結(jié)直腸癌患者血清的紫外光譜研究

朱正杰，歐陽(yáng)歡，王 欣，夏君君，李瑟若，方婷婷，余昌俊

結(jié)直腸癌患者血清的紫外光譜研究

朱正杰1，2，歐陽(yáng)歡2，王 欣3，夏君君1，李瑟若1，方婷婷1，余昌俊2

運(yùn)用紫外光譜技術(shù)對(duì)21例正常者和56例大腸癌患者血清進(jìn)行測(cè)試與分析，運(yùn)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析正常者與結(jié)腸癌患者血清中波長(zhǎng)為279 nm的吸光度與波長(zhǎng)為252 nm的吸光度比值（A279／A252）差異以及與臨床各病理指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果顯示，與正常人血清比較，A279／A252在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組腸癌患者明顯增高，在淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組的腸癌患者中明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但其與臨床各病理指標(biāo)如年齡、性別、腫瘤的浸潤(rùn)深度、腫瘤分化等無(wú)明顯相關(guān)性。

大腸癌；紫外光譜；血清；A279／A252

血清中包含蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)等生物有機(jī)大分子，可以及時(shí)反映人體的重大疾病［1］。目前已經(jīng)有一些疾病患者血清光譜分析的報(bào)道［2－4］，其中有紫外光譜應(yīng)用于食管癌［5］、乳腺癌［6］、胃癌［7］、肺癌［8］等的研究，取得了一些有意義的結(jié)果，表明血清的紫外光譜分析可能為腫瘤的篩查提供幫助。該研究擬通過(guò)比較正常者與大腸癌患者血清紫外光譜的波長(zhǎng)為279 nm的吸光度與波長(zhǎng)為252 nm的吸光度（absorbance，A）比值A(chǔ)279／A252差異，分析A279／A252與臨床各病理指標(biāo)的關(guān)系，進(jìn)而為結(jié)直腸癌臨床診斷和治療提供參考意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例資料 收集2013年11月～2014年7月安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸外科三病區(qū)56例結(jié)直腸患者與同時(shí)期體檢中心21例正常者血清。患者：男26例，女30例，年齡35～82（60.92± 11.22）歲；正常人：男10例，女11例，年齡49～62（56.76±3.25）歲；直腸癌患者34例，結(jié)腸癌患者22例，其中術(shù)后發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例，淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移25例；Dukes分期：A期7例，B期19例，C期17例，D期13例；高分化腺癌及高－中分化腺癌2例，中分化腺癌33例，中－低分化腺癌12例，低分化腺癌9例。以上腫瘤患者術(shù)前均進(jìn)行化療，術(shù)后病理均經(jīng)安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科醫(yī)師明確診斷。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 日本島津UV-2450紫外分光光度計(jì)，該紫外分光光度計(jì)為雙光路。

1.2 方法

1.2.1 紫外分光光度計(jì)參數(shù)設(shè)定 掃描范圍為210～450 nm，中速掃描，采樣間隔設(shè)置為0.5 nm。1.2.2 紫外分光光度計(jì)的基線(xiàn)校準(zhǔn) 參照池和樣品池中各加入3 ml蒸餾水進(jìn)行基線(xiàn)校準(zhǔn)。

1.2.3 紫外分光光度計(jì)具體測(cè)定 參照池中的蒸餾水含量不變，樣品池為30μl血清和2.97 ml蒸餾水均勻混合物。應(yīng)用光度計(jì)測(cè)定上述樣本的紫外光譜。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示，正常樣與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者血清的A279／A252的比較、臨床各病理指標(biāo)參數(shù)之間的關(guān)系的比較均采用非配對(duì)樣本t檢驗(yàn)分析。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)直腸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、未轉(zhuǎn)移組的血清與正常人血清的A279／A252關(guān)系所有結(jié)直腸癌患者和正常者血清紫外光譜的峰形均非常相似，見(jiàn)圖1。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)量正常者與結(jié)直腸癌患者血清的紫外光譜，得到每組樣本的A279／A252，通過(guò)計(jì)算，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者血清中的A279／A252明顯高于正常者，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌患者血清中的A279／A252明顯低于正常者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見(jiàn)圖2。

2.2 A279／A252與結(jié)直腸癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系A(chǔ)279／A252與結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤分化等無(wú)明顯相關(guān)性，而淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的A279／A252明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見(jiàn)表1。

