不同程度肝纖維化患者IGF－2及IGFBP－2與MMPs家族相關(guān)性分析＊

西安交通大學(xué)檢驗(yàn)科（西安710061） 周凱華 石興民

肝硬化是最常見的肝臟疾病之一，該疾病的發(fā)生是在乙肝病毒等各種致病因素導(dǎo)致肝內(nèi)結(jié)締組織異常增生，假小葉形成，最終出現(xiàn)肝臟正常結(jié)構(gòu)被破壞及肝功能不斷受損，嚴(yán)重者可出現(xiàn)肝細(xì)胞壞死并有惡變可能［1］。血清胰島素樣生長(zhǎng)因子－2（IGF－2）、胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝臟分泌，并激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）等因子，使靜止的肝星狀細(xì)胞激活［2］，并轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣細(xì)胞。基質(zhì)金屬蛋白酶－2（MMP－2）及其抑制劑TIMP－2是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的有效反應(yīng)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）重構(gòu)及新生血管形成的重要指標(biāo)［3］，是導(dǎo)致肝硬化進(jìn)展的重要因素，但目前對(duì)兩者之間的關(guān)系尚未明確。我們自2012年12月至2014年12月對(duì)就診于我院的肝硬化患者進(jìn)行了IGF－2、IGFBP－2及MMPs家族檢測(cè)，初步明確該類因子在肝硬化進(jìn)展中的關(guān)系。

資料與方法

1 一般資料 選擇自2012年12月至2014年12月期間我院就診的慢性乙型肝炎214例，其中男性122例，女性92例，年齡42～65歲，平均年齡為53.5±11.6歲，入選患者的均符合《病毒性肝炎防治方案》相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，并將患者分為慢性乙型肝炎輕度組（A組）、中度組（B組）、重度組（C組）及肝硬化組（D組），分別有65、61、49、39例。

2 檢測(cè)指標(biāo)

2.1 IGF－2、IGFBP－2測(cè)定：所有研究對(duì)象均于入選后次日晨抽取靜脈血3ml，室溫靜止30min后離心，取血清留存待檢。檢驗(yàn)由我院檢驗(yàn)科完成，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)IGF－2、IGFBP－2。

2.2 血清 MMP2、TIMP－2檢測(cè)：采用ELISA法檢測(cè)MMP－2及TIMP－2，檢測(cè)檢測(cè)由我院檢驗(yàn)科完成，操作嚴(yán)格按照說(shuō)明進(jìn)行，并保證在試劑有效期內(nèi)使用且保證質(zhì)控符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料均采用ˉx±s表示，組間比較采用方差分析后進(jìn)行LSD檢驗(yàn)，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 各組IGF－2、IGFBP－2結(jié)果比較 對(duì)各組IGF－2、IGFBP－2水平進(jìn)行分析，B 組患者IGF－2、IGFBP－2較A組出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），C組患者IGF－2、IGFBP－2較A組、B組均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），D組患者IGF－2、IGFBP－2較 A 組、B組、C 組均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05）。見附表。

附表 各組IGF－2、IGFBP－2結(jié)果比較（ˉx±s）

2 各組血清MMP2、TIMP－2水平比較 對(duì)各組MMP－2、TIMP－2水平進(jìn)行分析，B組患者 MMP－2及TIMP－2較 A組均未見顯著差異（P＞0.05），MMP－2／TIMP－2較 A 組顯著升高 （P＜0.05），C 組患者M(jìn)MP－2及TIMP－2較A組均出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05），MMP－2／TIMP－2較 A 組、B組患者均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），D 組患者 MMP－2、TIMP－2、MMP－2／TIMP－2較A組、B組、C組均出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05）。

3 血清IGF－2、IGFBP－2與 MMP－2、TIMP－2相關(guān)性分析 分析IGF－2、IGFBP－2與 MMP－2、TIMP－2相關(guān)性，IGF－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關(guān) （P＜0.05），與 MMP－2未見顯著相關(guān)性 （P＞0.05）；IGFBP－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關(guān) （P＜0.05），與 MMP－2未見顯著相關(guān)性 （P＞0.05）。

討 論

隨著慢性乙型肝炎等患者的持續(xù)增多，乙肝相關(guān)性肝硬化目前已成為消化科常見的肝臟疾病之一，在HBV等各種損傷因子反復(fù)刺激下，肝細(xì)胞出現(xiàn)變性壞死，肝星狀細(xì)胞激活導(dǎo)致大量細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生［4］，并轉(zhuǎn)化為肌成纖維樣細(xì)胞。IGF－2是重要的多功能調(diào)節(jié)因子之一，具有促進(jìn)DNA復(fù)制以及蛋白質(zhì)合成，加速細(xì)胞有絲分裂等作用［5］。分泌的IGF－2與IGFBP－2結(jié)合，并控制IGF－2生成后轉(zhuǎn)運(yùn)至病變組織的釋放過(guò)程，是參與病情進(jìn)展的重要因素。

