海南香大蕉叢枝菌根真菌研究

李嵐嵐 李增平

摘 要 對海南省香大蕉根際土樣中的AMF資源進行調查，從14個縣（市）采集的43份土樣中分離鑒定出9個屬共45種AMF。其中無梗囊霉屬（Acaulospora）16種、球囊霉屬（Glomus）10種、環孢囊霉屬（Kuklospora）1種、巨孢囊霉屬（Gigaspora）7種、盾巨孢囊霉屬（Scutellospora）2種、Dentiscutata 4種、Racocetra 3種、Quatunica 1種、Cetraspora 1種。無梗囊霉屬（Acaulospora）為海南香大蕉根際AMF的常見屬，雙網無梗囊霉（A. bireticulata）、疣狀無梗囊霉（A. tuberculata）為常見種。不同香大蕉根際土樣中的AMF種類不盡相同。

關鍵詞 海南；香大蕉；叢枝菌根真菌；多樣性

中圖分類號 S668.1；S154.3 文獻標識碼 A

Species Diversity of Arbuscular Mycorrhizal Fungus Associated

with Musa spp. in Hainan Province

LI Lanlan， LI Zengping*

College of Environment and Plant Protection， Hainan University， Haikou， Hainan 570228， China

Abstract The species diversity of AMF in the rhizosphere of Musa spp.， Hainan， was investigated. Forty-five species belonging to nine genera were isolated and identified from 43 rhizosphere soil samples of 14 counties，including 16 species of Acaulospora， 10 species of Glomus， 7 species of Gigaspora， 4 species of Dentiscutata， 3 species of Racocetra， 2 species of Scutellospora， 1 species of Kuklospora， 1 species of Quatunica and 1 species of Cetraspora. Acaulospora was the common genera， otherwise， A. bireticulata and A. bireticulatain were the common species in the rhizosphere of Musa spp.

Key words Hainan； Musa spp.； Arbuscular mycorrhizal fungus（AMF）； Species diversity

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.09.014

香大蕉[1]為芭蕉科（Musaceae）芭蕉屬（Musa）的一類熱帶水果，包括香蕉（Musa nana Lour.，AAA Group Cavendish）、大蕉（M. paradisiaca Linn.，ABB Group Dajao）、粉蕉（M. sapientum L. AAB Group Fenjao）等，是僅次于水稻、小麥、玉米的世界第四大糧食作物[2]，也是僅次于柑橘的第二大水果， 更是世界水果貿易量最大的鮮果[2-3]。叢枝菌根（Arbuscualr mycorrhiza fungus，AMF）屬于菌物界、球囊菌門，是一類古老的能與絕大多數植物根系建立互利共生關系的專性活體營養型真菌，對植物的進化、分布、生長發育及增強植物的抗病性、抗逆性等方面發揮著重要作用[4]，目前，國內對于香大蕉叢枝菌根真菌的研究較少，且比較簡單，僅有張科立等[5]對海南儋州、樂東、云龍、感城、興隆5個香蕉主栽區的香蕉叢枝菌根真菌進行過簡單的種類調查，分離到Glomus、Paraglomus和Gigaspora的菌根真菌；國外Joyce Mnyazi Jefwa等[6-7]于2012年報道了從肯尼亞50個農場采集香蕉根際土壤分離鑒定到Acaulospora、Archaespora、Glomus、Scutellospora、Gigaspora的AMF，其中以Acaulospora孢子密度最大。

