玉米須多糖和黃酮的半仿生提取及抗氧化活性

郭志紅+周鴻立

摘要：通過正交試驗設計，采用半仿生法水浸提、醇提玉米須2種方法，并與傳統水提、傳統醇提方法作比較，以多糖、黃酮的提取量和抗氧化活性為考察指標，確定最佳提取條件。結果表明，半仿生水提多糖提取量為35.29 mg/g，比傳統水提法提高了14.39%，半仿生水提黃酮提取量為5.16 mg/g，比傳統水提低36.6%。2種水提取物均有抗氧化活性且半仿生法更弱。半仿生醇提多糖提取量為49.53 mg/g，比傳統醇提提高了19.75%，醇提黃酮提取量為 15.59 mg/g，比傳統醇提高了59.4%。2種醇提取物均有抗氧化活性且半仿生法較強。半仿生水提有利于玉米須多糖的提取;半仿生醇提玉米須黃酮、多糖均提高，且有較高的生物活性，是提取分離玉米須活性成分的有效方法。

關鍵詞：玉米須;多糖;黃酮;半仿生;抗氧化;正交試驗

中圖分類號： R284.2 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）04-0273-04

收稿日期：2014-05-21

基金項目：吉林省科技廳科研項目（編號：20130303050NY）;吉林省教育廳2013第319號。

作者簡介：郭志紅（1987—），女，河北邯鄲人，碩士研究生，從事有機化學研究。E-mail：gzh881011@163.com。

通信作者：周鴻立，博士，教授，從事天然產物研究與開發。E-mail：zhl67@126.com。

玉米須為禾本科玉蜀黍屬植物玉米的花柱及柱頭，含有黃酮類、多糖類、皂苷、生物堿、單寧酸、綠原酸、蛋白質、揮發性油、類固醇等多種生物活性成分[1-2]。現代藥理研究證明，玉米須具有顯著的利尿、降血糖、抑菌、降壓、增強免疫、抗癌等功效[3]。目前多糖、黃酮的提取方法主要包括浸漬法、煎煮法、回流提取法、連續回流提取法等，新興的提取方法包括超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、酶解法、超臨界流體萃取法、半仿生提取法（semi-bionic extraction，SBE） 、破碎提取法、空氣爆破法、亞臨界流體萃取等，其中半仿生提取法是模仿口服藥物在人體胃腸道中的轉運過程，采用選定pH值的酸性、堿性溶劑依次提取得到活性混合物[4]。目前，半仿生法提取法已被應用于提取柚皮總黃酮[8-9]（水提）、了哥王總黃酮[6]（醇提）、半邊蓮黃酮苷[7]（醇提）、葉下珠總黃酮[8]（水提）等，尚未見玉米須多糖、黃酮的半仿生浸提工藝研究報道。本研究運用半仿生法原理，以特定pH值的水、乙醇為溶劑，比較相同條件下傳統水提、醇提黃酮、多糖的提取率以及粗提取物的抗氧化性能，旨在為提高玉米須的藥用價值提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

玉米須（安徽省亳州市藥材市場），蕓香苷對照品（批號：0080-9705，純度>98%，購于中國藥品生物制品檢定所）。試驗用水為蒸餾水，無水乙醇、濃鹽酸、氫氧化鈉、濃硫酸、苯酚、無水氯化鋁均為分析純。752型紫外可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司）、FA2004N 電子天平（上海精密科學儀器有限公司）、GZX-GW-2-BS高溫干燥箱（上海博泰實驗設備有限公司）、PHS-3C型數字酸度計（上海理達儀器廠）、SHB-Ⅲ型循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）、RE-52A旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）、HH-6數顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 多糖含量測定 以葡萄糖為對照品，采用苯酚-硫酸法[10]測定玉米須多糖含量，得回歸方程：y=6.667 1x+0.020 2，r2=0.999 4，多糖質量濃度在20.84～125.04 μg/mL范圍內呈良好的線性關系。多糖提取率計算公式如下：

多糖提取率=樣品中多糖質量/藥材質量×100%。

（1）

1.2.2 黃酮的含量測定 以蕓香苷為對照品，采用氯化鋁顯色法[11]測定玉米須黃酮含量，得回歸方程：y=24.834x+0007 1，r2=0.999 5，黃酮質量濃度在10～30 μg/mL范圍內呈良好的線性關系。黃酮提取率計算公式如下：

黃酮提取率=樣品中黃酮含量/藥材質量×100%。

（2）

1.2.3 提取溶劑的制備 根據仿生學原理，人體消化道胃、小腸、大腸體液的pH值分別為2.0、7.5、8.3[9]。水作溶劑時，由于磷酸緩沖溶液與氯化鋁溶液混合后有白色的絮狀沉淀，經多次嘗試，改用5%鹽酸溶液、2%氫氧化鈉溶液調節pH值;乙醇作溶劑時用磷酸緩沖溶液調節pH值，備用。

1.2.4 樣品的處理與制備 玉米須清洗去塵，晾干，粉碎，過60目篩，稱取2.0 g置于250 mL圓底燒瓶中，先在pH值為2.0的溶劑中提取，冷卻過濾，收集濾液，所得濾渣再在pH值為7.5、8.3的溶劑中各提取1次，合并濾液，減壓濃縮得提取液，定容到100 mL容量瓶中備用。

1.2.5 正交試驗設計 半仿生水提取試驗選取提取時間、提取溫度、料液比3個因素，進行3因素3水平試驗，優選提取工藝條件;每試驗分別在pH值為2.0、7.5、8.3的水溶劑中提取1次，合并濾液后測定多糖、黃酮的含量（表1）。半仿生法醇提試驗選取提取時間、提取溫度、料液比、乙醇體積分數4個因素進行4因素4水平試驗，其他同水提試驗（表2）。

表1 半仿生水提正交試驗因素水平

水平

因素

A：時間

（h） B：溫度

（℃） C：料液比

（g ∶ mL）

1 1.0 70 1 ∶ 15

2 1.5 80 1 ∶ 25

3 2.0 90 1 ∶ 35endprint