CA125、HE4和ATM蛋白聯合檢測對卵巢癌的診斷價值

樊 衛，祁金友，韓 笑

（淮安市腫瘤醫院，江蘇223200）

CA125、HE4和ATM蛋白聯合檢測對卵巢癌的診斷價值

樊 衛，祁金友，韓 笑

（淮安市腫瘤醫院，江蘇223200）

目的 探討人癌抗原125（CA125）、人類附睪蛋白4（HE4）和ATM蛋白聯合檢測對卵巢癌的診斷價值。方法 選取該院2013年6月至2015年1月病理確診的卵巢癌患者20例（卵巢癌患者組）及健康體檢者20例（健康對照組），比較CA125、HE4和ATM蛋白陽性率、靈敏度、特異性和受試者工作特征曲線下面積（AUC）。結果 卵巢癌患者組血清CA125、HE4水平明顯高于健康對照組，但卵巢癌患者組CA125檢測陽性率[75.00%（15/20）]與HE4檢測陽性率[80.0%（16/20）]比較，差異無統計學意義（P=0.356）；卵巢癌患者癌變組織ATM蛋白表達陽性率[60.00%（12/20）]低于癌旁正常卵巢組織[95.0%（19/20）]，差異有統計學意義（χ2=7.025，P=0.020）。3項指標聯合檢測的AUC為0.925、靈敏度為90.0%。結論 ATM蛋白檢測在一定程度上可提高卵巢癌的診斷效能和靈敏度。

CA-125抗原； 卵巢腫瘤； ROC曲線； 人附睪蛋白4； ATM蛋白

根據《2012年中國腫瘤登記年報》報道，女性癌癥分布較分散，子宮癌、宮頸癌、卵巢癌等發病率較高。卵巢癌早期癥狀不明顯，不易被患者和醫生發現，因此，尋找篩查早期卵巢癌的有效方法意義重大。癌抗原125（cancer antigen 125，CA125）在卵巢癌檢測中應用普遍且較早，但其升高在早期卵巢癌患者中僅占50.0%，檢測特異性低于12.0%，且CA125在其他惡性腫瘤，甚至非惡性疾病患者中也可見升高，因此，僅以CA125作為初篩指標容易造成漏、誤診。近年來，人類附睪蛋白4（hu man epididymis protein 4，HE4）作為一種新的腫瘤標志物，在卵巢癌組織中特異性高而被普遍應用。ATM蛋白由共濟失調毛細血管擴張征突變基因（ataxia-telangiectasia mutated gene，ATM gene）編碼，屬于一種自動磷酸化蛋白激酶，在DNA損傷修復、細胞周期阻滯和細胞凋亡過程中發揮關鍵的調控作用[1]。本研究對20例卵巢癌患者和20例健康體檢者進行CA125、HE4、ATM蛋白檢測，旨在探討三者聯合檢測對卵巢癌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取本院2013年6月至2015年1月病理確診的卵巢癌患者20例（卵巢癌患者組），年齡45～65歲，均為絕經患者。另選取同期健康體檢者20例（健康對照組），年齡49～75歲，也均為絕經者，且均無肝、腎等重要器官功能異常。標本采集前研究對象均簽署臨床科研知情同意書，且本研究經過了醫院倫理委員會批準。

1.1.2 試劑與儀器 ATM蛋白試劑購于上海生工有限公司，CA125、HE4檢測采用ARCHITECT i2000SR儀及其配套試劑。

1.2 方法

1.2.1 標本采集

1.2.1.1 CA125和HE4 采集研究對象清晨空腹靜脈血，置于肝素鈉或分離膠真空采血管中，室溫靜置30min，3 000 r/min離心3 min，取上清液。CA125、HE4檢測采用化學發光微粒子免疫分析法。

1.2.1.2 ATM蛋白 收集卵巢癌患者手術切除標本，取相應患者術后切除標本的癌旁正常卵巢組織作為正常對照。收集標本前均未給予化療和（或）放療。ATM蛋白檢測采用經典免疫組織化學SP法。陰性對照用磷酸鹽緩沖液代替一抗，其余實驗條件、步驟均與樣品操作相同；采用上海申工公司提供的已知陽性切片作為陽性對照，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.2 檢測結果判定

1.2.2.1 CA125和HE4 CA125＞35 U/mL、HE4＞76 pmol/L為陽性。

1.2.2.2 ATM蛋白 ATM蛋白主要表達于細胞核，部分表達于細胞質，呈棕黃色顆粒，根據著色程度分別記0、1、2、3分。陽性細胞百分數：＜10.0%記0分，10.0%～＜25.0%記1分，25.0%～50.0%記2分，＞50.0%記3分。綜合判定取著色強度和陽性細胞百分數分值之積：0分為陰性，記為（-）；1分以上為陽性，其中1～2分記為（1+），3～4分記為（2+），5～9分記為（3+）。臨床分期根據國際抗癌聯盟TNM分期標準。由本院2名病理科醫生在相同條件下對結果進行判定。

1.3 統計學處理 應用SPSS17.0統計軟件進行數據分析。計數資料以率或構成比表示，采用χ2檢驗；計量資料采用中位數及四分位數描述，采用受試者工作特征曲線下面積（area under the cerve，AUC）分析CA125、HE4、ATM蛋白陽性率對卵巢癌的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組研究對象血清CA125、HE4檢測結果比較 卵巢癌患者組血清CA125、HE4水平明顯高于健康對照組，見表1。但卵巢癌患者組CA125檢測陽性率[75.0%（15/20）]與HE4檢測陽性率[80.0%（16/20）]比較，差異無統計學意義（P=0.356）。