2000年李敏等[8]用Gigaspora rosea、Glomus mossea和Glomus versiforme接種盆栽西瓜，能顯著減輕Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum引起的枯萎病的發病率并促進西瓜生長。王倡憲等[9]2012年用Glomus versiforme與Glomus intraradices接種“津綠3號”黃瓜，不僅能促進黃瓜幼苗生長，還能降低Fusarium oxysporum f.sp.niveum引起的枯萎病的發病率。香大蕉是海南省產量最大的熱帶水果，是農民收入的支柱產業之一，在全省國民經濟中占有重要的位置[10-17]，然而近年來越來越嚴重的香蕉枯萎病極大地限制了海南香大蕉產業的健康發展。筆者對海南省香大蕉種植區香蕉、芭蕉、粉蕉、皇帝蕉、野芭蕉根際土壤中的AMF物種多樣性進行了較為全面的調查，以便進一步摸清海南香大蕉根際的AMF種類，為將來篩選抗香蕉枯萎病的有益AMF提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2013年1月至2014年11月間，多次在海南省海口市、臨高縣、澄邁縣、瓊海市、儋州市、昌江縣、東方市、樂東縣、五指山市、瓊中縣、保亭縣、三亞市、萬寧市、白沙縣等14個市縣共采集土樣43份，采用五點取樣法，在20 m×20 m的面積內隨機選擇5株生長壯旺的香大蕉植株，從其根際采取土樣，首先去除地表面的雜草、枯枝落葉等覆蓋物（1～3 cm），后挖取0～15 cm深的土壤（約2.5 kg）裝入布袋中。樣品采回后倒出放在陰涼通風處自然晾干，去除碎石、枯枝等雜物后涼干保存備用。采集土樣時一同采集香大蕉根樣，用清水洗凈，放入FAA固定液中低溫保存，帶回室內進行菌根染色觀察。

1.2 菌根染色觀察

將采集回來的根樣從FAA固定液中取出，剪成1 cm長的小段，用5%的KOH溶液浸泡，放入90 ℃恒溫水浴鍋中加熱約1 h（根據根的老幼程度、粗細和硬度，適當延長或縮短水浴加熱時間；若根樣保存在FAA固定液中超過2 h，適當延長水浴加熱時間）；水浴加熱約1 h后，取出根樣洗凈，移入2%HCl溶液中酸化5 min，用清水洗凈；再用0.01%的品紅染液常溫浸泡染色24 h，或經90 ℃水浴加熱1 h，取出根樣用清水洗凈，經乳酸脫色，最后排列在載玻片上，蓋上蓋玻片進行壓片鏡檢。

1.3 AMF的分離與鑒定

1.3.1 AMF的分離 取風干的土樣50 g，放入大燒杯中加水浸泡約30 min，根據土質的不同，適當延長浸泡時間，浸泡一段時間后過雙層分樣篩（上層篩孔徑1 mm，下層篩400目），反復洗刷土樣，收集下層篩中的殘留物于大號離心管中，在離心機中以3 000 r/min的速度離心3 min，去掉上清液后加入45%的蔗糖溶液，攪拌均勻后迅速放入離心機，以1 500 r/min的速度離心1 min，取出將上清液倒入400目篩中，收集殘留物于培養皿中，在解剖鏡下收集并計數所分離得到的孢子。

1.3.2 AMF的鑒定 將分離得到的孢子用水作為浮載劑進行觀察，然后加入Melzer's、PVLG染液制片，于光學顯微鏡下觀察孢子的形狀、顏色、孢壁顏色、孢壁結構、組成孢子內含物等，測量孢子大小、孢壁厚度。再于OLYMPUS BX51TRF生物攝影顯微鏡下拍照。參考最新分類系統[18]和國際叢枝菌根真菌菌種保藏中心（INVAM，http：//invam.caf.wvu.edu）提供的AMF各個種的描述和圖片，王幼珊著[19]《中國叢枝菌根真菌資源與種植資源》中AMF種的描述及國內相關文獻進行種類鑒定。

2 結果與分析

2.1 菌根染色觀察

對野外采集的香大蕉根系進行菌根染色后，在粉蕉、香蕉、芭蕉根內均觀察到明顯的AMF菌絲、近球形和長橢圓形的泡囊，結果表明海南香大蕉根系與AMF建立了良好的共生關系（圖1）。

