中醫陰黃證動物模型研究現狀及展望

佟欣　佟子林　趙法政

[摘要] 中醫證候動物模型的制備水平是制約中藥藥性合理評價的關鍵所在，其直接影響藥理活性結論的有效性。近年來，評價動物疾病模型的指標，僅停留在對靜態而單一的生化指標的分析，這樣的動物疾病模型，無法反映疾病對機體的整體影響和疾病發生、轉歸的動態過程，更不能客觀地評價藥效和藥效物質基礎。本文在對中醫陰黃證形成本質考察的基礎上，從歷年實驗研究和臨床實踐角度對已有中醫陰黃證動物模型造模方法進行總結，為完善中醫陰黃證動物模型造模方法提供研究思路。

[關鍵詞] 中醫陰黃證；動物疾病模型；藥效

[中圖分類號] R256.41 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2015）05（c）-0043-03

[Abstract] The level of TCM syndrome model preparation is the crux for rational evaluation of TCM drug's quality， which directly influences the reliability of the conclusion derived from pharmacological researches. The presented characteristics of the established model are always neglected because the evaluating parameters are often selected from one or more enzymologic indexes associated with hepatocyte injury， and the detecting methods are mainly adopted colorimetric methods， whose accuracy is restrained by the sensitivity and detectability of the instruments used. The evaluation indexes for these animal models were local pathologic injury， static level of index， micro-changes without presentative characteristics， etc.， which were greatly away from the TCM syndromes in humans with integral， dynamic， and could not evaluate the effectiveness and pharmacodynamic material basis objectively. This research could be helpful for screening out essential parts of Yin-huang Syndrome and developing more suitable remedies for clinical application and offer a new theoretical method for the replication of syndrome animal model.

[Key words] TCM jaundice of Yin-huang； Animal model； Pesticide effect

陰黃作為黃疸的一個證型，隋代巢元方在《諸病源候論》中最先提出“陰黃”這一概念。書中根據黃疸的臨床表現不同進行分類。該書在對陰黃證癥狀進行詳細描述的同時也闡述了其發病機制。陰黃證臨床主要表現為身目俱黃，頭痛而不發熱。疾病產生主要是由體內陰氣盛而格陽于外，又外感熱毒所致。陰黃概念的提出要追溯到宋代政和中敕編《圣濟總錄》。宋代韓祗和《傷寒微旨論》中首次提出陰黃的病名。通過對臨床治療病案的分析與總結首次討論了陰黃的辨證施治。至元代羅天益《衛生寶鑒》、明張介賓《景岳全書》、清代醫家顧松園、葉桂、沈金鰲在對前人治療案例進行總結的基礎上，詳盡地分析陰黃證的病因病機，并將辨證論治系統化，提出了治療的原則，對現代臨床上陰黃證的治療起到了重要的借鑒作用[1]。

1 歷代醫家對陰黃證病因病機的論述

1.1 脾虛寒濕學說

漢代醫家張仲景在其所著《傷寒論·辨陽明病脈證并治》中論述：“傷寒發汗已，身目為黃，所以然者，以寒濕在里不解故也”。指出陰黃癥是由于寒濕在里不解的緣故。《臨證指南醫案·蔣玉式按》中論述：“陰黃之作，濕從寒化，脾陽不能化濕，膽液為濁所阻，漬于脾，浸淫肌肉，溢于皮膚，色如熏黃。陰主晦，治在脾”。《類證治裁·黃疸》論述：“陰黃系脾臟寒濕不運，與膽液浸淫，外漬肌肉，則發而為黃”。指出陰黃發病是由于寒濕困脾，治療的重點應是健脾運濕。

