黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷抗炎鎮痛作用

雷心雨，黃怡婷，朱翠玲，于茜，孫靜華，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

·藥理毒理·

黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷抗炎鎮痛作用

雷心雨，黃怡婷，朱翠玲，于茜，孫靜華，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

目的：考察黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎鎮痛及免疫方面的作用。方法：小鼠進行二甲苯耳腫脹、小鼠瓊脂肉芽腫、小鼠醋酸扭體鎮痛等試驗，雷公藤多苷15 mg·kg-1和黃芪總皂苷150 mg·kg-1進行配伍，研究雷公藤多苷配伍黃芪總皂苷及雷公藤多苷、黃芪總皂苷各自的抗炎、鎮痛及免疫的作用。結果：黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷能有效降低小鼠的耳腫脹度，降低瓊脂肉芽腫重量，減少小鼠扭體次數，增加小鼠免疫器官重量。結論：黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎鎮痛方面具有一定的增效作用。

雷公藤多苷；黃芪總皂苷；抗炎；鎮痛；免疫

類風濕性關節炎是常見疑難雜癥，雷公藤是目前公認的治療類風濕關節炎最有效的中藥之一［1］。雷公藤多苷（tripterygium wilfordii polyglycosidium，TWP） 是從雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.）中提取的一類極性較大的混合物，含有二萜類、生物堿及一些五環三萜，為臨床上使用較多的雷公藤類制劑，具有抗炎、抑制免疫、抗生育等活性，廣泛用于治療類風濕性關節炎［2］。雷公藤制劑療效與毒副作用并存，限制了雷公藤的深入應用。通過雷公藤多苷的復方組方研究，發現通過藥物及不同方劑的配伍可以達到增效減毒的目的［3］。

治療類風濕關節炎的復方中多用黃芪來補氣扶正。有研究表明黃芪與雷公藤多苷合用時可顯著增加雷公藤多苷的抗炎作用，更加顯著降低佐劑性關節炎大鼠血清中IL-1β的含量［4］。黃芪總皂苷是黃芪中一類重要有效組分，具有調節免疫、保護心血管等藥理作用［5］。本文將常用劑量的雷公藤多苷與黃芪總皂苷配伍，考察二者聯合在抗炎、鎮痛、免疫方面的作用。

1　材料

1.1動物

健康昆明種小鼠，雄性，體重20±2g，由福建省吳氏實驗動物中心提供。

1.2藥物

黃芪總皂苷，本課題組以大孔吸附樹脂方法制備；雷公藤多苷，福建匯天生物藥業有限公司，批號130701，臨用時用蒸餾水配成所需濃度混懸液供灌胃使用。

2　方法

2.1二甲苯誘導小鼠耳腫脹試驗

小鼠隨機分為4組，分別為正常對照組、雷公藤多苷15 mg·kg-1組和黃芪總皂苷150 mg·kg-1組和雷公藤多苷15 mg·kg-1+黃芪總皂苷150 mg·kg-1配伍組，每組10只。以上各組分別按20 mL·kg-1進行灌胃給予藥液或生理鹽水，每天1次，連續7 d。末次給藥后1 h，以20 μL二甲苯涂于各組小鼠左耳兩面致炎，右耳不涂作對照，致炎后45 min處死小鼠。剪下兩耳，用直徑8 mm的打孔器分別在左右同一部位打下圓耳片，稱重，以耳片重量之差為腫脹度。

2.2小鼠瓊脂肉芽腫試驗

小鼠分組及給藥同“2.1”。給藥前在各小鼠背中線處皮下注射2%瓊脂溶液0.4 mL。末次給藥后1 h，處死動物，剝離出肉芽瓊脂塊，稱取濕重。

2.3小鼠醋酸扭體鎮痛試驗

小鼠分組及給藥同“2.1”。末次給藥后1 h，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸水溶液 0.2 mL，觀察并記錄15 min內的小鼠扭體次數。