2.2 AMF的種類及分布

2.2.1 各土樣中AMF種類情況 對43份土樣進行AMF的分離鑒定，初步確定有9個屬共45種，其中Acaulospora 16種、Glomus 10種、Kuklospora 1種、Gigaspora 7種、Scutellospora 2種、Dentiscutata 4種、Racocetra 3種、Quatunica 1種、Cetraspora 1種（表1）。

從表1可以看出，海南香大蕉根際土壤中的AMF種類非常豐富。海南不同香大蕉根際土壤中的AMF種類有一定差別，所采集回來的土樣中，以粉蕉中篩到的AMF種類最多，共35種，其次是芭蕉和野芭蕉各20種，香蕉最少，僅11種，在所篩到的菌根真菌中，以Acaulospora較為常見。

2.2.2 同一地區不同香大蕉根際土樣中AMF的種類情況 同一地點不同蕉類植物，篩到的AMF數量和種類都有一定的差別，在海口海甸校區采集的香蕉、粉蕉、芭蕉根際土樣中，篩到的AMF孢子種類和數量都有不同，以芭蕉根際土樣中所含的孢子種類最多，有7個種，并且都屬于Gigasporales，該屬的各個種孢子數量都比較少；香蕉根際土樣中篩到2種，以A. tuberculata為常見種（本文中指在該土樣中篩到的頻率較高、數目相對比較多的種）；粉蕉根際土樣中篩到4個種，各個種所含孢子數量都比較少。臨高加來采集的香蕉土樣中篩到2種，以G. tenebrosum為常見種；粉蕉土樣中篩到3個種，以A. mellea為常見種。萬寧石梅采集的芭蕉土樣中篩到11種類型的孢子，以A. tuberculata、A.bireticulata為常見種；粉蕉土樣中篩到9種類型的孢子，以A. tuberculata、A. bireticulata、G. tenebrosum為常見種。瓊海塔洋采集回來的香蕉土樣中沒有篩到孢子；粉蕉土樣中僅篩到A. bireticulata。儋州采集的野芭蕉土樣中篩到的AMF孢子種類和數量最多。澄邁白蓮采集回來的芭蕉土樣中篩到2個種，以A. bireticulata為常見種；粉蕉土樣中篩到3個種，以A. bireticulata為常見種。白沙邦溪采集回來的香蕉土樣和粉蕉土樣中篩到的AMF種類數量相差不大，但是所含的孢子類型卻不完全相同（表2）。

2.3 香大蕉根際部分AMF種類記述

從香大蕉根際土樣中鑒別出的9個屬AMF，以Acaulospora種類最多，其次是Glomus，Gagisporales 各個屬種類相對較少（見圖2）。

2.3.1 無梗囊霉屬Acaulospora （1）雙網無梗囊霉[21-23]Acaulospora bireticulata Rothwell& Trappe.（見圖2-1）

孢子球形至橢球形，（120～150）μm×（150～180）μm，幼嫩孢子透明，成熟孢子淡黃色，易碎；孢子表面被有明顯的雙層網紋，網紋格呈多邊形。孢子壁有2層壁或不易區分的多層壁；Melzer's試劑染色反應不明顯。

標本號：20130430-WNDSL-YBJ-16、20130430-WNDSL-YBJ-17、20130430-WNDSL-YBJ-20、20130430-WNDSL-YBJ-64、20130430-WNDSL-YBJ-05、20131012-WNSMGSLK-FJ-15、20131012-WNSMGSLK-BJ-09、20131012-WNSMGSLK-BJ-23、20131013-BTYND-FJ-01、20131013-SY-FJ-01、20140622-DZLYSTD-FJ-03、20140623-DZLYBQ-FJ-03、20140907-CJDD-FJ-02、20140621-DZLYDDD-XJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-01、20141115-DFBSLGL-XJ-02、20141116-LDHLBB-FJ-03等。

