體遭受嚴(yán)重細(xì)菌、真菌和寄生蟲(chóng)感染或臟器衰 竭 時(shí)，PCT 在 血 漿 中 的 水 平 會(huì) 增 加［3］。C－反 應(yīng) 蛋 白（CRP）是指在人體組織發(fā)生感染或損傷時(shí)，在血漿中的占比急劇上升的一類蛋白質(zhì)，它能激活補(bǔ)體、增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能。白細(xì)胞介素6（IL－6），主要由單核巨噬細(xì)胞、Th2細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，主要功能包括刺激B 細(xì)胞分泌抗體、活化T 細(xì)胞、活化肝細(xì)胞合成應(yīng)急蛋白從而參與炎癥反應(yīng)和促進(jìn)血細(xì)胞發(fā)育等［4］。本研究通過(guò)檢測(cè)PCT、CRP、IL－6在細(xì)菌性和病毒性腦膜炎中的水平，旨在評(píng)價(jià)他們?cè)谂R床中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012～2014年新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科和神經(jīng)內(nèi)科通過(guò)金標(biāo)準(zhǔn)腰椎穿刺確診腦膜炎的3～12歲兒童，其中病毒性腦膜炎37例，細(xì)菌性腦膜炎43例，作為患者組，體檢中心收集的健康兒童50例作為對(duì)照組。

1.2 方法 收集的血清標(biāo)本均需受試者空腹8h以上，于清晨抽取空腹肝素鋰、鈉、氨抗凝的肘部靜脈血約2mL，室溫自然凝固10～20 min 后，以2 000r／min 的轉(zhuǎn)速離心10～15 min，仔細(xì)收集血清于Eppendorf管中，待編號(hào)后于－80 ℃保存，用德國(guó)羅氏儀器進(jìn)行測(cè)定血清中PCT、CRP、IL－6的水平。參考值PCT 為0～0.5ng／dL、CRP為0～0.6mg／mL、IL－6＜7pg／mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用Microsoft Excel2003 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料滿足正態(tài)分布的采用表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。對(duì)照組與患者組之間的比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

病毒性腦膜炎與細(xì)菌性腦膜炎治療后，PCT、CRP、IL－6水平均有下降，基本降至PCT、CRP、IL－6正常參考范圍。其中病毒性腦膜炎PCT、CRP、IL－6治療前和治療后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；細(xì)菌性腦膜炎PCT、CRP、IL－6水平治療前和治療后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；但是對(duì)照組PCT、CRP、IL－6 治療前和治療后比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療前和治療后病毒性腦膜炎和細(xì)菌性腦膜炎患者組及對(duì)照組所測(cè)PCT、CRP、IL－6水平見(jiàn)表1。

表1 病毒性、細(xì)菌性腦膜炎患者組和對(duì)照組PCT、CRP、IL－6檢測(cè)結(jié)果

表1 病毒性、細(xì)菌性腦膜炎患者組和對(duì)照組PCT、CRP、IL－6檢測(cè)結(jié)果

治療前 治療后組別 n PCT（ng／dL） CRP（mg／mL） IL－6（pg／mL）PCT（ng／dL） CRP（mg／mL） IL－6（pg／mL）病毒性腦膜炎患者組 37 4.45±4.61 5.70±2.22 10.77±1.79 0.27±0.081.06±4.21 4.7±1.07細(xì)菌性腦膜炎患者組 43 30.36±5.02 28.55±4.80 32.10±6.70 0.43±0.06 0.45±0.01 4.8±1.18對(duì)照組 50 0.35±0.08 0.34±0.13 3.70±1.42 0.32±0.01 0.31±0.11 3.7±1.42

