蒙藥材花錨中黃酮類提取工藝條件的研究

敖道夫 巴達拉胡

(內蒙古民族大學附屬醫院，內蒙古 通遼 028000)

蒙藥材花錨蒙古名為西依熱地格達、庫日迪克、都莫迪克、達格木-札德朱爾、章古圖-地格達。為龍膽科植物花錨(Halenia sibirica Borkh.)的干燥全草。氣微，味甘、苦，性平、柔、膩。平息“協日”，清熱，愈傷。用于目黃，口苦，高燒，頭痛，尿黃，“協日”熱，傷熱，脈熱［1］。是蒙醫常用藥材，也是傳統方劑旺拉嘎-3 湯的主要組成成分。在我國除華南和華東地區外，廣布在其他地區以及蒙古、西伯利亞、遠東、歐洲等國家，生長于山溝、林緣、林下、水邊濕草地［3］。據文獻報道，目前已從花錨中分離得到了口山酮、口山酮苷、黃酮、黃酮苷、裂環烯醚萜、三萜類和生物堿等類型成分［4］。現將對蒙藥材花錨中總黃酮類成分提取工藝進行研究，以期為該民族藥資源的開發研究及臨床應用提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器：ZDHW 型調溫電熱套(北京中興偉業儀器有限公司)，752 -紫外分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)HH-W600 數顯三用恒溫水箱(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)TG328B 電光天平(福州天平儀器廠)。

1.2 材料：蘆丁標準品(由中國藥品生物制品鑒定所提供)，花錨藥材采自五岔溝林業局浩森溝林場;其他試劑均為分析純。

2 實驗方法

2.1 提取工藝條件的正交安排：對影響花錨提取物收率的溶劑量、提取時間、乙醇濃度、提取次數4 個因素，分別取3 個水平進行考察。因素水平見表1。

表1 因素水平

2.2 考察指標的確定和測定

2.2.1 考察指標的確定：黃酮為花錨的主要有效成分，易溶于乙醇，故采用乙醇回流法提取花錨，并將蘆丁作為考察指標，同時結合提取率優選最佳工藝。

2.2.2 浸膏得率的測定：按L9(34)正交表安排實驗，取花錨約5.0g 在平行操作條件下加熱回流、提取、過濾，濾液水浴濃縮、蒸干，稱其質量。按浸膏得率(%)= 浸膏質量/樣品質量100%［4］計算.其見表2。

表2 正交試驗設計表及結果

2.2.3 標準曲線的繪制：精密稱取蘆標準20mg，放入100mL 容量瓶中，加無水乙醇90mL，在水浴鍋上加熱溶解，冷卻后，再用無水乙醇定容(0.2mg/mL)，備用。然后精密吸取蘆丁對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0 、5.0、6.0mL 分別置25mL 容量瓶中，分別加水至6.0mL ，加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的硝酸鋁溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的氫氧化鈉溶液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min，依據分光光度法在500nm 波長處測定其吸收度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，求出回歸方程。結果得到花錨濃度Y 與吸光度X 關系曲線的回歸方程為Y =0.608X-0.0023，相關系數r =0.9998，所以本實驗花錨濃度與吸光度有良好的相關性。

2.2.4 樣品含量測定：精密稱取正交實驗號花錨各約5.0g，加熱回流、提取、過濾、濾液水浴濃縮、蒸干，殘渣用無水乙醇定溶至5mL，作為供試品溶液。然后精密吸取上述提取液各1mL，分別加水至6.0mL ，加5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的硝酸鋁溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%的氫氧化鈉溶液10mL，再加水至刻度，搖勻，放置15min，依據分光光度法在500nm 波長處測定其吸收度，計算黃酮含量，見表2。

2.3 方差分析：將正交試驗結果進行方差分析，分析結果見表3。

表3 方差分析表

綜合2 個考察指標工藝條件，確定花錨最佳提取工藝條件為A2B2C3D1.

3 結 果

通過以上的L9(34)正交實驗，最終確定提取花錨中黃酮類成分的最佳工藝條件為A2B2C3D1。即70%乙醇，12倍量，提取3 次，提取時間0.5h。

本研究建立的分光光度法用于測定黃酮類含量，方法簡便，實驗結果可靠，最佳條件適合批量生產該藥材的提取。

［1］中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準 蒙藥分冊［M］.1998：45.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010.

［3］邰巴達拉胡，拉喜那木吉拉，桂榮，等.蒙藥材花錨的化學成分研究進展［J］.中成藥，2015，5(37).

［4］包保全，孫啟時，包巴根那，等.花錨屬植物化學成分及生物活性研究進展［J］.中藥材，2003，5(26).