（2）詹氏無梗囊霉[22-23，25]Acaulospora gerdemannii Blaszk（見圖2-2）。

孢子近球形，淺黃色至黃棕色，（150～200）μm×（150～250）μm，孢子外輪廓不整齊，表面不光滑、不規則。孢子壁：L1具有腦紋狀旋繞，破口邊緣不整齊；L2呈層疊鱗片狀，不規則多角形。

標本號：20130109-LGGSLK-FJ-08、20130109-LGGSLK-FJ-30、20131012-WNSMGSLK-FJ-38、20131012-WNSMGSLK-BJ-04、20131012-WNSMGSLK-BJ-21、20131013-SY-FJ-12。

宿主：粉蕉、芭蕉。

（3）蜜色無梗囊霉[23，28]Acaulospora mellea Spain & Schenck（見圖2-3）。

孢子球形、近球形或橢圓形，淺黃色至黃棕色，大小（100～120）μm×（110～150）μm。孢子壁：三層，L1于Melzer's試劑中呈淺黃色；L2于Melzer's 試劑中無明顯變化；L3于Melzer's試劑中呈現紫紅色。

標本號：20130430-WNDSL-YBJ-34、20130430-WNDSL-YBJ-43、20131012-WNSMGSLK-BJ-02、20130626-LGJL-FJ-04、20140623-DZLYBQ-BJ-01、20140623-DZLYBQ-FJ-02、20140624-DZGC-BJ-01、20141115-DFBSLGL-FJ-08等

宿主：粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

（4）瑞氏無梗囊霉[23，30]Acaulospora rehmii Sieverding & Toro.（見圖2-4）。

孢子淺黃色至淡棕色，球形，直徑90～175μm。孢子壁：L1黃色至紅棕色，外表具迷宮似的紋飾；L2為透明的均一壁或膜狀壁；L3、L4均透明。

標本號：20131012-QHBSL-FJ-06、20131012-QHBSL-FJ-09、20130626-LGJL-FJ-03、20131013-SY-FJ-01、20131013-SY-FJ-04、20131013-SY-FJ-11、20131013-SY-FJ-22、20131013-SY-FJ-26、20140624-DZGC-BJ-04、20140907-BSBX-XJ-02、20141115-DFBSLGL-XJ-03等。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（5）疣狀無梗囊霉[20，22，31]Acaulospora tuberculata D.P.Janos & J.M.Trappe（見圖2-5）。

孢子黃棕色至紅棕色，球形或近球形，直徑150～250 μm，孢子表面光滑。孢子壁三層（Ll、L2、L3）：Ll易逝壁，無色，常緊貼于L2，與Melzer's試劑無反應；L2層狀，黃棕色，至紅棕色，表面布滿瘤狀突起，在Melzer's試劑中不反應；L3黃色至黃棕色，與Melzer's試劑無反應。

標本號：20130430-WNDSL-YBJ-19、20130430-WNDSL-YBJ-23、20130430-WNDSL-YBJ-29、20130430-WNDSL-YBJ-45、20130430-WNDSL-YBJ-47、20130430-WNDSL-YBJ-03、20130430-WNDSL-YBJ-04、20131012-WNSMGSLK-FJ-20、20131012-WNSMGSLK-BJ-13、20131014-WZS-YBJ-21、20140517-WNSM-FJ-02、20140907-CJ-FJ（HB）-01、20141115-DFBSLGL-FJ-02、20141115-DFBSLGL-FJ-04等。

宿主：粉蕉、野芭蕉、芭蕉。

2.3.2 環孢囊霉屬，刺環孢囊霉[32] Kuklospora spinosa B.P. Cai， Jun Y. Chen， Q.X. Zhang & L.D. Guo.（見圖2-6）。