3 討 論

腦膜炎是危害兒童健康的重要疾病，PCT 為降鈣素前肽物質(zhì)，是一種無(wú)激素活性的糖蛋白，由116個(gè)氨基酸組成，通常在甲狀腺濾泡旁細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)由PCT mRNA 翻譯成前PCT，進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜經(jīng)特異酶和糖基化作用產(chǎn)生PCT，半衰期22～35h。PCT 可被一種特異性蛋白裂解酶剪切為降鈣素、降鈣蛋白、N 端殘基，正常情況下，PCT 全被剪切而不會(huì)被釋放到血液中，所以正常人體PCT 水平很低（＜0.1μg／mL），但發(fā)生嚴(yán)重感染時(shí)可超過(guò)100μg／mL。甲狀腺外的其他組織也可分泌PCT，有研究報(bào)道全甲狀腺切除的患者在感染嚴(yán)重時(shí)血中的PCT 水平仍然很高，甲狀腺以外器官（如肝臟）的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌感染產(chǎn)生反應(yīng)，引起PCT 合成釋放［5］。在系統(tǒng)性全身感染，特別是感染性休克時(shí)，人體外周血中可以檢測(cè)到高濃度的PCT，且與感染的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)［6］。目前認(rèn)為PCT 是一種診斷早期細(xì)菌感染的靈敏指標(biāo)。Gendrel等［7］發(fā)現(xiàn)在細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎患者體內(nèi)血清PCT、CRP 濃 度 比 較 差 異 均 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義，Jereb 等［8］認(rèn) 為PCT＞0.5μg／L是診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌感染的可靠指標(biāo)。

CRP是肝臟上皮細(xì)胞合成一種環(huán)狀五球體蛋白，正常情況下以微量（0.07～5mg／L）形式存在于健康人體血清中。在急性炎癥反應(yīng)或組織損傷時(shí)可顯著增高，作為臨床廣泛應(yīng)用的炎癥指標(biāo)，長(zhǎng)期以來(lái)用于感染及自身免疫性疾病的診斷和監(jiān)測(cè)。在炎癥急性期，CRP合成在4～6h內(nèi)迅速增加，高峰時(shí)可為正常值的100～1 000倍，在血中的半衰期4～6h.。國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌性感染時(shí)CRP 濃度會(huì)升高，CRP 濃度大于40 mg／L時(shí)基本可以確定存在細(xì)菌感染［9］，而大多數(shù)病毒感染時(shí)，CRP濃度則升高不明顯。有研究證實(shí)，CRP用于細(xì)菌感染早期診斷的特異度達(dá)89%，靈敏度為74%，故可作為判斷細(xì)菌感染的首選指標(biāo)［10］。綜上所述，PCT 檢測(cè)可早期鑒別細(xì)菌性腦膜炎與病毒性腦炎，結(jié)合CRP檢測(cè)，可進(jìn)一步提升早期鑒別診斷能力。細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率低且耗時(shí)長(zhǎng)，此時(shí)與病毒性腦炎鑒別非常困難，要及時(shí)采取正確治療措施迫切需要尋找一種新的敏感、特異、快速診斷指標(biāo)。血清PCT 和CRP 檢測(cè)方法簡(jiǎn)便快速，標(biāo)本易于獲取，費(fèi)用不高，可廣泛應(yīng)用于臨床，結(jié)合患者臨床癥狀、腦脊液常規(guī)和生化等檢查指標(biāo)可以更加及時(shí)準(zhǔn)確地確診病情，為早期治療合理用藥提供重要的參考依據(jù)，有利于提高疾病的治愈率，具有重要的臨床價(jià)值［11］。

IL－6是機(jī)體受炎癥刺激后由T 細(xì)胞、B細(xì)胞、單核－巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等分泌的細(xì)胞因子，結(jié)合本文，IL－6是兒童病毒性腦膜炎和細(xì)菌性腦膜炎發(fā)病機(jī)制中重要的炎癥介質(zhì)，是診斷兒童腦膜炎的早期敏感指標(biāo)，而且新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心也開(kāi)展了此檢測(cè)項(xiàng)目，為臨床提供了更加便利的檢查條件，IL－6檢測(cè)快速、方便，比腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)更加有效。

本研究顯示，PCT、CRP、IL－6在病毒性和細(xì)菌性腦膜炎中均有升高，但是本研究數(shù)據(jù)顯示細(xì)菌性腦膜炎中這3項(xiàng)檢查指標(biāo)均比病毒性腦膜炎升高速度快，升高水平多。PCT、CRP、IL－6作為新的炎癥指標(biāo)，受到了越來(lái)越多的重視，在兒童腦膜炎中血清中PCT、CRP、IL－6水平都迅速升高，且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。為臨床診斷提供更多便利，節(jié)省患者等待結(jié)果的時(shí)間，之后的研究應(yīng)該多增加一些相似病例，以便在鑒別診斷方面為臨床提供更多方便。

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