1.2 脾腎虧損學說

張景岳在《景岳全書》中論述：“陰黃之病何以然也，蓋必以七情傷臟，或勞倦傷形，因致中氣大傷，脾不化血，故脾土之色，自見于外”。指出陰黃的發病是由于情志不遂，脾虛導致氣血生化無源，黃疸之色即脾土之色。張仲景在《金匱要略》中將由于脾腎虧虛所致的黃疸定義為黑疸。指出“色黑為勞”，“額上黑，微汗出，手足中熱，薄暮即發，膀胱急，小便自利。……腰如水狀不治”。宋代竇材在《扁鵲心書》中論述：“黑疸由于脾腎兩經，縱酒貪色則傷腎，寒飲則傷脾”。明代李中梓、清代顧松園提出陰黃脾腎虛寒說，如《醫宗必讀·黃疸》篇云：“亦有脾腎虛寒，脈沉而細，身冷自汗，瀉利溺白，此名陰黃”。從歷代醫家的論述中不難看出，陰黃的發病均涉及到脾腎兩臟氣血虧虛，屬于黃疸重癥，預后不佳。

2 近代醫家對陰黃病因病機的認識

潘雪飛等[2]認為陰黃的病位在肝，肝膽血瘀是主要的病機，治黃重在養肝化癖。葉放[3]認為陰黃是由于脾腎虛寒，寒凝血瘀，導致脈絡不利，郁而發黃。郭華麗[4]指出陰黃的發病主要原因是脾臟受損，從而導致寒濕不能運化，脾為后天之本，運化無源累及先天之本，腎陽的溫煦功能受損，不能有效的助肝陽運化寒濕，肝失疏泄，寒凝血瘀，膽汁淤積，逆于肌膚而發黃。黃疸日久，遷延不愈，濕熱之毒蘊于體內，瘀血阻滯，則兩目黃而發黑，是陰黃血癖證表現[5]。潘學柱[6]指出：陰黃的主要病位在肝，肝陽虛損，寒凝肝脈是主要的病因病機，治療應當立足于振奮肝陽，促進膽汁的疏泄。潘雪飛等[7]認為肝氣虛是陰黃發病的主要原因。肝主疏泄，使人體氣血得以布達周身，肝氣受損，肝陽不得伸展，膽汁失于溫煦，淤積外溢，而導致肌膚發黃。肝氣虛損，不耐疲勞，而出現四肢倦怠乏力。陽虛陰盛，產生兩脅脹滿，筋脈拘急，四肢厥冷的癥狀。陰黃證的發病與脾胃肝膽密切相關。肝體陰而用陽，脾胃虛寒導致濕邪內停，脾土侮木影響及肝，導致肝體虛損，膽汁疏泄不利，郁久發黃。

韓秀珍等[8]在臨床治療中發現，陰黃證多是由于在肝病的治療中久服寒涼、瀉下藥物引發，或是由于采用西醫的方法辨病不辨證所致，或是由其他疾病日久誤治發展而來。如臨床治療久治不愈的各種胃炎、胃潰瘍、胃腸炎、膽囊炎等疾病。唐玉廷[9]認為素體陽虛，脾陽不足是發病的內在原因。關幼波[10]認為：陰黃的發病主要有三種情況：①患者正氣尚可，由于感受寒濕之邪，寒濕困脾所致，屬于陰黃輕癥；②由于患者脾陽素虛，濕從寒化，困阻中焦；③由于誤治、施治，陽黃日久轉為陰黃。吳定文[11]亦認為，素體陽虛是陰黃發病的根本，感受寒濕外邪是發病的重要條件，導致濕從寒化，膽汁排泄不利，浸淫肌膚發為陰黃。