孢子淡橙棕色，球形或近球形，直徑100～150 μm。孢子壁三組（Sw、Mw、Iw）。Sw三層：Swl易逝壁，無色，成熟孢子中脫落；Sw2層狀，淺黃色，厚3～5 μm，表面密布刺狀突起。Mw兩層：膜狀，無色。Iw兩層（Iwl、Iw2）：Iwl膜狀，無色，表面布滿珠狀紋飾；Iw2膜狀，無色。

標本號：20130109-LGGSLK-FJ-06、20130109-LGGSLK-FJ-26、20140418-HDXQJD-XJ-04。

宿主：粉蕉、香蕉。

2.3.3 球囊霉屬Glomus （1）象牙白球囊霉[33]Glomus eburneum L.J.Kennedy.（見圖2-7）。

孢子球形，直徑100～130μm，透明至淡黃白色。孢子壁：兩層（L1、L2），L1無色透明；L2透明至淺黃色，孢子壓碎易皺縮，厚2～3 μm。

標本號：20131012-QHBSL-FJ-01、20131012-QHBSL-FJ-08、20131013-BTYND-FJ-06。

宿主：粉蕉。

（2）蔭性球囊霉[34]Glomus tenebrosum S.M.Berch & J.A.Fortin（見圖2-8）。

孢子球形或近球形，200～250 μm。黃棕、紅棕或深棕色。孢子壁：兩層。L1無色，常缺失；L2較厚，斷層處常呈黃色或深棕色。連孢菌絲1根，在孢子基部加寬，隨菌絲的延伸由深棕色、黃色漸變至黃色、無色。連點開放。

標本號：20130109-LGGSLK-FJ-10、20130109-LGGSLK-FJ-14、20130109-LGGSLK-FJ-17、20130109-LGGSLK-FJ-21、20130109-LGGSLK-FJ-27、20130626-LGJL-XJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07、20130109-LGGSLK-FJ-35、20130625-DZJYJD-YBJ-11、20130625-DZJYJD-YBJ-23、20131012-WNSMGSLK-FJ-25、20131014-WZS-YBJ-13。

宿主：粉蕉、香蕉、野芭蕉。

2.3.4 巨孢囊霉屬Gigaspora （1）Gigaspora aldia[35]N.C.Sehenck&G.S.Smith（見圖2-9）。

孢子透明至淺黃色；球形至近球形，大小200～260 μm。孢壁三層：L1為表面光滑；L2于Melzer's染液中呈紅棕色至暗紫紅色。產孢細胞淺黃色，與孢子間連點封閉。

標本號：20130625-DZJYJD-YBJ-02、20130625-DZJYJD-YBJ-08、20130625-DZJYJD-YBJ-10、20131014-WZS-YBJ-05、20131014-WZS-YBJ-18、20140907-BSBX-FJ-04、20140907-BSBX-FJ-05、20130625-DZJYJD-YBJ-25、20130625-DZJYJD-YBJ-26。

宿主：粉蕉、香蕉、野芭蕉。

（2）微白巨孢囊霉[36]Gigaspora albida N.C.Sehenck & G.S.Smith.（見圖2-10）。

孢子無色透明至淡黃色，球形、近球形，大小240～250 μm，表面光滑。孢子壁：L2在Melezr's試劑中變成深紅色。產孢細胞透明，于Melzer's試劑中變成淡黃色。

標本號：20131012-WNSMGSLK-FJ-03、20131012-WNSMGSLK-FJ-34、20140517-WNSM-FJ-09、20130625-DZJYJD-YBJ-36、20130625-DZJYJD-YBJ-37、20131012-WNSMGSLK-BJ-27、20140622-DZLYSTD-FJ-02、20140623-DZLYBQ-FJ-05等。

宿主：粉蕉、芭蕉、野芭蕉。

（3）珠狀巨孢囊霉[35]Gigaspora margarita W. N. Becker & I. R. Hall， 1976.（見圖2-11）。

孢子多呈白色或乳白色；孢子球形至近球形，大小260～400 μm。孢壁三層：L1表面光滑無紋飾；L2于Melzer's染液中呈暗紅棕色至暗紫紅色；L3內表面分布疣狀突起，芽管多從突起處萌發。產孢細胞淺黃色。

