維生素B₆凝膠劑中維生素B6的含量測定

紀萬里 要輝 沈定文

【摘 要】 目的：建立維生素B6凝膠劑中維生素B6的含量測定方法。方法：采用卡波姆940為基質(zhì)，以維生素B6為主藥，制備成維生素B6凝膠劑，采用紫外分光光度法測定維生素B6的含量。結(jié)果：卡波姆為基質(zhì)制備的凝膠劑質(zhì)地均勻細膩、質(zhì)量穩(wěn)定；采用紫外分光光度法，以291nm作為維生素B6檢測波長，含量測定方法可行，維生素B6在5～25μg/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，平均回收率為98.79%，RSD為0.46%。結(jié)論：采用紫外分光光度法測定維生素B6凝膠劑中維生素B6含量方法簡單可行，結(jié)果準確。

【關(guān)鍵詞】 維生素B6凝膠劑；紫外分光光度法；含量測定

【中圖分類號】R927.2 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）09-0022-02

Abstract：Objective To establish the method for the content determination of vitamin B6 gels.Method Using the matrix of Carbopol 940 and vitamin B6-based medicine to prepare vitamin B6 gels，and using the UV to evaluate content determination of vitamin B6.Results Using carbopol gels as matrix to prepare the gels which is uniform，exquisite and stable quality.Using the UV spectrophotometry to 291nm as wavelength to detect the content determination of vitamin B6，which is feasible and the calibration curve are linear within a well range of vitamin B6 in 5-25μg/ml，the average recovery is 98.79%，RSD is 0.46%.Conclusion Using the UV spectrophotometry to detect the ointmen of vitamin B6，which is simple，feasible and accurate.

Keywords：Vitamin B6 gels；UV spectrophotometry；Content determination

維生素B6（Vitamin B6）又稱吡哆素、鹽酸吡哆辛，化學(xué)名為2-甲基-3-羥基-4，5-二羥甲基吡啶鹽酸鹽，本品固體在空氣中穩(wěn)定，但受熱可升華，是一種水溶性維生素，體內(nèi)主要與蛋白質(zhì)結(jié)合存在，包括吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺三種形式[1]。近年來，維生素B6被廣泛應(yīng)用于皮膚科疾病，在體內(nèi)參與蛋白質(zhì)的合成、脂質(zhì)的代謝[2]，用于治療凍瘡、皮膚紅腫、干燥皺裂、脂溢性皮炎、舌炎等疾病。維生素B6軟膏劑已在臨床上使用，本文將維生素B6制備成以卡波姆為基質(zhì)的凝膠劑，將解決其乳膏劑存在質(zhì)地不均勻、吸收減慢、涂布不均、污染衣物等問題，并研究維生素B6凝膠劑中維生素B6含量測定方法，為進一步工業(yè)化生產(chǎn)凝膠劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 UV-2401PC紫外分光光度計（日本島津）。

1.2 材料 維生素B6對照品（批號：100116-201103，中國藥品生物制品檢定所）；卡波姆940（藥用級，批號：20140711，廣州市漢普醫(yī)藥有限公司）；丙二醇、乙醇、鹽酸為分析純，其余原料均為藥用規(guī)格。

2 處方與制備

2.1 處方 維生素B6 12g，卡波姆940 10g，丙二醇120g，甘油100g，羥苯乙酯12g，三乙醇胺12g，加純化水至1000g。

2.2 制備 稱取處方量的卡波姆于水中靜置，溶脹過夜，加入丙二醇與甘油，滴加三乙醇胺，不斷地攪拌成凝膠基質(zhì)；將維生素B6溶于水中；將羥苯乙酯溶于乙醇，緩緩加入上述凝膠基質(zhì)中，加水至足量，攪勻，即得透明均一的維生素B6凝膠劑。

3 含量測定

3.1 空白基質(zhì)對照溶液的制備 按處方比例，配制空白基質(zhì)，稱取0.1g，加0.1mol/L的鹽酸溶液適量至100ml的容量瓶中，振搖，并稀釋至刻度，過濾后，取濾液作為空白基質(zhì)對照溶液。

