法醫DNA常量檢材Chelex—100提取法探究

吳俊蓉 李宗壯

【摘要】目的：對Chelex-100提取法在常量檢材DNA提取中的應用情況進行研究。方法：選取20份送檢的常量檢材，包括煙蒂、染血棉簽、紗條、FTA卡片等檢材，采用Chelex-100提取法對唾液、血痕進行檢測，并對檢測情況進行整理分析。結果：1組DAN濃度為2.31±0.2ng/μl；2組DNA濃度為2.28±0.4ng/μl；3組DNA濃度為2.49±0.3ng/μl，不同濃度的Chelex-100檢測的DNA濃度比較無明顯差異，且均能夠達到檢驗目的。結論：低濃度Chelex-100在常量檢材DNA提取中即可取得良好的效果，能夠準確的提取DNA。

【關鍵詞】常量檢材；Chelex-100提取法；DNA

法醫DNA檢驗技術是一種分子生物學檢驗方式，其主要是利用DNA的獨有性和個體識別性進行親子鑒定和嫌疑人鑒定。法醫DNA檢驗的主要對象為生物物證，也就是人體中的細胞核基因組，其通常存在于血液、唾沫中。目前，最常用的檢測方法為Chelex-100提取法，主要是由于此種檢測方式成本較低、操作方便、時間較短。筆者將對Chelex-100提取法在常量檢材DNA提取中的作用進行研究。

1.資料與方法

1.1一般資料

選取20份送檢的常量檢材，包括煙蒂、染血棉簽、紗條、FTA卡片等檢材，其中煙蒂5份、棉簽5份、紗條5份、FTA卡片5份。根據Chelex-100的濃度將所有檢材分為三組，濃度5%為1組；10%為2組；15%為3組。1組將5gchelex-100溶液加純水溶解至100ul；2組將10g chelex-100加純水溶解至100ul；2組將15g chelex-100溶液加純水溶解至100ul。

1.2檢測方法

1.2.1血液DNA檢測：將適量檢材放置于離心管內震蕩30s，放置于溫室中浸泡，而后在13，000rpm條件下進行離心震蕩，留取20μl基底液，而后加入Chelex-100和PK5-20μl，在56攝氏度下放置30-90min；在100攝氏度下放置5-20分鐘，最后在10，000rpm條件下離心震蕩2min，取上層清液備用。

1.2.2唾液DNA檢測：將唾液斑檢材將之與離心管中，加入0.5ml純水，混勻，溫室中浸泡30min，在13，000rpm條件下離心震蕩3min，去除上清液；……