集落刺激因子對化療者血液白細胞介素－4和腫瘤壞死因子－α的影響＊

李慶端，林俊山，高凌云，葉少毅

（福建省漳州市中醫(yī)院，福建漳州363000）

白細胞是機體防御系統(tǒng)的主要組成部分。當病情惡化，炎癥介質因子刺激繼續(xù)增強，機體的應激反應無法達到防御作用時，就會通過加強細胞－體液免疫調控，促進骨髓內細胞成熟，調節(jié)骨髓屏障，加速成熟細胞釋放，達到提升血液中白細胞的作用。而運用集落刺激因子（CSF）刺激骨髓提升外周血液中白細胞數(shù)的機制與上述不同，人為注射CSF 主要是刺激多能造血干細胞和不同發(fā)育分化階段的造血干細胞進行增殖、分化并引導骨髓細胞從G0期進入S增殖期［1］，促進細胞的成熟，改變血髓屏障的微循環(huán)，加速細胞由骨髓釋放入外周血從而達到提升血液中白細胞的作用。本研究旨在探討CSF對化療者血白細胞介素－4（IL－4）和腫瘤壞死因子－α（TNF－α）的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年6月至2014年7月于本院住院化療的腫瘤患者30例作為化療組，排除發(fā)熱、細菌感染和近期手術患者，男女不限，年齡43～68歲，使用CSF前白細胞小于或等于4.0×109／L，使用CSF后白細胞大于或等于15×109／L；同期住院明確診斷細菌感染的患者30例作為細菌感染組，外周血液白細胞升高大于或等于15×109／L，細菌培養(yǎng)陽性，臨床明確診斷為感染性肺炎患者，男女不限，年齡38～70歲；健康體檢者30 例作為健康對照組，外周血液白細胞4.0～10.0×109／L，近期內無發(fā)熱，無感染體征并排除孕婦、血液系統(tǒng)疾病和服用影響粒細胞數(shù)量功能藥物的人群，男女不限，年齡25～51歲。

1.2 儀器與試劑 希森美康－1800i血細胞全自動分析儀與配套試劑為日本希森美康公司產品；IL－4和TNF－α酶聯(lián)檢測試劑盒為美國Cloud－Clone Corpg 公司產品；酶標儀RAYTORT6500和全自動洗板機TW960 為美國Rayto 雷杜公司產品。

1.3 方法 用ELISA 方法，分別檢測化療組使用CSF前后、細菌感染組以及健康對照組靜脈血漿中IL－4和TNF－α的水平，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結 果

各組血清IL－4和TNF－α水平的檢測結果見表1。從表中可見使用CSF后可使化療者血中IL－4水平輕度升高，但與使用CSF前比較差異無統(tǒng)計學意義（t＝0.364，P＞0.05），與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學意義（t＝0.269，P＞0.05），但與細菌感染組比較明顯降低（t＝4.281，P＜0.05）。使用CSF后可使化療者血中TNF－α水平明顯高，與使用CSF前、健康對照組和細菌感染組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表1 各組血液中IL－4和TNF－α檢測結果（ng／mL，

表1 各組血液中IL－4和TNF－α檢測結果（ng／mL，

＊：P＜0.05，分別與細菌感染組、使用CSF 前、健康體檢組比較；△：P＜0.05，與細菌感染組比較。

患者類型 n TNF－αIL－4化療組使用CSF前 30 1.705±1.608 1.148±1.102使用CSF后 30 3.894±1.724＊ 1.257±1.213△細菌感染組 30 1.987±1.421 2.897±1.705健康體檢組30 1.739±1.574 1.174±1.172

3 討 論

正常情況下，外周血液循環(huán)中的白細胞升高是一種機體的應激反應。是由于體內存在炎癥介質因子（如組織挫傷、感染、中毒等因素產生）刺激下，通過體液免疫系統(tǒng)的調控作用，使得血管張力發(fā)生變化，舒張血管內皮細胞，調節(jié)微血管的通透性，抑制血小板和白細胞在血管壁上的黏附能力，使得邊緣池的白細胞迅速向循環(huán)池移動。同時啟動活化細胞免疫系統(tǒng)，活化致敏免疫細胞，分泌多種細胞因子發(fā)揮細胞免疫調控作用，增強白細胞的變形、趨化、游走、吞噬和消化能力，調節(jié)白細胞凋亡時間，延長成熟白細胞存活時間等以提升外周血中白細胞數(shù)。腫瘤化療者使用重組人CSF 提升血液中白細胞數(shù)的同時，體內因白細胞的波動導致一系列細胞因子量的變化，尤其是與白細胞調節(jié)相關的細胞因子。本研究表明，使用CSF 后化療者體內的TNF－α的水平明顯升高，而IL－4升高的幅度不明顯。這與急性創(chuàng)傷導致IL－4明顯升高不同［2］，亦與糖皮激素導致IL－4明顯升高而TNF－α水平下降不同［3］。細菌感染組IL－4的水平明顯升高而TNF－α升高的幅度不明顯，這與使用CSF后誘發(fā)體內產生的細胞因子種類和量不同。外周血中可見白細胞出現(xiàn)核質發(fā)育不一致的現(xiàn)象［4］。TNF－α是由活化的單核－巨噬細胞產生一種糖蛋白包括可溶性sTNF－α 和膜相關性mTNF－α，屬于Ⅱ型膜蛋白，以三聚體的形式發(fā)揮作用的。TNF－α通過與靶細胞膜上的腫瘤壞死因子受體TNFR 結合實現(xiàn)細胞毒性、抗病毒、免疫調節(jié)等生物學功能。同時，TNF－α作為細胞死亡因子之一參與細胞凋亡調節(jié)，又作為一種炎癥介質，能增加血神經屏障的通透性［5］，刺激中性粒細胞，使其黏附在血管內皮細胞上，產生超氧化物釋放溶酶體酶，增加補體受體的表達。本次結果表明CSF 可以激活單核－巨噬細胞產生TNF－α，TNF－α是調節(jié)血循環(huán)中白細胞的主要因素之一，也是外周粒細胞在光學油鏡下可見到異常增粗顆粒原因之一。這與停用CSF后外周循環(huán)中白細胞總數(shù)急劇下降相符。IL－4是由活化T 淋巴細胞分泌的，促進B淋巴細胞增殖和分泌抗體；誘導單核細胞分泌CSF，增強粒細胞介導的吞噬、殺傷活性和ADCC作用同時抑制單核細胞分泌TNF、IL－1、IL－6。本次研究結果中IL－4升高的幅度不明顯，提示CSF對T 淋巴細胞的激活不明顯，與細菌感染機制不同，這與機體處于非應激狀態(tài)有關，為的是穩(wěn)定內環(huán)境，達到負反饋作用，進一步調節(jié)骨髓細胞的分裂和釋放速度。

［1］石小玲.集落刺激因子對造血的調控作用及其檢測的臨床意義［J］.實用醫(yī)技雜志，2007，14（15）：2091－2092.

［2］白黎智，邢嶸，路小光，等.創(chuàng)傷患者血漿腫瘤壞死因子－α、白細胞介素－4動態(tài)變化及其意義［J］.中國實用醫(yī)藥，2007，2（15）：22－24.

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