表1 兩組研究對象血清CA125、HE4檢測結果比較[中位數（四分位數）]

2.2 ATM蛋白在卵巢癌患者癌變組織和癌旁正常卵巢組織表達陽性率比較 卵巢癌患者癌變組織ATM蛋白表達陽性率[60.0%（12/20）]低于癌旁正常卵巢組織[95.0%（19/20）]，差異有統計學意義（χ2=7.025，P=0.020）。

2.3 CA125、HE4、ATM蛋白檢測的AUC、靈敏度和特異性比較 CA125、HE4檢測的AUC分別為0.948、0.983，診斷效率較高；ATM蛋白檢測的AUC僅為0.650。單項檢測中HE4靈敏度最高（80.0%），ATM蛋白最低（40.0%）；3項指標聯合檢測的AUC為0.925、靈敏度為90.0%，見表2。

表2 CA125、HE4、ATM蛋白檢測的AUC、靈敏度和特異性比較

3 討 論

ATM蛋白是一種自動磷酸化蛋白，含3 056個氨基酸，分布于細胞核和細胞質中，以細胞核為主，廣泛分布于人體組織中[1]。當DNA受損傷ATM被激活，通過磷酸化P53及其下游靶蛋白，參與細胞周期檢測點的監管，使細胞周期阻滯于G1/S期、S期和G2/M期3個檢測點，從而完成受損DNA的修復[2]。但當ATM發生突變而功能受損時細胞內缺乏正常ATM蛋白，不能對受損DNA進行修復，受損DNA隨分裂傳入子細胞中，細胞就容易發生癌變。作者已經對ATM蛋白在食管癌組織中的表達進行了研究，結果顯示，食管鱗癌患者癌變組織ATM蛋白表達陽性率與癌旁正常組織比較，差異有統計學意義（P＜0.05）[3-4]。本研究結果顯示，卵巢癌患者癌變組織ATM蛋白表達陽性率[60.0%（12/20）]低于癌旁正常卵巢組織[95.0%（19/20）]，差異有統計學意義（χ2= 7.025，P=0.02）。ATM蛋白在靈敏度方面雖然不如CA125、HE4，但3項指標聯合檢測的AUC、靈敏度均較理想，ATM蛋白檢測在一定程度上可提高診斷效能和靈敏度。

大量研究發現，許多腫瘤的發生和治療過程涉及ATM蛋白表達或活性改變，且ATM蛋白表達或活性改變影響腫瘤的治療及預后[5-7]，提示ATM基因或許能成為腫瘤治療中一個新的潛在作用靶點[8]。

本研究未對卵巢癌進行病理分期和統計處理，主要是因為標本例數較少。賈曉娟等[9]分期研究結果顯示，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者CA125檢測陽性率分別為0、62.5%、84.6%、100.0%；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌患者HE4檢測陽性率分別為0、25.0%、61.5%、100.0%，不同分期卵巢癌患者血清CA125、HE4水平有差異。

本研究結果顯示，卵巢癌患者CA125、HE4檢測陽性率、AUC、靈敏度和特異性比較，差異均無統計學意義（P＜0.05）。不過黎明鸞等[10]和尚陳宇等[11]研究證實，卵巢癌患者手術前后血清CA125、HE4水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。

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[4]韓笑，樊衛.ATM蛋白在淋巴結陰性的進展型食管癌中的表達及臨床意義[J].現代腫瘤醫學，2014，22（12）：2873-2874.

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[10]黎明鸞，陳蔚，林葉飛，等.CA125及HE4蛋白在卵巢癌組織及血清中的表達及其臨床意義[J].中國婦幼保健，2013，28（24）：4023-4026.

[11]尚陳宇，劉冬冬，徐建華，等.HE4和CA125聯合檢測在卵巢癌診斷及預后評估中的價值研究[J].中國婦幼保健，2014，29（33）：5492-5494.

Diagnostic value of serum CA125，HE4 and ATM protein joint detection in ovarian cancer

Fan Wei，Qi Jinyou，Han Xiao
（Department of Clinical Laboratory，Huai′an Municipal Tumor Hospital，Huai′an，Jiangsu 223200，China）

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of the joint detection of serum human carcinoma antigen 125（CA125），epididymis protein 4（HE4）and ATMprotein in ovarian cancer.MethodsA total of 20 patients with pathologically diagnosed ovarian cancer in our hospital from June 2013 to January 2015 were selected as the ovarian cancer group and 20 women undergoing the physical examination were selected as the control group.The levels of CA125，HE4 and ATM in the 2 groups were detected and their positive rate，sensitivity，specificity and the area under the curve（AUC）were compared between the two groups.ResultsThe levels of serum HE4 and CA125 in the ovarian cancer group were significantly higher than those in the control group，but the positive rate of CA125 detection and HE4 detection had no statistical difference[75.00%（15/20）vs.80.00%（16/20），P=0.356]；the ATM protein expression positive rate of cancerous tissues in the ovarian cancer group was 60.00%（12/20），which was lower than 95.00%（19/20）of paracancerous normal tissues，the difference was statistically significant（χ2=7.025，P=0.020）. AUC of 3-indicator combined detection was 0.925 and the sensitivity was 90.0%.ConclusionThe ATM protein detection can improve the diagnostic efficiency and sensitivity of ovarian cancer in a certain extent.

CA-125 antigen； Ovarian neoplasms； ROC curve； Human epididymis protein 4； ATM protein

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.24.011

A

1009-5519（2015）24-3717-02

2015-10-09）

樊衛（1983-），女，湖南長沙人，碩士研究生，主管檢驗師，主要從事腫瘤分子生物學的研究；E-mail：fch141@163.com。