從×線影像學觀測布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折模型的作用

王羿 何先游

摘要：目的從X線影像學的改變來觀察布依藥“鹿角壯骨煎液”對大鼠骨折模型修復的作用。方法 手術造成SD大鼠脛骨中下段骨折模型60只，隨機分成治療組30和對照組30，治療組以布依藥鹿角壯骨煎液灌胃，對照組給予等量0.9%生理鹽水灌胃。在造模后的第15、21、30、42d分別取兩組大鼠行骨折處X線攝片并評分。結果 治療組與對照組相比較，在造模第15天及以后治療組X線影像學與對照組有明顯差異（P<0.05）。結論布依藥鹿角壯骨煎液可促進骨痂生長，提高影像學評分，對骨折愈合有修復作用。

關鍵詞：骨折；布依藥；大鼠骨折模型；影像學

中圖分類號：R285.5

文獻標志碼：A

文章編號：1007 - 2349（ 2015） 02 - 0059 - 02骨折是機械性超負荷，致使骨結構遭到破壞，骨失去支撐及杠桿作用的一種表現。很多骨折都源于高能量外傷，導致骨小連及延緩愈合發(fā)生率較高，是臨床需要解決的問題。祖國醫(yī)學和民族醫(yī)藥在骨折治療上有悠久的歷史，能夠使骨骼延緩愈合和不愈合重新獲得較迅速的愈合[1]。本課題組在臨床觀察中發(fā)現“鹿角壯骨煎液”在骨折的治療中療效確切，本文從動態(tài)觀察骨折愈合過程中骨折端的影像學變化來驗證“鹿角牝骨煎液”對骨折大鼠模型的修復作用，從而為臨床治療提供理論依據和實驗支撐。1 材料和方法1.1 動物 本課題實驗動物是清潔級健康Sprague Dawley（ SD）雄性大鼠60只，6月齡，體重280～320g，重慶滕鑫比爾實驗動物銷售有限公司提供，動物合格證號：SCXK（渝）2012- 0004、1.2藥物及制備本實驗布依藥鹿角壯骨煎液由黔南州中醫(yī)院藥劑科提供。將告獨六、蘿卜難、印乃岜、龍自然、戈難鞏、專雄等（各100g）放入鋁鍋中，加入6000ml，蒸餾水，常溫下浸泡24h后加熱沸騰，紗布過濾后得到3000ml.含生藥量為lg/mL的濃縮液，裝瓶冷藏備用.1.3主要試劑與儀器1.3.1 主要試劑，蘇木素伊紅染色試劑盒（HE試劑盒），產品編號：AR1180，在博士德生物工程有限公州購買1.3.2主要儀器，C型臂電視X光機（德國西門子公司），Im-agePro Plus5.0圖像分析軟件（美國Media Cyberneties公ngk ），數碼照像機（E-500型，日本Olymupus公司）。1.4方法1.4.1模型建立[2]適應性喂養(yǎng)3d后進行造模，方法如下：以10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔麻醉大鼠，麻醉顯效后將大鼠以仰臥位固定于操作臺上，左下肢剝毛、消毒，無菌操作下取內側縱行切口約1.5cm，逐層切開皮膚及皮下，顯露脛骨，在脛骨中下1/3交界處，用手術刀片切開3 mm寬的骨膜，顯露骨膜下骨質，以骨刀造成橫斷骨折，左膝關節(jié)髕韌帶處剝毛、消毒，無菌操作下取前側縱行切口約1.5 cm，分開髕韌帶于止點處進針，順行穿直徑為1.1mm克氏針，通過斷端并至脛骨遠端有阻力后回抽，折彎、剪斷埋于軟骨面下，然后逐層縫合。術后進行3d抗感染治療，肌肉注射青霉素8萬U/100 g，1次/d。1.4.2動物分組及給藥方法造模成功后的大鼠隨機分為治療組30，對照組30分籠喂養(yǎng)，在室溫22～ 270C、相對濕度80%的清潔環(huán)境中飼養(yǎng)，使用標準飼料，自由攝食和攝水。治療組給予布依藥鹿角壯骨煎液按劑量5g/（kg·d）灌胃，根據大鼠對人等效劑量的2倍[3]，每日早晚2次。對照組給予等量0. 9%生理鹽水灌胃，方法同治療組。所有實驗動物均在造模后12h給藥。1.4.3影像學觀察2組大鼠均在術后第7、15、21、30、42d隨機選取大鼠行腹腔麻醉后進行X線攝片，觀察骨痂生長及骨折愈合情況并進行評分。評分標準[4]：1分，骨折斷端邊緣趨向性模糊，骨膜輕度反應，無骨痂可見；2分，斷端邊緣模糊，骨膜反應淺淡，骨痂少量，密度較淡，邊緣不整齊；3分，斷端邊緣仍可見，但接近消失，骨膜反應較深，骨痂量增多，但未填滿缺損，密度增深，邊緣較清；4分，斷端邊緣完全消失，骨膜反應密度近似骨影，骨痂填滿缺損，與骨皮質密度相同并相互連接。2結果2.1 布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折后X線影像學的作用 在造模的第15、21、30、42 d分別隨機取2組大鼠予以X線攝片觀察？在第15d時，治療組骨折斷端周同大量軟組織增高影；而對照組骨折線較清晰；第21天時，治療組骨折斷端骨密度有所增加，骨膜反應漸深，生成較多骨痂，斷端邊緣仍可見，對照組僅有少量骨痂生長。第30天時，治療組大量骨痂已包繞骨折斷端，骨折線模糊，對照組出現較多骨痂。第42天時，治療組骨折線基本消失，骨小梁力學結構漸為合理，對照組骨折處大量骨痂生長，骨折線可見.2.2布依藥鹿角壯骨煎液對大鼠骨折后X線影像評分影響 根據造模后第15、21、30、42d大鼠骨折處X線影像，對其骨折愈合及骨痂生成情況進行評分（表1）。表l示，在第15d、21d、30d、42d差異均顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大，但在3周后差異更加明顯，治療組較對照組提高影像學評分更為顯著。3討論

