煙葉唇柱苣苔組培苗的生根與移栽技術研究

潘梅+王景飛+戚華莎+黃賽+呂德任+姜殿強

摘要：以煙葉唇柱苣苔無菌芽苗為試材，研究基本培養基、糖濃度和不同生長素對其根系分化及移栽基質對組培苗移栽成活率的影響。結果表明，生根培養基為MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L時，組培苗生根率高達100%，生根數多;在珍珠巖基質中栽培的生根苗，成活率高，生長狀況好，是煙葉唇柱苣苔組培苗移栽的合適基質。

關鍵詞：煙葉唇柱苣苔;葉片;離體培養;生根;移栽;培養基

中圖分類號： Q943.1 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）04-0206-02

收稿日期：2014-06-06

基金項目：海南省科學事業費項目（編號：瓊財預[2013]131號）。

作者簡介：潘 梅（1962—），女，廣西隆安人，高級園藝師，從事植物組織培養與開發利用研究。Tel：（0898）65380711;E-mail：panmei200@sina.com。

通信作者：姜殿強，碩士，副研究員，從事藥用植物資源開發與利用研究。Tel：（0898）65393907;E-mail：dqjiang2004@163.com。

煙葉唇柱苣苔（Chirita heterotricha Merr.）是苦苣苔科唇柱苣苔屬多年生草本植物，是海南特有珍稀苦苣苔科植物，分布于海南的瓊中、瓊海、保亭、三亞、白沙、東方，生長于海拔約430 m的山谷林中或溪邊石上[1]。煙葉唇柱苣苔根狀莖粗約1.5 cm，頂部節間長1.0～2.2 cm;葉對生或簇生，橢圓或長橢圓形;花序腋生，不分枝或2～3回分枝，有花2～15朵;花冠淡紫色或白色，花期長達6個月，是一種適合觀賞和園藝的野生花卉，尚無人工栽培。煙葉唇柱苣苔可種子繁殖或葉片扦插繁殖，但受季節限制或繁殖系數低、繁殖速度慢，離體培養是種苗快速繁殖最為有效的方法。 組培苗的生根與移栽是組培快繁中最為關鍵的一環，關系到工廠化育苗能否成功。目前，關于煙葉唇柱苣苔組織培養的研究極少[2]，組培生根培養及出瓶移栽方面的研究更為有限。本試驗針對煙葉唇柱苣苔生根階段的培養基配方選擇和移栽基質的優化進行探討，旨在提供一套科學的生根移栽技術，為煙葉唇柱苣苔種苗快繁提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

無菌煙葉唇柱苣苔芽苗，由海南省農業科學院園林花卉研究所組培繁殖。

1.2 不同培養基配方對小苗生根的影響

除試驗項外，所有培養基中均添加蔗糖30 g/L、卡拉膠9.0 g/L，滅菌前pH值為6.0。取高約1.2 cm的小苗接入各生根培養基中，每袋接種3株，每處理均接種8袋，重復3次;接種后，在光照度1 500 lx、光照時間9 h/d、溫度（26±2） ℃條件下培養;接種30 d后統計生根率、生根數及株高。

1.2.1 基本培養基對小苗生根的影響 以1/4MS、1/2MS 、3/4MS、MS作為基本培養基，各添加NAA 0.5 mg/L。

1.2.2 糖濃度對小苗生根的影響 以MS+NAA 0.5 mg/L為基本培養基，蔗糖濃度分別設置為10、20、30、40、50 g/L共5種處理。

1.2.3 生長素種類對小苗生根的影響 以MS為基本培養基，分別添加NAA、IBA、IAA各0.5 mg/L，以不添加任何生長素的MS培養基作為對照。

1.3 移栽基質對組培苗成活率的影響

無根苗在生根培養基中培養30 d時，根系發達、有6～8張葉片，將其移入拱棚內煉苗7 d即可移栽。將苗從培養袋中取出，洗凈根部培養基，注意不要傷到根系和葉片，分別栽種到珍珠巖、河沙、表土和珍珠巖+河沙+表土配比為 1 ∶ 1 ∶ 1 的4種基質中，每種基質栽種35株，澆透定根水，用透明塑料薄膜覆蓋保濕，遮陽網遮陰，30 d后統計成活率。

2 結果與分析

2.1 不同培養基配方對小苗生根的影響

2.1.1 不同基本培養基對小苗生根的影響 由表1可見，在4種基本培養基中，組培苗生根率均達100%，但平均根數、株高及生長狀況有差異。在MS培養基中，平均生根數最多，達22.78條，與其他處理差異極顯著，株高最高，為 2.18 cm，植株生長狀況好，植株健壯，葉色深綠;1/2MS和3/4MS培養基誘導生根效果次之，二者的平均生根數和株高接近，平均根數分別為19.39、19.84條，株高分別為2.06、2.07 cm，兩者之間差異極不顯著，植株較健壯;1/4MS培養基生根數最少，只有17.08條，且植株矮小、細弱，株高僅 1.57 cm。煙葉唇柱苣苔小苗生根最適宜的基本培養基是MS。

