卡式法在輸血前不規則抗體篩查中的應用價值分析

唐毓勝 周正東 唐任光

卡式法在輸血前不規則抗體篩查中的應用價值分析

唐毓勝 周正東 唐任光

目的 探討卡式法在輸血前不規則抗體篩查中的應用價值。方法 選取需輸血的3823例患者采用卡式法進行不規則抗體篩查，再將陽性血清使用譜細胞鑒定其抗體類型。結果 3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，陽性患者均存在妊娠史或輸血史。結論 卡式法在輸血前篩查不規則抗體具有重復性強、標本用量較少、標準化程度較高、結果可靠明確、保存時間長的特點。輸血前對患者進行不規則抗體篩查，同時鑒定抗體的特異性，再選擇輸注不含有相應抗原的血液，可避免發生溶血性反應，對保證輸血安全具有重要的意義。

卡式法；不規則抗體；篩查；輸血安全

不規則抗體是指除抗-A、抗-B外的抗體[1]。不規則抗體可引起遲發性溶血性輸血及其交叉配血困難反應，少數還可引起急性溶血性輸血放樣，導致無尿、少尿、腎衰竭和彌散性血管內凝血，嚴重時可導致死亡[2]。不規則抗體是引起溶血性輸血反應和遲發型免疫反應的主要原因。近年來，國外在輸血前普遍使用卡式法篩查不規則抗體。本研究選取需輸血的3823例患者，采用卡式法進行不規則抗體篩查，旨在探討卡式法在輸血前不規則抗體篩查中的應用價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月～2014年7月廣西百色市中心血站需輸血的3823例患者，其中男2376例，女1447例，年齡2～75歲，平均年齡（42.1±5.2）歲。

1.2 儀器與試劑 微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡；安迪博特專用標本孵育器和離心機；上海血液生物制品篩選紅細胞、譜細胞。

1.3 方法 輸血前抽取患者2 mL靜脈血，在EDTA抗凝室溫下1900 r/min離心10 min，分離血漿。往微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三號孔各加入50 μL 0.8%的篩選細胞，同時向微孔柱內加入25 μL離心好的血漿，置于孵育器中孵育10 min，后在離心機下離心10 min，紅細胞未與相應的抗體發生凝集反應，紅細胞可通過凝膠至微柱底部，為陰性；紅細胞與相應的抗體發生凝集反應，紅細胞不可通過凝膠，擋在微柱的上端，為陽性。判定結果后，再將陽性血清使用譜細胞鑒定其抗體類型。

2 結果

3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，經使用譜細胞鑒定其抗體類型，其中抗-D 1例，抗-E 4例，抗-C 2例，抗-Ce 1例，抗-Ec 3例，抗-Lea 1例，抗-Leb 1例。其中男8例，女5例。經詢問了解：8例男性患者均有輸血史，2例女性患者只存在妊娠史，3例女性患者既有輸血史又有妊娠史。見表1。

表1 不規則抗體篩查鑒定結果（n）

3 討論

隨著輸血檢驗技術的不斷發展，較少發生因血型不合而導致的溶血反應，而目前引起溶血反應主要由于血型的不規則抗體[3]。不規則抗體是引起溶血性輸血反應和遲發型免疫反應的主要原因。但因不規則抗體的檢出率較低，在臨床上易被忽視，尤其是多次輸血的患者、孕婦、嚴重消耗性疾病患者、腫瘤患者、自身免疫性疾病患者為不規則抗體的高危攜帶者[4]，為保證輸血的安全和有效，應作為重點篩查對象。不規則抗體的質量、數量與抗原、T細胞、B細胞及其附屬細胞等密切相關[5]。當抗原刺激機體后，B細胞增殖分化為漿細胞或記憶細胞，記憶細胞在其細胞膜表達相應的抗原，當再次受到相同抗原的刺激后，可發生免疫反應。輸血時，特別是多次輸血，紅細胞表面的少見抗原可刺激機體產生相應的抗體，當再次輸血時，組織相容性復合體MHCI及

