DC聯合CIK細胞治療對中晚期肝癌患者免疫功能及生活質量的影響

譚 斌 朱 丹 張長法 潘雪飛

DC聯合CIK細胞治療對中晚期肝癌患者免疫功能及生活質量的影響

譚 斌 朱 丹 張長法 潘雪飛

目的 分析DC聯合CIK細胞治療對中晚期肝癌患者免疫功能及生活質量的影響。方法 回顧性分析50例中晚期肝癌患者的臨床資料，并采用流式細胞儀檢測患者治療前后免疫功能變化和生活質量情況。結果 50例患者治療后，T輔助細胞、總T細胞、細胞毒T細胞、Th/Ts比值、調節T細胞、自然殺傷細胞以及NK-T細胞均比治療前顯著提高，治療前后比較差異有統計學意義（P＜0.05）；治療前卡氏評分平均為（75.4±10.2）分，而治療后平均評分為（84.5±11.34）分，2組比較差異有統計學意義（P＜0.05），無嚴重不良反應。結論 DC聯合CIK細胞治療中晚期肝癌患者，不僅能夠有效提高患者免疫功能，改善患者生活質量，而且治療安全性及可行性高，值得臨床推廣使用。

中晚期肝癌；CIK細胞治療；免疫功能；生活質量

多數中晚期肝癌患者由于存在先天免疫功能缺陷或后天失調，進而導致患者機體免疫功能下降，對外來致病因子抵御力不足，最終導致細胞進一步增長，嚴重影響患者生命健康[1]。在中晚期肝癌患者治療中采用具有強大腫瘤抗原遞呈能力的DC細胞和高效殺傷活性的CIN細胞治療能夠有效提高患者免疫功能，達到抗腫瘤的效果[2]。本研究為探討DC聯合CIK細胞治療對中晚期肝癌患者免疫功能及生活質量的影響，選取50例中晚期肝癌患者臨床資料進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月～2014年8月來中國人民解放軍第454醫院肝病科就診的50例中晚期肝癌患者作為研究對象，其中男36例，女14例，年齡20～85歲，平均年齡為（60.4±4.5）歲。對患者按照國際抗癌聯盟腫瘤分期標準進行分期，本組患者均為為Ⅲ期或Ⅳ期病例，同時所有患者卡氏評分均在60分以上，預計生存期在3個月以上，沒有嚴重心、肝、腎功能損害。患者治療前均通過醫院倫理委員會批準，所有患者均簽署治療知情同意書。

1.2 方法 臨床對50例患者治療中，首先將經Ficoll-Hypaque分離的單個核細胞放在無血清AIMV培養液中進行培養，然后在第11～12天收集CIK細胞，離心，并采用生理鹽水洗滌3次后采用10%患者自身血漿的生理鹽水沖懸，經過靜脈回輸患者，CIK細胞回輸共3次，每次回輸CIK細胞數量達到1×1010個以上，回輸時間為DC回輸之間。而DC細胞在經過Ficoll-Hypaque分離的單個核細胞首先放在RPM1640的培養箱中進行孵育，然后再采用無血清AIMV培養液中進行培養，在8d后收集細胞，離心，并采用生理鹽水洗滌3次后采用10%患者自身血漿的生理鹽水沖懸，經過靜脈回輸給患者，回輸共3次，每次回輸間隔1d，每次回輸DC細胞數量達到1×106個以上。收獲細胞前，均取少量培養物進行細菌、真菌培養，病檢測支原體、衣原體及內毒素（標準：病原學檢測陰性，內毒素＜5EU）。