細(xì)胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM）是肝臟細(xì)胞外的一個(gè)重要組成部分。MMPs是一類被具有重要的細(xì)胞調(diào)節(jié)的鋅依賴性酶，可對(duì)細(xì)胞微環(huán)境的多種效應(yīng)，被認(rèn)為在各種炎癥、神經(jīng)變性和惡性疾病發(fā)展過(guò)程中起著顯著作用。在慢性乙肝相關(guān)性肝纖維化的形成過(guò)程中，肝細(xì)胞壞死后加速炎細(xì)胞的募集［6］，Kupffer細(xì)胞等激活后刺激轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子產(chǎn)生，并通過(guò)旁分泌途徑刺激肝星狀細(xì)胞活化增生，并向肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化。基質(zhì)金屬蛋白酶－2（MMP－2）是參與細(xì)胞外基質(zhì)降解的主要蛋白酶，主要針對(duì)Ⅳ型膠原TIMP－2是MMPs的特異性抑制因子，其水平降低可加重細(xì)胞外基質(zhì)降解，其水平下降可以增強(qiáng) MMP－2等的活性。血清IGFBP－2水平是反映前列腺癌惡性程度及侵襲性的重要指標(biāo)，表明IGFBP－2等是ECM重構(gòu)及刺激新生血管形成的重要因素。血清胰島素樣生長(zhǎng)因子－2（IGF－2）、胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝臟分泌，并激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）等因子，使靜止的肝星狀細(xì)胞激活，并轉(zhuǎn)化為肌成纖 維 樣 細(xì) 胞。 分 析 IGF－2、IGFBP－2 與 MMP－2、TIMP－2相關(guān)性，IGF－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關(guān)，IGFBP－2與TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關(guān)，因而MMPs家族所致細(xì)胞外基質(zhì)平衡紊亂所導(dǎo)致肝纖維化進(jìn)展過(guò)程與IGF－2及IGFBP－2存在密切關(guān)系，該過(guò)程可能以IGF－2／IGFBP－2水平失調(diào)導(dǎo)致肌成纖維細(xì)胞激活，加劇細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)，成為肝纖維化病情進(jìn)展的重要機(jī)制。

綜上所述，隨著肝纖維化的進(jìn)展，IGF－2及IGFBP－2水平與細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)密切相關(guān)，是反映肝纖維化進(jìn)展的重要因子，對(duì)兩類因子進(jìn)行監(jiān)測(cè)對(duì)于探索該系列指標(biāo)在肝纖維化病情診斷、治療過(guò)程中病情變化具有重要臨床意義。

［1］ Anguela X M，Tafuro S，Roca C，etal.Nonviral－mediated hepatic expression of IGF－I increases Treg levels and suppresses autoimmune diabetes in mice［J］.Diabetes，2013，62（2）：551－560.

［2］ Smith T，Sloboda DM，Saffery R，et al.Maternal nutritional history modulates the hepatic IGF－IGFBP axis in adult male rat offspring［J］.Endocrine，2014，46（1）：70－82.

［3］ Slifierz MJ，F(xiàn)riendship R，De－Lange C F，et al.Immunomodulatory factors and infectious agents associated with the hepatic gene expression of the IGF system in nursery pigs［J］.Animal，2014，8（5）：844－851.

［4］ 譚文彬，周廣起，王 霄，等.IRE－BP 1蛋白與肝癌細(xì)胞耐藥性發(fā)生機(jī)制的研究［J］.國(guó)外醫(yī)學(xué)（醫(yī)學(xué)地理分冊(cè)），2013，34（1）：54－56.

［5］ Levi J，Huynh FK，Denroche HC，et al.Hepatic leptin signalling and subdiaphragmatic vagal efferents are not required for leptin－induced increases of plasma IGF binding protein－2 （IGFBP－2）in ob／ob mice［J］.Diabetologia，2012，55（3）：752－762.

［6］ Rehem R N，El－Shikh W M.Serum IGF－1，IGF－2and IGFBP－3as parameters in the assessment of liver dysfunction in patients with hepatic cirrhosis and in the diagnosis of hepatocellular carcinoma［J］.Hepatogastroenterology，2011，58（107）：949－954.