2.4免疫器官臟體指數測定

小鼠分組及給藥同“2.1”。末次給藥1 h后處死小鼠，分離免疫器官胸腺、脾臟，計算臟體指數。

2.5數據統計

所有數據均采用SPSS13.0軟件包進行統計學處理，所得結果以均數±標準差（x±s）表示。各組間均數比較采用單因素方差分析（one-way ANOVA），采用LSD法進行組間兩兩比較。

3　結果

3.1對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

與對照組比較，雷公藤多苷組和配伍組在致炎45 min后小鼠耳腫脹度顯著性降低（P＜0.05）；黃芪總皂苷組有降低作用趨勢但無顯著性差異（P＞0.05）。與雷公藤多苷組和黃芪總皂苷組比較，配伍組均無顯著性差異（P＞0.05），表明配伍組降低小鼠耳腫脹度作用主要來源于雷公藤多苷。

表1　黃芪總皂苷聯合雷公藤多苷對小鼠耳腫脹的影響（x±s，n=10）

3.2對瓊脂致小鼠肉芽腫的影響

與對照組比較，雷公藤多苷組、黃芪總皂苷組和配伍組肉芽腫的質量顯著性降低（P＜ 0.05，P＜0.05，P＜ 0.01）；此外，配伍組與黃芪總皂苷組致炎后小鼠耳肉芽腫的質量組間具有顯著性差異（P＜0.05），表明雷公藤多苷配伍黃芪總皂苷后具有明顯的增效作用。

表2　黃芪總皂苷聯合雷公藤多苷對小鼠瓊脂肉芽腫的影響±s，n=10）

表2　黃芪總皂苷聯合雷公藤多苷對小鼠瓊脂肉芽腫的影響±s，n=10）

注：與黃芪總皂苷組比較，#P＜ 0.05

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3.3對小鼠醋酸扭體反應的影響

與對照組比較，雷公藤多苷組和配伍組在注射 0.6%冰醋酸水溶液后小鼠扭體次數均顯著性降低（P＜ 0.05），結果見表3。由實驗結果可見，黃芪總皂苷配伍雷公藤多苷后，具有顯著鎮痛作用，而該作用主要來源于雷公藤多苷。

表3　黃芪總皂苷聯合雷公藤多苷對小鼠扭體反應次數的影響（x±s，n=10）

3.4藥物對小鼠免疫器官的影響

與對照組比較，黃芪總皂苷組胸腺臟體指數顯著性增加（P＜ 0.05），表明黃芪總皂苷具有增強免疫作用；與對照組比較，雷公藤多苷組小鼠脾臟體指數顯著性降低（P＜ 0.05），表明雷公藤多苷有抑制免疫作用，而在配伍黃芪總皂苷后與對照組比較則無顯著性差異（P＞0.05），表明二者聯用后能提高免疫器官的功能。

表4　黃芪總皂苷聯合雷公藤多苷免疫器官重量臟體指數的影響（x±s，n=10）

4　討論

雷公藤制劑對風濕性疾病有很好的療效，應用廣泛，但雷公藤較強的毒性作用卻一直困擾醫藥工作者，如何降低雷公藤毒性甚至增強其療效漸成為學者們研究的焦點。雷公藤在臨床上多為單用，國內學者從中藥方劑配伍另辟蹊徑，或通過動物藥理實驗，或經臨床實踐研究了雷公藤與其他中藥配伍起減毒增效的作用機制及方法，為有毒中藥減毒增效研究打開了新的局面。中藥配伍的目的在于：一是相互配用而減輕或消除了毒性作用；二是發揮藥物間的協同作用而增進療效。本研究中，雷公藤多苷與黃芪總皂苷配伍能起到一定的增效作用。在中醫藥理論指導下，進行有效組分層次上的現代組方研究，既可提高受試藥的質量可控性，符合中藥現代化要求，又可兼顧中藥復方特色和優勢。若能在中藥配伍的基礎上，進行組分中藥復方制劑的研究，進一步開發高效低毒的治療類風濕關節炎藥物，將有著廣闊的市場前景和重要應用價值。