貴州省是布依族、苗族群居地，民族醫(yī)藥是特色，老百姓對于民族醫(yī)藥信任程度高，得到廣大群眾的歡迎。布依藥“鹿角壯骨煎液”是貴州省黔南州中醫(yī)院名老中醫(yī)經數十年悉心研究和改進布依族民間藥方（院內制劑），采用告獨六（鹿角霜）、蘿卜難（續(xù)斷）、印乃岜（骨碎補）、龍自然（自然銅）、戈難鞏（黨參）、專雄（川芎）等10多種布依藥為原料加工而成，補益肝腎、強筋壯骨的功效確切。我們在大量臨床治療中并結合“經皮微創(chuàng)內同定系統(tǒng)（LISS鋼板）配合布依藥鹿角壯骨膠囊治療脛骨中下段骨折的臨床療效”課題進行研究，運用手術內固定治療骨折的同時，配合口服布依藥“鹿角壯骨煎液”治療，可縮短骨折愈合時間，促進骨折愈合。

通過本課題觀察，在第15、21、30、42 d2組大鼠X線影像評分結果差異顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大。根據結果分析，布依藥鹿角壯骨煎液促進骨折愈合，可能是通過促進成骨細胞的增值與分化而促進成骨，使軟骨骨痂向骨性骨痂轉換，提高了骨的強度，從而加速了骨折愈合[5]臨床和實驗都已證明中醫(yī)藥（民族醫(yī)藥）在治療骨折方面具有獨特的優(yōu)勢和潛力，中醫(yī)藥（民族醫(yī)藥）已經成為廣泛采用的治療骨折的重要手段[6]。布依藥“鹿角壯骨煎液”已廣泛運用于臨床，在促進骨折愈合上療效確切，符合臨床用藥特點，無不良反應。本課題從動物實驗和影像學觀測的角度進一步驗證了布依藥“鹿角壯骨煎液”的療效，為臨床進一步推廣該藥提供了理論依據。參考文獻：[1]鄭培永，陳繹志，趙光復，中藥促進骨折愈合的實驗研究進展[M].中醫(yī)止骨，1999，11 （1）：53.[2]沈霖，林燕萍，王擁軍.骨傷科實驗研究[M].北京：北京科學技術出版社，2005：384.[3]孫永生，溫建民，吳林生，等.骨折三期治療對骨生長因子FCF-2表達影響的實驗研究[J].中國骨傷，2004，17（4）：222-226.[4]上海市骨傷科研究所傷科論文匯編[M].第3輯.上海：上海科技出版社，1964，226.[5]潘貴超，王輝奇，張治國.補腎健脾活血方對大鼠骨質疏松骨折愈合的作用及其機理探討[J].中日中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，2011，17（2）：156-157.[6]崔永鋒，王琦，張毅，等.杜仲對兔骨折愈合影響的x線影像學研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：163-165（收稿日期：2014-11-07）