3 討論

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是結(jié)直腸癌最常見(jiàn)的轉(zhuǎn)移方式，也是導(dǎo)致結(jié)直腸癌患者復(fù)發(fā)和術(shù)后生存率降低的重要因素。術(shù)前判斷患者淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移不僅可以初步判斷手術(shù)的范圍，而且對(duì)手術(shù)后輔助方案的制定有著重要的作用，有研究［9］證實(shí)淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的腸癌患者5年生存率為80%～90%，而淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者5年生存率僅為60%～68%，因此如何在術(shù)前開(kāi)展結(jié)直腸癌患者淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移的診斷對(duì)評(píng)估患者預(yù)后至關(guān)重要。

表1 結(jié)直腸癌患者血清樣本A279／A252與年齡、性別、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤分化的關(guān)系）

表1 結(jié)直腸癌患者血清樣本A279／A252與年齡、性別、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤分化的關(guān)系）

項(xiàng)目n A279／A252t值P值性別男26 1.782±0.128 0.822 0.415 0女30 1.748±0.179年齡（歲）＜60.9 23 1.789±0.131 1.021 0.312 0≥60.9 33 1.746±0.168腫瘤T分期T1－T2 10 1.713±0.171 1.159 0.251 0 T3－T4 46 1.775±0.150淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是31 1.873±0.083 9.637 0.000 1否25 1.628±0.106腫瘤分化程度高、中35 1.788±0.135 1.656 0.103 0中－低、低21 1.717±0.181

本研究顯示，與正常人血清比較，A279／A252在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組腸癌患者明顯增高，在淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組的腸癌患者中明顯下降，表明血清中A279／A252可能成為術(shù)前判斷腸癌患者淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移的參數(shù)。國(guó)內(nèi)外的一些學(xué)者也發(fā)現(xiàn)在不同腫瘤患者如食管癌、乳腺癌、惡性骨腫瘤血清中的波峰和波谷的吸光度比值低于正常人［4－7］。本實(shí)驗(yàn)對(duì)A279／A252與結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、腫瘤浸潤(rùn)深度、腫瘤分化對(duì)比顯示，均無(wú)明顯相關(guān)性。結(jié)直腸癌患者血清的光譜分析研究處于初步階段，仍需要大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)兩者之間的差異性，從而得到大量更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

綜上所述，血清A279／A252可能成為判斷結(jié)直腸癌的參數(shù)，可能為腫瘤淋巴結(jié)果是否轉(zhuǎn)移提供幫助。

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The serum ultraviolet spectrum research of colorectal cancer patients

Zhu Zhengjie1，2，Ouyan Huan2，Wang Xin3，et al
（1The Second Clinical College of AnhuiMedical University，3Basic Medical College of AnhuiMedical University，Hefei 230032；2Dept of Gastrointestinal SurgicalWard Three，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022

By using the ultraviolet spectrum technique，21 normal controls’and 56 cases of colorectal cancer patients’serum were tested and analyzed.Compare the normal controls and colorectal cancer patients’serum’s absorbance ratio between thewavelength of279 nm and thewavelength of252 nm by t-test analysis using SPSS 19.0. Correlations of the clinical pathological indicators were also analyzed.Compared with the normal serum，A279／A252colon cancer patientswere significantly higher in the lymph node metastasis group（P＜0.05），in patients with colorectal cancer lymph node transfer group decreased obviously（P＜0.05）.The correlations between the absorbance ratio and pathology and clinical indicators such as age，sex，tumor differentiation，tumor infiltration depth were not significant.

colorectal cancer；ultraviolet spectrum；serum；A279／A252

R 656.9；R 657.1

A

1000－1492（2015）08－1191－03

2015－04－29接收

安徽省高校省級(jí)優(yōu)秀青年人才基金重點(diǎn)項(xiàng)目（編號(hào)：2013SQRL021ZD）；安徽醫(yī)科大學(xué)博士科研資助基金（編號(hào)：XJ201228）；安徽醫(yī)科大學(xué)第三批校中青年學(xué)術(shù)骨干資助項(xiàng)目；安徽醫(yī)科大學(xué)7年制早期接觸科研（編號(hào)：2013ZQKY37）

安徽醫(yī)科大學(xué)1第二臨床學(xué)院、3基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，合肥230032

2安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸外科三病區(qū)，合肥230022

朱正杰，男，碩士研究生；

余昌俊，男，主任醫(yī)師，教授，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：yuchangjun321＠163.com；

王 欣，男，副教授，碩士生導(dǎo)師，責(zé)任作者，E-mail：wxchem＠ahmu.edu.cn