HMGB1 RNAi抑制TGF-β1誘導的A549細胞系EMT

蔡 琳，阮志燕,徐 軍

(1.廣東食品藥品職業學院 國際學院 健康管理教研室，廣東 廣州 510520；2.呼吸疾病國家重點實驗室 廣州醫學院 第一附屬醫院 呼吸內科 廣州呼吸疾病研究所，廣東 廣州 510120)

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HMGB1 RNAi抑制TGF-β1誘導的A549細胞系EMT

蔡 琳1*，阮志燕1,徐 軍2

(1.廣東食品藥品職業學院 國際學院 健康管理教研室，廣東 廣州 510520；2.呼吸疾病國家重點實驗室 廣州醫學院 第一附屬醫院 呼吸內科 廣州呼吸疾病研究所，廣東 廣州 510120)

目的探討HMGB1在肺泡上皮細胞間質轉分化中的作用。方法設計并合成針對HMGB1的小干擾RNA(siRNA)，體外培養Ⅱ型肺泡上皮細胞系細胞-A549細胞，將細胞分為4組：1)對照組，2)TGF-β1刺激組，3)RNAi組(TGF-β1+ HMGB1 siRNA)，4)RNAi陰性對照組(TGF-β1+ siRNA陰性對照)；倒置相差顯微鏡觀察細胞形態學；RT-PCR法檢測HMGB1和α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的mRNA表達；Western blot法檢測α-SMA和HMGB1蛋白表達。結果TGF-β1刺激組細胞HMGB1和α-SMA 的mRNA和蛋白表達均較對照組顯著增加(P<0.01)；RNAi組HMGB1、α-SMA mRNA和蛋白表達均較正常對照組顯著下降(P<0.01)。結論HMGB1可能參與了TGFβ1 誘導的肺泡上皮細胞轉分化。

RNA干擾；高遷移率族蛋白B1；α平滑肌肌動蛋白；上皮間質轉分化

肺纖維化是以肺實質炎癥和進行性肺間質纖維化為特征的疾病，其發病機制尚不明確。目前較多資料提示上皮細胞損傷后的修復失調是導致纖維化的重要環節，其中上皮細胞-間質轉分化 (epithelial

to mesenchymal transition, EMT)是肺間質纖維化關鍵的病理改變。

高遷移率族蛋白(high mobility group B1，HMGB1)是存在于真核細胞系內的非組蛋白染色體結合蛋白，對調節染色體功能具有重要作用,該分子在胞質和細胞外能調節免疫和炎性反應[1]。最近的研究發現HMGB1與組織纖維化有密切的關系[2- 3]。轉化生長因子β1(transforming growth factorβ1，TGFβ1)是促EMT作用最強的細胞因子。目前尚無TGFβ1誘導肺泡上皮細胞轉分化與HMGB1相互關系的報道。……