對環磷腺苷葡胺注射劑含量測定方法的探討

趙悅輝 周立云（佳木斯市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 佳木斯 154000）

對環磷腺苷葡胺注射劑含量測定方法的探討

趙悅輝 周立云
（佳木斯市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江 佳木斯 154000）

摘 要：本文主要對環磷腺苷葡胺注射劑中的有效成分含量進行了測定，因此，本文重點對環磷腺苷葡胺注射劑含量測定方法進行了探討分析，從而總結出以下相關結論，以供參考交流。

關鍵詞：環磷腺苷葡胺；注射劑；含量；測定方法

環磷腺昔注射劑是我國研發出的一種新型制劑，在國外并不任何相關產品以及標準體系。在環磷腺苷葡胺注射劑中，主要存在了兩種單一的化合物，一種是環磷腺昔，另一種則是葡甲胺，在目前環磷腺苷葡胺注射劑的制劑說明書中，生產廠家已經明確標識出了該類制劑中的主要成分是環磷腺苷葡胺，我國現行相關規范標準中已經對環磷腺苷葡胺含量有著明確的規定，普遍認為葡甲胺和環磷腺芬為同一類的化合物，同歸對目前含量測定方法進行研究分析之后，從而提出更加準確、高效的含量測量計算方法，充分保障測定結果的精確合理性。

1 檢驗目的

我們在對產品質量進行檢查分析過程中，發現以下幾點問題：第一，在對制藥企業進行調研時，觀察到各制藥企業普遍是將環磷腺苷和葡甲胺作為生產原材料，通過按照一定量的比例投入生產，其中，并沒有任何一家制藥企業將單獨的環磷腺苷葡胺作為原料。第二，目前我國尚未存在關于環磷腺苷葡胺的理化性質的研究文獻。因此，針對這一點問題，我們需要對現行環磷腺苷葡胺注射劑含量的測定方法進行考察，得出葡甲胺和環磷腺苷在色譜條件下產生的色譜行為，同時判斷出使用的含量計算方法是否準確。

2 儀器與試劑

Waters 2695液相色譜儀，配2487紫外檢測器與2414示差檢測器；Sartorius BP211D電子天平；Sartorius PB一21。環磷腺昔標準品來自中國生物制品檢定研究院，葡甲胺、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鉀、氨水、磷酸、構株酸、冰乙酸、氫氧化鈉、三乙胺、四丁基澳化按等來自市售分析純，乙睛、甲醇為市售色譜純，水為純化水。環磷腺昔葡胺注射液與注射用環磷腺昔均為市場抽驗獲得的上市藥品。

3 方法

3.1 色譜條件

本次環磷腺昔葡胺制劑抽驗涉及到的現行標準檢驗標準共29份，其中23份采用H PLC法，流動相種類共有10種視表。用一八烷基硅烷鍵介硅膠為填充劑采用紫外檢測器與示差檢測器串聯，檢測波長為257nm或259nm，柱溫30℃。

3.2 供試品溶液的配制

精密稱取出適量的環磷腺和葡甲胺，其中，環磷腺苷將作為對照品。通過加水之后，制成相應比例的溶液，用作定位。然后，分別稱取適量的環磷腺苷葡胺注射液，加水制成含有環磷腺苷成分的溶液，作為供試品溶液。

4 結果

在對環磷腺苷葡胺注射劑含量進行測定時，通常都會采用液相色譜法，我們在對檢測器色譜圖示差進行查看過程中發現，葡甲胺與環磷腺苷有著單獨的色譜峰。并且，在所有的流動相體系中，也并未出現過單獨的無環磷腺苷葡胺色譜峰，以下重點列舉了環磷腺苷葡胺色譜峰的流動相圖，如圖1、圖2、圖3所示。

5 討論

環磷腺苷屬于一種蛋白激酶致活劑，并且具有易用于水的物理性質，我國相關醫藥學家在對環磷腺苷葡胺注射液進行深入分析之后，重點對其溶解性問題進行了改善。并在后期的臨床應用過程中將環磷腺苷葡胺上市，其中主要是將環磷腺苷當做對照品，同時對環磷腺苷葡胺注射劑中的環磷腺苷葡胺含量進行準確的計算，具體表現在以下幾個方面：

（1）由于環磷腺苷易于在水中微溶，但在加入少量的葡甲胺之后，對溶解性問題進行了有效的抑制，使其理化性質產生了明顯的變化，因此使得相關研究人員誤認為生成了新的化合物。而葡甲胺屬于一種增溶劑，可以加大環磷腺苷的溶解濃度，這是因為當葡甲胺浸泡在水溶液中時，將會與環磷腺苷迅速結合在一起，從而形成復鹽。但是，以往內這兩者的結合較為松散，很難形成穩定性較高的化合物，因此無法獲取的高純度的環磷腺苷和葡甲胺反應固體成品。

（2）在反向的色譜條件下，葡甲胺并未產生任何紫外信號，也沒有保留反相色譜柱。所以，在對液相色譜方法學進行建立時，若是將十八烷基鍵合硅膠柱當做主要的分析柱，紫外檢測器一般無法采集到紫外檢測器環磷腺苷葡胺注射劑中有關葡甲胺的信息。這就導致很多實驗研究人員認為制劑中的環磷腺苷峰就是環磷腺苷葡胺峰。并將現行的環磷腺苷作為對照品，同時計算出環磷腺苷葡胺含量。

從上面的檢測結果中我們可以看出，當前很多含量測量方法是將環磷腺苷作為對照品，而采用環磷腺苷葡胺含量的計算方法并不合理，需要分別對環磷腺苷和葡甲胺進行計算。

參考文獻

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