新輔助化療對Ⅰb2－Ⅱb期宮頸癌細胞凋亡以及其預后的影響＊

陜西省婦幼保健院婦科（西安710003） 胡春艷 劉 晨 張恩娣 譚宏偉 田燕妮 賈 亮

宮頸癌作為臨床發病率較高的婦科惡性腫瘤，預后狀況較差，主要采用放療、手術等方法進行治療。但近年來在臨床分期ⅠB2以上的宮頸癌患者中所采用的新輔助化療（New adjuvant chemotherapy treatment，NACT）能明顯促進腫瘤體積的縮小、預防復發與轉移，并可有效提高生存率［1］。本研究對新輔助化療標本的細胞凋亡情況進行觀察，并對術后宮頸癌患者的預后狀況進行分析，現報道如下。

資料和方法

1 一般資料 納入2005年12月至2012年12月期間于本醫院收治的Ⅰb2－Ⅱb期宮頸癌患者，按照術前是否給予新輔助化療分為新輔助化療組（A組）50例與未行新輔助化療（B組）50例，并納入50例因子宮多發肌瘤而進行子宮全切術治療的患者作為對照組（C組），其宮頸組織的宮頸鱗狀上皮正常。納入標準：①術前行新輔助化療者及其家屬均簽署知情同意治療書；②宮頸癌患者均經宮頸活檢病理檢查后給予確診。排除標準：①合并其他惡性腫瘤史及肝腎功能異常患者；②有化療禁忌證。A、B、C3組患者在臨床分期、病理分化程度、平均年齡及組織學類型等方面進行對比，差異均無顯著性（P＞0.05）。

2 化療方法 宮頸癌A組患者術前給予新輔助化療法，采用紫杉醇聯合順鉑化療法：紫杉醇劑量135～175mg／m，持續靜滴3h，順鉑劑量為50mg／m。在進行紫杉醇化療前6、12h，分別使用20mg地塞米松，口服；使用順鉑化療前24h及使用當天、使用后第1d，均給予靜脈水化。化療療程1～2個，每次間隔3周，化療結束后第二周，A組患者均行廣泛子宮切除術加雙側盆腔淋巴結切除術加雙側附件切除術，宮頸癌B組患者術前未行新輔助化療，而直接給予手術治療，手術方法與A組相同。通過門診、電話等方式進行對A、B兩組宮頸癌患者進行術后隨訪、隨訪至2015年1月，記錄術后1、2年的復發率與生存率。

3 細胞凋亡指標檢測法與結果判定 采用免疫組織化學法、原位末端標記法（TUNEL）對 A、B、C3組患者的細胞凋亡進行檢測，檢測方法均按北京中山生物試劑公司提供的試劑說明書進行操作，并采用磷酸緩沖鹽溶液（PBS）替代一抗作為空白對照，其中，主要試劑包括：原位末端標記試劑盒（羅氏公司）、SP系列免疫組化試劑盒、Bcl－2（100）、Bax（N－20）分別為鼠抗人單克隆抗體、兔抗人多克隆抗體）。結果判定：對3組患者的組織切片Bcl－2、Bax等表達狀況進行分析，在外部相同條件下，對低倍鏡下（×100）的圖像進行攝取，隨機選取各張切片的6個視野，對場總面積平均光密度值及5個高倍視野（×400）下的凋亡細胞數、細胞總數等進行計算，并求各張組織切片的平均值，凋亡指數（apoptosis index，AI）＝（凋亡細胞數／細胞總數）×100.00%。

4 統計學方法 采用SPSS19.0進行統計分析，多組間計量資料（ˉx±s）采用F檢驗，兩組間比較采用t檢驗，計數資料（%）采用χ2檢驗，生存率對比采用Log－rank檢驗法，均以α＝0.05作為檢驗水準。

結 果

1 3組患者細胞凋亡基因檢測情況對比 A、B兩組患者的Bcl－2、Bax及 AI均顯著高于C組，Bcl－2／Bax均顯著低于 C組，而 A 組 Bcl－2、Bcl－2／Bax均顯著低于B組患者，且A組患者的AI顯著高于B組患者，差異均具有顯著性（P＜0.05），詳見附表。