3 陰黃證動物模型的復制研究

近年來復制的中醫證候動物模型多是采用化學的方法，使動物的某些組織或器官產生功能損害或改變，從而模擬人體的疾病或臨床證候。張赤志等[12]采取實驗大鼠大黃灌胃18 d，于第19天給予α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復制陰黃證動物模型，并用茵陳術附湯以方測證。實驗結果發現陰黃模型組的谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、總膽紅素均較正常對照組明顯增高（P < 0.05），經茵陳附術湯治療后，谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、總膽紅素均較陰黃模型組明顯下降（P < 0.05），結果表明采用大黃與α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復制的陰黃證動物模型具備脾胃虛寒、免疫力低下的特點，并且持續高膽紅素血癥。盧家兵等[13]采用大黃聯合α-萘異硫氰酸酯（ANIT）的方法復制陰黃證動物模型，實驗研究表明陰黃證模型大鼠外周血淋巴細胞存在凋亡情況，陰黃證免疫功能低下可能與免疫細胞凋亡有關。曲長江等[14]按照傳統中醫病因病機的理論，建立病證結合的陰黃證動物模型，并用中藥復方茵陳術附湯以方測證，對陰黃證動物模型進行病因病機、證候、臨床生化指標的觀察和評價。佟欣等[15]從陰黃形成的病因病機入手，復制病癥結合的陰黃證實驗動物模型。采用大黃、乙醇、α-異硫氰酸萘酯三因素復合誘導，造成陰黃證實驗動物模型，并用治療陰黃證的經典方劑茵陳四逆湯治療進行反證，證明該模型成立。實驗表明，陰黃證大鼠出現活動減少、倦臥、扎堆、進食減少、條狀稀便等癥狀與臨床陰黃證患者相似[16]。同時其肝臟病理學及肝功能等客觀化指標改變與陰黃證的臨床研究一致[17]。

4 總結與展望

盡管學者們對中醫陰黃證動物模型的復制做了大量的工作，但由于模型復制的思路和方法存在問題，因此不能有效地反映臨床上陰黃證的表現特征。中醫證候動物模型是人類研究、開發和利用中醫藥治療疾病的重要工具，建立中醫證候動物模型的標準與方法體現著某種生命觀、疾病觀和方法論，是實驗醫學的基礎。中醫藥學的研究應當突破引經據典、臨床總結的固有模式，與實驗科學相結合，探尋療效物質基礎的證據，倫理學也不允許直接通過人體進行實驗研究，故動物模型成為中醫藥基礎與臨床研究向現代化發展的橋梁。證候是中醫學診斷治療的基礎與依據，證候的研究是中醫理論和臨床研究的核心，制備符合中醫證候特點的動物模型是實現中醫藥現代化的關鍵。評價動物疾病模型的指標，僅停留在對靜態而單一的生化指標的分析，這樣的動物疾病模型，無法反映疾病對機體的整體影響和疾病發生、轉歸的動態過程，更不能客觀地評價藥效和藥效物質基礎。此外，在對模型進行評價時選取的生化指標標準不統一，為多種疾病的共有指標，缺乏特異性，檢測靈敏度低，對致病程度低的模型，得不到陽性結果，難以評價模型的優劣。因此，證候動物模型的造模方法、評價指標、可重復性等諸多問題，成為制約中醫藥發展的瓶頸。

中醫證候動物模型的復制應該從疾病產生的原因、臨床發病的癥狀和有效經典方劑治療的角度思考[18]。從中醫陰黃證的病因可以對造模因素進行選取，如脾臟陽虛、終日縱酒、飲食不節。臨床發病的癥狀即指四診信息，成功的動物模型應有畏寒、便溏的脾臟陽虛癥狀和由于膽汁淤積而表現出的身黃、目黃、小便黃。能夠對模型體表特征所反映的病理機制進行概括，如脾臟寒濕不運，與膽液浸淫，外漬肌肉，則發而為黃。臨床經典方劑的選取是根據中醫理論體系中“有是證，用是方”演繹，“是方”必然對應著“是證”，依據“以方驗證“的共識，若是“是方”對“某證（對于動物實驗而言就是某種藥理動物模型）”有效，則“某證”就是“是方”對應的是證。同時，應充分利用基因組學、蛋白組學、代謝組學等先進的科學技術，作為中醫證候動物模型的評價方法，從整體觀出發，選取能夠客觀評價動物疾病模型的有效動態指標。

[參考文獻]

[1] 姚惠萍，劉慶幫.略論陰黃理論的形成[J].南京中醫藥大學學報，2003，19（1）：11-13.

[2] 潘雪飛，張長法，邱蔚蔚，等.養肝化癖退黃法對陰黃患者HA、LN的影響[J].南京中醫藥大學學報，1997，3（4）：209-210.