MHCII分子調節T細胞的反應，從而調控機體的抗體反應，且在細胞因子、B細胞免疫耐受、神經內分泌作用等作用下，多次輸血的患者、骨髓瘤、類風濕性關節炎、孕婦、系統性紅斑狼瘡、肝硬化、嚴重消耗性疾病患者、腫瘤患者、肺結核、自身免疫性疾病等患者血液中IgM、IgG抗體會增加[6]。

傳統不規則抗體篩查的方法為使用間接抗人球蛋白試驗篩查，可解決部分抗體的劑量效應，但該方法耗時較長，不利于常規檢測[7]。基于傳統的間接抗人球蛋白試驗，卡式法可避免試管液體介質Coombs試驗需多次清洗費時、繁瑣的缺點。卡式法是利用微柱凝膠免疫抗體抗原的特異性反應和微孔過濾作用，微柱孔隙只允許通過1個紅細胞，紅細胞若未遇見相應的抗體或被致敏，則離心后可被離心至凝膠底部，說明被篩查的血清中不存在相應的抗體和致敏紅細胞[8]。若被篩查的血清存在特異性抗體，如IgM抗體，可與紅細胞結合直接形成可見的復合物，若是IgG抗體，該復合物可與抗球蛋白結合形成可見的復合物，復合物被擋在凝膠的上部，故篩查不規則抗體的特點有：（1）具有重復性強、標本用量較少、標準化程度較高、結果可靠明確，保存時間長；（2）可克服傳統抗人球蛋白試驗的費時、煩瑣的缺點，不需洗滌，快捷簡便；（3）標本使用量較少，減少操作過程帶來的污染；（4）可攝像拷貝，提供永久性的記錄。

本研究結果顯示，3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，與報道的0.3%～2%的相符，但陽性患者一旦宿主具有相應抗原的紅細胞，與體內的抗體發生抗原抗體反應，導致溶血性輸血反應，嚴重時可威脅患者的生命安全。可運用于在醫院輸血科在不規則抗體篩查與鑒定、交叉配血、輸血反應、溶血性貧血等血清學檢驗中，值得在臨床上推廣使用。綜上所述，輸血前對患者進行不規則抗體篩查，同時鑒定抗體的特異性，再選擇輸注不含有相應抗原的血液，可避免發生溶血性反應，對保證輸血安全具有重要的意義。

[1] 曹榮袆，劉鳳華，于洪敏.微柱凝膠法檢測不規則抗體的臨床應用[J].臨床輸血與檢驗，2010，12(2):149-151.

[2] 黃麗雅，孫愛農，陳勇高，等．中山地區萬例患者不規則抗體微柱凝膠篩查的研究[J]．檢驗醫學與臨床，2009，16(6):1319-1321．

[3] 石興景.臨床輸血現狀分析[J].中國社區醫師（醫學專業），2011，13（26）：331-332.

[4] 張晨光，張倩倩，龐桂芝，等.血型不規則抗體檢測的方法學評價[J].檢驗醫學，2010，25（12）：929-933.

[5] 樊鳳艷，王洪波，魏少平，等.不規則抗體導致ABO正反定型不符處理探討[J].檢驗醫學，2012，27（10）：822-824.

[6] 李燕瓊.2360例有妊娠史女性血清中不規則抗體的調查分析[J].中國煤炭工業醫學雜志，2010，13（1）：68.

[7] 毛娟，吳大洲，王滿妮，等.凝聚胺漏檢抗Lea致溶血性輸血反應一例[J].中國輸血雜志，2013，26（2）：178-179.

[8] 王玲，劉毅，吳敏慧.抗-Jka免疫性抗體致速發性溶血性輸血反應探討[J].臨床輸血與檢驗，2012，14(2):168-170.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.25.044

廣西 533000 廣西百色市中心血站 （唐毓勝 周正東 唐任光）