標本號：20140508-HDXQJD-BJ-02、20140508-HDXQJD-BJ-04、20130625-DZJYJD-YBJ-18、20140508-HDXQJD-BJ-05、20140508-HDXQJD-BJ-06。

宿主：芭蕉、野芭蕉。

2.3.5 盾巨孢囊霉屬Scutellospora （1）美麗盾巨孢囊霉[23，40]Scutellospora calospora（T.H.Nicolson & Gerd.）C. Walker & F. E. Sanders.（見圖2-12）。

孢子透明，球形至長橢圓形，大小120～220 μm。孢壁三組：第一組壁于PVLG染液中呈暗紅紫色；第二組壁于PVLG染液中不被染色；第三組壁于PVLG染液中呈淡粉色。發芽盾室淺黃色。產孢細胞透明至淺黃色；與孢子連接處封閉。

標本號：20130611-QSLQLW-FJ-04、20130611-QSLQLW-FJ-09、20130611-QSLQLW-FJ-18、20131014-WZS-YBJ-17、20131012-WNSMGSLK-FJ-14。

宿主：粉蕉、野芭蕉。

（2）雙紫盾巨孢囊霉[35]Scutellospora dipurpurescens J.B.Morton & R.E.Koske（見圖2-13）。

孢子淺黃色；孢子球形至橢圓形，大小150～200 μm。孢壁三組：Ow三層，Mw于Melzer's染液中呈粉紅色。Iw于Melzer's染液中呈淡粉紅色。發芽盾室淺黃色。產孢細胞透明至淺黃色；與孢子連接處封閉。

標本號：20131013-SY-FJ-10。

宿主：粉蕉。

2.3.6 Dentiscutata （1）Dentiscutata nigra[22-23，35]（J.F.Redhead）Sieverd，F.A.Souza & Oehl=Scutellospora nigra J.F.Redhead.（見圖2-14）。

孢子黑色；球形，大小300～520 μm。孢壁三組，孢壁具有明顯的網格狀紋飾：Ow三層，Ow-L2具有網格狀紋飾，網格內分布細小的突起。Mw兩層，無染色反應。Iw兩層，發芽盾室成熟前不明顯。產孢細胞棕色至紅棕色，與孢子連接處封閉。

標本號：20140624-DZGC-XJ-01、20140624-DZGC-BJ-03、20140907-CJDD-FJ-05、20140907-BSBX-FJ-06。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（2）Dentiscutata reticulata[35]（Koske， D.D.Mill & C.Walker）Sieverd， F.A.Souza & Oehl=Scutellospora reticulate Koske， Miller&Walker.（見圖2-15）

孢子暗棕色；球形，大小（350～450）μm×（250～340）μm。孢壁三組，孢子表面具有顯著的網格狀紋飾：表面具有凸起的筆直或彎曲的嵴狀結構，且互相連通，形成網格狀紋飾；網格呈4至8邊形；嵴間密布滿突起。發芽盾室環形至腎形。產孢細胞上有鉤狀枝。

標本號：20131012-WNSMGSLK-BJ-24、20140517-WNSM-FJ-01、20140517-WNSM-FJ-07、20140517-WNSM-FJ-13、20140624-DZGC-BJ-02、20140907-CJDD-FJ-07、20140907-BSBX-FJ-06等。

宿主：粉蕉、芭蕉。

2.3.7 Racocetra （1）Racocetra fulgida[35]（Koske & C. Walker）Oehl， F.A.Souza& Sieverd=Scutellospora fulgida Koske & C.Walker.（見圖2-16）。

孢子白色，偶見乳黃色；近球形，大小120～240 μm。孢壁兩組：Ow三層，光滑無紋飾；Ow-L3在Melzer's染液中呈淺棕色；Iw無染色反應。產孢細胞透明至淡黃色。