表1 不同基本培養基對煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

基本培養基 生根率

（%） 根數

（條） 株高

（cm） 生長狀況

1/4MS 100A 17.00C 1.57B 較弱、葉綠

1/2MS 100A 19.39B 2.06A 較壯、葉綠

3/4MS 100A 19.84B 2.07A 健壯、葉深綠

MS 100A 22.78A 2.18A 健壯、葉深綠

2.1.2 不同糖濃度對小苗生根的影響 由表2可見，最低濃度和最高濃度的蔗糖生根效果均相對較差，10 g/L蔗糖時煙葉唇柱苣苔生根率和生根數最低，分別為74.6%和11.22條，其株高最高，為2.28 cm，植株細弱，葉片淡黃色，蔗糖為50 g/L時的生根率也較低，為90.0%，其生根數16.94條，植株矮小，葉色黃綠，莖基部膨大;蔗糖為 20、30、40 g/L時的生根率均達到100%，其中，30 g/L時的生根數最多，達到2022條，極顯著高于其他處理，其株高為2.14 cm，與10 g/L時的株高差異不顯著，且植株健壯，葉深綠色。煙葉唇柱苣苔小苗生根培養基的蔗糖濃度宜選用30 g/L。endprint

表2 不同蔗糖濃度對煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

蔗糖濃度

（g/L） 生根率

（%） 根數

（條） 株高

（cm） 生長狀況

10 74.6C 11.22D 2.28A 細弱、葉淡黃

20 100A 14.06C 2.09AB 較壯、葉大而綠

30 100A 20.22A 2.14AB 健壯、葉深綠

40 100A 13.17C 1.96B 健壯、葉深綠、莖基少量愈傷

50 90.0B 16.94B 1.95B 矮小、葉黃綠、莖基膨大

2.1.3 不同生長素種類對小苗生根的影響 由表3可見，IBA、IAA和NAA對煙葉唇柱苣苔小苗生根都有促進作用，生根率、根數和株高均高于對照;NAA生根效果最好，生根率達到100%，根粗，平均生根數19.95條，均極顯著高于IBA和IAA出來，植株健壯（圖1）;其次是IBA，生根率為94.74%，誘導的根細長，平均生根數9.94條，植株較弱，葉微黃;IAA誘導生根效果最差，生根率偏低，只有80.95%，根細，平均根數9.67條，植株矮小。因此，煙葉唇柱苣苔組培苗的生根培養基宜選用MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/ L。

表3 不同生長素種類對煙葉唇柱苣苔小苗生根的影響

生長素種類

（mg/L） 生根率

（%） 根數

（條） 株高

（cm） 生長狀況

CK 60.53D 5.94E 1.43C 細弱矮小、葉淡綠

IBA 94.74B 9.67B 2.13A 較弱、根細長、葉較黃

IAA 80.95C 9.94B 1.93B 較弱、根細、葉綠

NAA 100.00A 19.95A 2.19A 健壯、根粗、葉深綠

2.2 不同移栽基質對組培苗成活率的影響

由表4可見，不同基質移栽的煙葉唇柱苣苔組培苗成活率不同，處理間差異極顯著，以珍珠巖作為基質移栽成活率最高，為94.29%（圖2）;其次是河沙，為77.14%;最低的是表土，為22.86%，這可能是由于表土通透性較差，不利于根系生長;V珍珠巖 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1是在表土基質中加入了等體積的珍珠巖和河沙，基質的通透性有所改善，但成活率仍然較低，為37.14%，這可能與表土較為黏連有關。因此，選用珍珠巖作為基質移栽煙葉唇柱苣苔組培幼苗較好。

表4 不同移栽基質對煙葉唇柱苣苔組培苗生長的影響

基質 移栽株數

（株） 成活株數

（株） 成活率

（%）

珍珠巖 35 33 94.29A

河沙 35 27 77.14B

表土 35 8 22.86D

V珍珠巖 ∶ V河沙 ∶ V表土=1 ∶ 1 ∶ 1 35 13 37.14C

3 結論

本研究結果表明，使用無機鹽減量的MS培養基，其煙葉唇柱苣苔小苗的生根效果較差，全量MS培養基誘導生根效果最好，煙葉唇柱苣苔生根率達100%，生根數和生根率都極顯著高于3/4MS和1/2MS基本培養基，植株長勢良好;較低和較高濃度的蔗糖對煙葉唇柱苣苔組培苗生根效果較差，表現為生根率低、生根數量少，以30 g/L 蔗糖濃度誘根效果最好，生根率為100%，生根數達20.22條，極顯著高于其他處理;生長素IBA、IAA和NAA對煙葉唇柱苣苔培苗生根均有明顯的促進作用，極顯著高于對照處理，其中，以NAA的生根效果最好，其生根率高，生根數多，且根粗，植株健壯。綜合分析結果可知，煙葉唇柱苣苔生根最佳培養基為MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L。

在組培苗移栽生根過程中，基質的理化性質起至關重要的作用，其透氣性和含水量對移栽成活率的影響較大，并對誘發新根起關鍵作用[3]。在煙葉唇柱苣苔組培苗移栽過程中，由于表土吸水性和保水性強，比較黏結，通氣性差，使組培苗根系的生長受到影響，引起幼苗先萎蔫后死亡;在表土基質中加入等體積的珍珠巖和河沙，基質通透性有所改善，但由于透氣性仍較差，成活率仍然較低，可以考慮加大珍珠巖和河沙的比例以增強基質通透性;河沙的透氣性好，潔凈，但保水性差，所以成活率也較低;珍珠巖吸水和貯水能力均很強，且疏松、通透性好，有利于根系的生長發育，組培苗的成活率相對最高。因此，煙葉唇柱苣苔組培苗的移栽基質以珍珠巖為佳。

參考文獻：

[1]史佑海，徐世松，黃覺武. 海南苦苣苔科野生植物資源及其觀賞特性評價[J]. 北方園藝，2011（11）：79-82.

[2]湯正輝. 苦苣苔科植物的快速繁殖、離體保存及耐陰性研究[D]. 成都：四川大學，2007.

[3]尹淑蓮，郭偉珍，林 艷，等. 基質理化性質對組培苗生根狀況的影響[J]. 遼寧林業科技，2005（5）：18-19，24.endprint