1.3 評價指標分析 觀察分析本組患者治療前后患者免疫功能變化情況、卡氏評分情況以及不良反應[3]。

1.4 統計學方法 對本研究所有數據均采用SPSS13.0統計學軟件進行統計分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗；組間獨立樣本均數以“x±s”表示，采用t檢驗。以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患者治療前后免疫功能分析 本組50例患者均實施DC聯合CIK細胞治療2個療程后，T輔助細胞（CD3+、CD4+）、總T細胞（CD3+）、細胞毒T細胞（CD3+CD8+）、Th/Ts比值（CD4+/CD8+）調節T細胞（CD4+CD25+）、自然殺傷細胞(NK）（CD3-CD16+CD56+）以及NK-T細胞（CD3+CD16+CD56+）均比治療前顯著提高，治療前后比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 50例患者治療前后免疫功能變化情況（x±s,n=50）

2.2 患者治療前后生活質量評分比較 本組 50例患者治療前卡氏評分平均為（75.4±10.2）分，而治療后平均評分為（84.5±11.34）分，2組比較差異有統計學意義（t=6.56,P＜0.05）。50例患者治療中有3例患者出現發熱現狀，有2例出現輕度皮疹，未經特殊處理自行消退，無嚴重不良反應。

3 討論

CIK細胞主要是由多種細胞因子誘導的非特異性殺傷細胞，其能夠有效實現對腫瘤細胞的抑制和殺傷，同時此細胞中還具有Y淋巴細胞強大的殺傷活性和NK細胞殺傷時的非主要組織相容性復合體的限制性，所以CIK細胞能夠有效運用于多種腫瘤細胞系中[4-5]。而DC作為體內功能最強大的抗原遞呈細胞，其在腫瘤患者治療中應用能夠有效將抗原特異性細胞毒T淋巴細胞反應，從而發揮其治療的作用[6-7]。而將CIK細胞和DC細胞聯合應用能夠進一步發揮協同抗腫瘤的效果[8]。本研究結果顯示，與治療前相比，治療后T輔助細胞、總T細胞、細胞毒T細胞、Th/Ts比值、調節T細胞、自然殺傷細胞以及NK-T細胞均顯著提高（P＜0.05）；治療前卡氏評分平均為（75.4±10.2）分，而治療后平均評分為（84.5±11.34）分，2組比較差異有統計學意義（P＜0.05），無嚴重不良反應，說明臨床對中晚期肝癌患者實施

DC聯合CIK細胞治療效果顯著，同時也能夠有效提高患者機體免疫功能，改善患者生活質量。

[1] 方慧云,程偉民,李曉玲.CIK細胞治療晚期大腸癌的臨床研究[J].實用癌癥雜志,2014(8)：1008-1009,1012.

[2] 楊萍,歐利芳,黃飛鴻.CIK聯合化療治療惡性腫瘤的護理[J].當代醫學,2012,18(26)：109-110.

[3] 徐建芬,錢素英,張順.CIK細胞治療中晚期惡性腫瘤的臨床研究[J].現代實用醫學,2013,25(10)：1169-1170.

Objective Analysis of DC combined with CIK cells for the effects on immune function in patients with liver cancer in advanced stage and quality of life. Methods Retrospective analysis Clinical data of 50 patients with advanced hepatocellular carcinoma and the use of flow cytometry to detect the changes of immune function and quality of life before and after treatment. Results This group of 50 patients after treatment, T helper cells, total T cells, cytotoxic T cell, Th/Ts ratio, regulatory T cells, natural killer cells and NK-T cells were all improved than before treatment, after treatment, the difference has statistical significance; Karnofsky performance status for an average of (75.4±10.2) points, and after treatment themean score of (84.5±11.34), between the two groups difference is statistically significant (P＜0.05), no serious adverse reaction. Conclusion In patients with advanced hepatocellular carcinoma DC cells combined with CIK treatment, not only can improve the immune function of patients, improve the quality of life of patients, but also the treatment of safety and high feasibility, is worthy of clinical use.

Advanced liver cancer; Treatment of CIK cells; Immunity; The quality of life

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.26.042

江蘇 210002 中國人民解放軍第454醫院肝病科 （譚斌 朱丹張長法 潘雪飛）