附表 3組患者細胞凋亡基因檢測情況對比（ˉx±s）

2 宮頸癌A、B兩組患者術后1年、2年的生存率、復發率比較 A組術后1、2年的復發率顯著低于B組，A組術后1、2年的生存率顯著高于B組，差異具有統計學意義（P＜0.05）。

討 論

雖然宮頸癌患者的病因較明確，但其預后狀況仍不容樂觀，病死率一直居高不下，且宮頸癌的發病率呈逐年上升趨勢，根據對Ⅰb2－Ⅱb期宮頸癌患者各年代發病率的調查研究結果表明，20世紀70年代的發病率僅為9.0%，而在90年代則上升為19.1%。目前臨床上主要采用根治手術對該疾病患者進行治療，但僅依靠手術治療仍存在創傷大、術后并發癥發生率高及預后狀況不理想等問題［2］，且手術范圍常涉及盆腹腔血管、腸管、膀胱等多種器官組織，在一定程度上影響了手術的整體效果［3］，盡管近年來宮頸癌根治手術不斷發展，但術后并發癥仍高達25%～50%［4］。

正常機體維持自身穩定需要依靠細胞凋亡，它作為基因調控機體的生理機制之一，在腫瘤發生、發展中具有重要的作用，并成為臨床腫瘤探討的熱點之一。有研究［5］表明，在腫瘤組織中，細胞增殖的平衡與細胞凋亡有關。而調控細胞凋亡的相關基因較多，其中，與其關系較密切的基因主要有 Bcl－2、Bax，Bcl－2作為抗凋亡基因之一，可通過直接抗氧化、維持細胞鈣穩定狀態、降低線粒體釋放的促凋亡蛋白質水平、抑制凋亡蛋白酶激活及抑制促凋亡調節蛋白的細胞毒作用等途徑抑制細胞凋亡，而作為Bcl－2的拮抗因子，Bax主要通過與Bcl－2蛋白競爭作用靶并與之形成異源二聚合復合物，再加上本身所形成的同源二聚體，共同起到調節細胞凋亡的作用［6］。術前進行新輔助化療已經被臨床所建議，以縮小局部腫瘤、減少手術切除范圍、減輕手術帶來的損傷。本研究結果顯示，采用新輔助化療的 A組Bcl－2、Bcl－2／Bax均顯著低于 B組患者，且 A組患者的AI顯著高于B組患者，差異均具有顯著性（P＜0.05），此外，A組術后1、2年的復發率顯著低于B組，術后1、2年的生存率顯著高于B組，說明新輔助化療可通過降低Bcl－2／Bax，從而增加凋亡細胞，抑制腫瘤的惡化發展，再配合手術治療，改善患者的預后狀況。

綜上所述，在Ⅰb2－Ⅱb期宮頸癌患者術前應用新輔助化療，可有效促進癌細胞凋亡、改善患者預后，具有較高的臨床價值。

［1］ 熊銳華，任慶，田秀榮，等.新輔助化療在宮頸癌治療中的臨床研究［J］.腫瘤防治研究，2012，39（6）：719－721.

［2］ 唐 杰，張 晶，王 娟，等.宮頸癌ⅡB期新輔助化療后腹腔鏡下根治術40例分析［J］.實用醫學雜志，2012，28（17）：2934－2935.

［3］ 王文翔，范文強，董學彩，等.小劑量紫杉醇聯合順鉑周療方案在Ⅰb2～Ⅱb期宮頸癌新輔助化療中的應用［J］.山東醫藥，2012，52（30）：39－40.

［4］ 何超蔓，梁峰冰，陳曼玲，等.術前新輔助化療治療宮頸癌62例的療效觀察［J］.中華醫學雜志，2012，92（5）：327－329.

［5］ 劉絲蓀，熊潔琦，閔慶華，等.二氧化硒調控凋亡相關蛋白誘導宮頸癌細胞凋亡的影響［J］.重慶醫學，2014，12（10）：1218－1220.

［6］ 葉春萍，余寧珠.Ⅰb2～Ⅱb期宮頸腺癌患者術前新輔助化療的療效觀察［J］.現代醫學，2012，40（5）：562－565.