中醫學認為類風濕性關節炎發病主要內因是肝腎不足或勞累過度耗損正氣，致素體正氣虧虛，正氣既虛外邪易入侵，復感風寒濕，氣血痹阻不行，關節閉澀，或風、寒、濕、熱之邪留滯筋骨關節，久之損傷肝腎陰血，筋骨失養，故見關節腫痛、僵硬、屈伸不利、活動障礙、筋攣肉卷，即為痹癥［6］。“扶正祛邪”是中醫治病和組方用藥的重要思想，黃芪是著名的常用的補氣扶正中藥，黃芪不但具有顯著增強免疫調節功能，本身也具有一定的抗炎抗風濕作用。類風濕性關節炎具有虛實錯雜的臨床特點，選擇補瀉兼施的植物中藥有效組分配伍（雷公藤多昔與黃芪總皂苷），貫徹了扶正祛邪治療思想，是現代中醫藥在類風濕關節炎等研究領域中有益的探索。此外，黃芪還具有保護腎臟、保護心血管、保護胃黏膜，增強免疫、增強機體造血功能等作用，可以對抗雷公藤腎臟損害、心血管系統損害、造血系統損害、胃粘膜刺激等毒副作用。由此推測，中藥有效組分配伍是提高類風濕關節炎臨床療效的重要途徑，值得進一步深入研究。

［1］水光興，萬毅剛，蔣春明，等.雷公藤及其活性成分藥效學和藥理學研究的若干進展［J］.中國中藥雜志，2010，35（4）:515.

［2］郭雪紅.雷公藤多苷的藥理作用及臨床應用概述［J］.中成藥，2010，32（7）:1199.

［3］饒毅，魏惠珍，陳銀芳，等.中藥配伍應用于雷公藤減毒增效的研究進展［J］.中國中藥雜志，2008，33（14）:1658.

［4］王瑞輝，劉力，李暉.黃芪等中藥對雷公藤多甙抗炎療效影響的動物實驗研究［J］.陜西中醫學院學報，2004，27（5）:4.

［5］陳曉寧.黃芪總皂苷的藥理研究［J］.數理醫藥學雜志，2005，18（6）:602.

［6］陸柳丹，韋嵩.中醫治療類風濕性關節炎研究進展［J］.遼寧中醫藥大學學報，2013，15（10）:110.

（責任編輯：陳思敏）

Anti-inflammatory and analgesic effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium

LEI Xin-yu, HUANG Yi-ting, ZHU Cui-ling, YU Qian, SUN Jing-hua, WANG Zhong-hao, QIN Si, ZHOU Pan, XU Xian-xiang
(School of Biomedical Science, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian)

Objective: To evaluate anti-infl ammatory，analgesic and immune effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium. Method: The analgesic，anti-infl ammatory and immunity effects were investigated by dimethylbenzene-induced ear swell，agar granuloma and ethylic acid-induced writhing tests performed on mice. 15 mg· kg-1tripterygium wilfordii polyglycosidium combined with 150 mg·kg-1total saponins of Huangqi and their respective antiinflammatory，analgesic and immune effects were observed. Result: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium could effectively alleviate the acute inflammation reactivity，reduce writhing mice number，reduce agar granuloma weight and increase immune viscera weight of mice. Conclusion: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium have some synergistic anti-infl ammatory and analgesic effects.

Tripterygium wilfordii polyglycosidium； total saponins of Huangqi； anti-infl ammatory； analgesic； immunity

R 285.5

A

1674-926X（2015）06-010-03

華僑大學中央高校基本科研業務費“福建省杰出青年基金培育計劃”專項（JB-SJ1012）

華僑大學生物醫學學院，福建 泉州 362021

雷心雨（1994-），女，華僑大學生物醫學學院2012級藥學本科生 Email:454539866@qq.com

徐先祥（1978-），男，博士，助理研究員，主要從事中藥藥理學研究

Tel:0595-22692300Email:xuxianxiang@163.com 2015-04-20