大鼠腦創(chuàng)傷后MKP-1表達上調、NO的生成減少

張 雪，王 琦，劉麗君，王弘凱，冉建華*

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研究論文

大鼠腦創(chuàng)傷后MKP-1表達上調、NO的生成減少

張 雪1,2，王 琦1,2，劉麗君1,2，王弘凱1,2，冉建華1,2*

(重慶醫(yī)科大學 1.神經科學研究中心； 2.解剖學教研室, 重慶 400016)

目的研究創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)周圍皮質中絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表達變化，探討其對一氧化氮(NO)含量的影響及機制。方法用自由落體法制作大鼠TBI模型；酶化學法檢測周圍皮質中NO的含量；免疫組織化學和免疫印跡等方法檢測腦皮質MKP-1、eNOS及MAPKs的表達。結果對照組腦皮質NO水平為34.4±3.2 μmol/L，TBI損傷后3、6、24及72 h均顯著下降，分別為20.8±2.5、23.9±3.8、24.0±1.6及26.8±2.6 μmol/L (均P<0.05)。腦損傷周圍皮質中胞質和突起呈棕黃色的MKP-1免疫陽性細胞數(shù)量增加。腦損傷后3和6 h MKP-1蛋白表達水平明顯增加(P<0.05)，隨后降低至正常水平；eNOS蛋白表達水平在腦損傷后3和6h則明顯降低(均P<0.05)，至24 h接近正常水平；pERK和p-P38 MAPK蛋白表達水平在腦損傷后3和6 h也分別下降(均P<0.05)。結論大鼠TBI后，皮質中 MKP-1表達上調可能負向調控MAPK信號而降低eNOS水平，引起NO生成減少造成腦血流灌注不足。

大鼠；創(chuàng)傷性腦損傷；絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1；一氧化氮

創(chuàng)傷性腦損傷(traumatic brain injury，TBI)是意外傷害導致青壯年死亡或殘疾的首要因素，包括機械性原發(fā)損傷和繼發(fā)性損傷兩個病理過程[1]。繼發(fā)性損傷以創(chuàng)傷周圍腦血流下降為早期病理改變，是引發(fā)氧自由基損傷、鈣超載等后續(xù)病理過程的關鍵因素；腦創(chuàng)傷早期腦血流量低于每分鐘18 mL/100 g(不可逆缺血性腦損傷的臨界值)提示患者預后不良甚至死亡[2-6]。內皮型一氧化氮合酶(eNOS)催化精氨酸(L-arginine)產生的NO是引起血管擴張、調節(jié)腦血流的重要分子[3]。創(chuàng)傷性腦損傷后，患者血漿和腦組織中NO水平持續(xù)下降，并與創(chuàng)傷周圍eNOS表達下調和腦血流量的下降密切相關；吸入NO可提高患者腦血流灌注量，減輕繼發(fā)性損傷的嚴重程度[2]，但其調控機制尚不清楚。絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinases phosphatase-1，MKP-1)是MAPK信號通路的特異性抑制劑，通過抑制NOS的表達在缺血再灌注腦損傷、神經炎性反應中發(fā)揮病理作用[7-9]。……