3.2 維生素B6對照品溶液的制備 取維生素B6對照品適量，用0.1mol/L的鹽酸溶液溶解并配制成每1ml溶液中含10μg的維生素B6溶液，作為對照品溶液。

3.3 樣品溶液的制備 稱取樣品0.1g加0.1mol/L的鹽酸溶液適量至100ml的容量瓶中，振搖，并稀釋至刻度，搖勻，過濾后，取濾液作為樣品溶液。

3.4 波長的選擇 分別取上述三種溶液，于200～400nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果見圖1。結(jié)果發(fā)現(xiàn)對照品和樣品溶液在291nm波長處有最大吸收，空白基質(zhì)對照液在此波長處無吸收，由此可以采用0.1mol/L鹽酸溶液作空白，在291nm處測定維生素B6的含量，其空白基質(zhì)無干擾吸收。

3.5 標準曲線的繪制 精密稱取維生素B6對照品25mg，置于100ml的容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液適量溶解稀釋至刻度，作為對照品貯備液，分別取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml的對照品貯備液于50ml容量瓶中，加0.1mol/L的鹽酸溶液適量溶解稀釋至刻度，搖勻。以空白基質(zhì)的0.1mol/L鹽酸溶液作空白，在291nm波長處測定吸光度，結(jié)果表明在5～25μg/ml范圍內(nèi)，吸光度（A）與濃度（C）呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：A=0.025C+0.07，r=0.9990（n=5），表明該方法符合含量方法學(xué)驗證的要求。

3.6 精密度試驗 取“3.2”項下的維生素B6對照品溶液，照紫外分光光度法連續(xù)測6次，以吸光度計算，維生素B6吸光度的RSD為0.50%。結(jié)果表明該方法重復(fù)性較好。

3.7 回收率試驗 為了考察該含量測定方法的準確度，進行了回收率試驗，按處方量的80%、100%、120%，精密稱取維生素B6對照品，分別加入空白基質(zhì)按照樣品的制備方法制成供試品，按“3.3”項下樣品的制備方法，同法測定，計算回收率，結(jié)果回收率良好（見表1）。表明采用該方法測定維生素B6的含量準確度高，含量可控。

3.8 樣品含量測定 取自制樣品3批（20140901、20140902、20140903），按“3.3”項下樣品的制備方法，同法測定，含量分別為98.32%、98.41%、98.37%。

3.9 樣品的穩(wěn)定性試驗

3.9.1 離心試驗 取制備好的3批樣品10g，分別裝入離心管中，以3000rpm離心，結(jié)果該凝膠劑無分層現(xiàn)象，穩(wěn)定性較好。

3.9.2 加速試驗[3] 將樣品置于將樣品置于40℃，75%RH的藥品穩(wěn)定性試驗箱中，放置6個月，采用紫外分光光度法測定其三批樣品含量，含量未發(fā)生變化，性狀透明均勻，未發(fā)生分層現(xiàn)象。

3.9.3 長期試驗[3] 將樣品置于25℃，60%RH的藥品穩(wěn)定性試驗箱中，放置6個月，其含量、性狀也未發(fā)生變化。表明該凝膠劑在6個月內(nèi)穩(wěn)定。

4 討論

凝膠劑作為新型的外用制劑，具有良好的生物相容性、易于涂布/局部給藥后易于吸收、不污染衣物、穩(wěn)定性好的特定[4]。卡波姆是丙烯酸與烷基蔗糖交聯(lián)而成的丙烯酸聚合物，是一種廣泛應(yīng)用的高分子基質(zhì)材料。卡波姆含有大量的羧基，可被堿性物質(zhì)中和，當(dāng)羧基游離時，由于負電荷相互排斥作用，使分子鏈呈現(xiàn)彌散伸展的狀態(tài)，隨后呈極大的膨脹狀態(tài)，具有強大的粘性和良好的載藥功能，同時具有良好的增稠性、成膜性[5]。研究表明，當(dāng)羧基游離時，凝膠劑才具有較強的黏附能力[6]。本文采用水溶性的卡波姆作為基質(zhì)，制成維生素B6凝膠劑后并采用了紫外分光光度法測定其含量，由于空白基質(zhì)溶液在291nm處出無吸收，排除了干擾，使含量測定具有專屬性，同時進行含量方法學(xué)驗證，表明該方法重復(fù)性好，準確度高。在處理樣品時，由于卡波姆為高分子材料，溶液出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，最后采用0.1mol/L的鹽酸溶液作為溶劑，溶液較為澄清，利于紫外法的測定，從而排除了干擾。通過以上試驗，表明采用紫外分光光度法測定該凝膠劑中維生素B6的含量，簡單可行，質(zhì)量可控，結(jié)果準確，可為工業(yè)化生產(chǎn)凝膠劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

參考文獻

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[3]國家藥典委員會.中國藥典（二部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄178-179.

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（收稿日期：2015.02.12）