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阿格希日嘎-7 對SD 大鼠急性創傷性腦水腫的影響

2015-07-12 09:06:06周鐵寶
中國民族醫藥雜志 2015年9期
關鍵詞:實驗模型

海 榮 周鐵寶

(1.內蒙古興安盟蒙醫醫院,內蒙古 烏蘭浩特 137400; 2.內蒙古民族大學附屬醫院,內蒙古 通遼 028000)

腦水腫是血腦屏障受損、腦缺氧、顱內靜脈壓增高等因素導致腦組織中水分的運輸和平衡失調,水電解質在腦細胞膜內外的分布失衡而引起水分病理性蓄積,導致腦體積增加和顱內壓增高綜合征。顱腦創傷因中樞神經系統解剖的特異性及其功能的重要性,具有高死亡率和高致殘率[1]。目前西醫對腦水腫的治療主要有高滲性脫水劑,利尿劑,糖皮質激素以及外科手術減壓等,副作用大,藥量控制難,治療不方便。古代蒙醫用瀉下療法治療腦水腫,蒙醫瀉下療法理論體系完整、邏輯嚴謹、內容詳細且真實,得到了長期實踐和歷史的檢驗,也取得了突出的臨床療效,但缺乏現代化研究。本實驗研究阿格希日嘎-7 的降低腦水腫作用,對以后的臨床應用及實驗研究提供參考。

1 實驗材料與方法

1.1 動物 選用SD 大鼠許可證號:SCXK-吉20110004,購于吉林大學實驗動物中心,選擇體重在230 ±20g,雌雄各半,雌鼠不孕。

1.2 儀器ZH-ZYQ 型自由落體腦損傷模型打擊器(安徽正華生物儀器設備有限公司);JH -755B 型紫外可見分光光度計(上海菁華科技儀器有限公司);BGZ -146 型電熱鼓風干燥箱(上海博訊實業有限公司醫療設備廠);BG10 -3A 型低溫高速冷凍離心機(北京時代北利離心機有限公司)。

1.3 藥品 阿格希日嘎-7,組成:藜蘆6g 巴豆6g 蓽茇6g臘腸果15g 干漆15g 白豆蔻3g 白硇砂6g,由內蒙古民族大學附屬醫院提供。

2 方法

2.1 分組與模型建立 將160 只SD 大鼠按其性別、體重隨機分為給藥高劑量組、給藥低劑量組、模型組、空白組,各組40 只。適應性喂養3d,采用改良的Feeney 氏[2]法自由落體打擊制作腦水腫模型。用10%水合氯醛(3.5mL/kg)行腹腔注射麻醉,俯臥位固定于動物實驗臺,常規消毒鋪巾,剪去頂部皮毛,消毒皮膚后沿矢狀正中線切開頭皮,分離骨膜,暴露前囟、冠狀縫、矢狀縫及頂骨。在人字縫前方3mm,中線左側2mm 顱頂骨處,將撞桿置于硬膜外,撞桿突出螺旋筒3mm,用100g 重的砝碼從30cm 高處自由下落打擊致急性腦水腫,然后尾靜脈注入EB25mg/kg。

2.2 給藥:大鼠造模后,給藥高劑量組灌胃0.6g/kg;給藥低劑量組灌胃0.3g/kg;模型組和空白組灌胃同體積蒸餾水,體積為2mL/100g,2 次/d 灌胃。按6、24、48、72、96h 逐一斷頭處死,棄小腦,稱大腦干濕重,測量腦含水量及EB含量。

2.3 指標檢測:⑴腦含水量測定:大鼠斷頭取腦后,以濾紙吸去表面體液,用電子分析d 平秤稱4 組大鼠大腦的濕重(室溫15 ~20℃,濕度70% ~90%)。然后將腦組織在電熱烤箱(95℃)中放置24h 烘干,再逐一稱干重(再次烘干4h后,干重相差小于5μg 為止)。按照Elliot 公式計算含水量:腦含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%。(2)測量EB 染色范圍:在手術顯微鏡下測量腦表面EB 染色直徑。(3)測定EB 含量:以氨水乙醇液(1:2)將EB 先配成濃度(C)為0.1、0.5、1.0、1.5 和2.0ug/mL 的標準測定液,用紫外線分光光度儀測定各標準液的吸收度(A)。兩次測定的吸收度結果與濃度經回歸處理得標準直線方程C =22.73909A-0.00781(r =0.9999)。按Young 氏[3]法提取和測定EB 含量。

1.3 統計學方法:采用SPSS17.0 軟件進行統計學分析,實驗數據以 ±S 表示,進行組間比較采用了F 檢驗,P<0.05為有統計學意義。

2 實驗結果

2.1 大鼠的腦含水量 空白組與給藥模型組比較腦含水量有顯著性差異(P<0.05);模型組與給藥組比較腦含水量有顯著性差異(P<0.05);兩給藥組比較腦含水量無顯著性差異(P>0.05),見表1。

表1 腦組織的含水量百分比(n,%,x±S)

2.2 大鼠的EB 染色范圍 與空白組相比較,其余3 組可見腦外觀藍染區,藍染大小2.5 ×3.5mm2左右。

2.3 大鼠腦組織EB 含量測定 空白組與給藥模型組比較EB 含量有顯著性差異(P<0.05);模型組與給藥組比較EB含量有顯著性差異(P<0.05);兩給藥組比較EB 含量無顯著性差異(P>0.05),即兩個劑量組藥物降腦組織EB 含量的作用相同,治療腦水腫療效相同,見表2。

表2 阿格希日嘎-7 對腦組織EB 含量(ng/mL)的影響(n,x±S)

3 討論

中醫認為腦水腫屬中風臟腑之痰熱藴蓄腸腑、蒙蔽清竅證、清竅閉塞、神明被擾、痰濁瘀血藴蓄、腸腑結實,總結出瘀是根本原因[4],因則肝陽暴亢、瘀阻腦府、瘀則生水立論,化瘀利水治療。蒙醫學認為受傷等原因下胃腑之消化希拉和調火赫依之功能紊亂,導致胃火衰敗,赫依血運行受阻,精華與糟粕之分解失常,致使精華不能完全被吸收而渾濁,水液增積,潴留于病變部位—腦。臨床上給予調理胃火,抑制赫依,疏通脈道,利水燥濕治療。蒙醫著作《藍琉璃》里記載“……精華渾濁、水液增積成黃水病者中期可施瀉下療法[5]。而本實驗中的阿格希日嘎-7 通過刺激消化道,通利大便,蕩滌胃腸,排除積滯及水分,從而降低血漿滲透壓使減輕腦水腫、降顱壓,治療急性創傷性腦水腫經濟低廉,副作用小,能夠有效提高臨床療效,并彌補西藥治療的不足之處,減少其不良反應。本實驗為減輕腦水腫、降低顱內壓的治療提供新的藥物理論依據,為蒙藥在臨床中應用奠定堅實基礎。

[1]劉蔭秋,王正國,馬玉媛,等.創傷彈道學[M].人民軍醫出版社,1991:261 -267.

[2]Feeney’DM,Boyeson MA,Linn RTetal.Responses to cortical in jur y:lmethodo logy and local effects of contusion in the rat[J].Brain Res,1981,211(11):67.

[3]Young A er al:proc soc Exp Biol Med,1964,116:220.

[4]楊愛學.醒腦化痰通腑飲治療中風急性期腦水腫的臨床研究[J].河南中醫藥學刊,1996,27(3):21 -23.

[5]烏云.藍琉璃[M].內蒙古人民出版社,1999:129.

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