標本號：20140508-HDXQJD-BJ-09、20140623-DZLYBQ-FJ-01、20140907-BSBX-XJ-03。

宿主：粉蕉、香蕉、芭蕉。

（2）Racocetra gregaria[35]（N. C. Schenck & T. H. Nicolson）Oehl， F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora gregaria T. H. Nicolon & N. C. Schenck.（見圖2-17）。

孢子球形，暗紅棕色；大小400～500 μm。孢壁兩組，具有紋飾：Ow三層，Ow-L1表面布滿鈍圓疣狀突起；Ow-L2于Melzer's染液中呈暗紅棕色；Iw兩層。發芽盾室淺黃色，邊緣整齊，褶皺少。產孢細胞淺黃色，與孢子連接處封閉。

標本號：20140508-HDXQJD-BJ-01。

宿主：芭蕉。

2.3.8 Quatunica erythropus[22，35] （Koske & C.Walker） F.A.Souza， Sieverd & Oehl，=Scutellospora erythropus Koske & C.Walker.（見圖2-18）。

孢子橙棕色，球形或近球形，大小（170～500）μm×（205～600）μm。孢壁光滑四組：Ow三層，Mw二組四層；Iw兩層，Iw-L2于Melzer's染液中呈紫色或深紫色。發芽盾室黃棕色。產孢細胞倒卵圓形至棍棒形，黃棕色，與孢子連接處封閉。

標本號：20140508-HDXQJD-BJ-03、20140508-HDXQJD-BJ-10、20130625-DZJYJD-YBJ-01、20130625-DZJYJD-YBJ-03、20130625-DZJYJD-YBJ-07。

宿主：芭蕉、野芭蕉。

2.3.9 Cetraspora pellucida[22，35] （T.H.Nicolson & N.C.Schenck）Oehl， F.A.Souza & Sieverd=Scutellospora pellucida T.H.Nicolon & N.C.Schenck.（見圖2-19）。

孢子透明至黃色；球形或近球形，大小120～240 μm。孢壁三組，產孢細胞透明至淺黃色，與孢子間連點封閉。發芽盾室透明至淺棕黃色，邊緣褶皺。

標本號：20140508-HDXQJD-BJ-13。

宿主：芭蕉。

2.3.10 多孢囊霉屬Diversispora sp.1（見圖2-20）。

孢子直徑約為263 μm，橙色，球形，是具有球囊霉型的孢子，孢壁結構為：一層薄的外壁、層狀壁和在Melzer's試劑中不會被染色的韌性內壁，無發芽盾室。

標本號：20140517-WNSM-FJ-08。

宿主：粉蕉。

3 討論與結論

從研究結果來看，海南不同地區香大蕉根際的菌根真菌種類存在明顯差異，其中以海口、澄邁、萬寧石梅高速路口、臨高加來采集土樣中的AMF種類差異最為明顯。海口采集的芭蕉根際土樣中Gigasporales種類最豐富；澄邁采集回來的土樣中，以粉蕉根際土樣中的AMF種類最豐富，Glomus為常見屬；萬寧石梅以粉蕉根際土樣中的AMF種類最豐，Acaulospora為常見屬；臨高加來采回的香蕉根際土樣僅篩到Acaulospora的真菌；瓊海、儋州光村、昌江、東方、樂東等地采集回來的土樣篩到的AMF種類和數量相對較少。在所有采集回來的土壤樣品中臨高加來的香蕉和粉蕉、昌江十月田的香蕉、東方八所的香蕉和樂東東孔的粉蕉屬人工種植，樣品中篩到的AMF數量和種類相對較少，表明農事耕作對于AMF真菌的定殖和產孢會產生一定影響；在昌江采集患香蕉枯萎病的粉蕉的土樣中僅篩到A. tuberculata。海南香大蕉以Acaulospora為常見屬，A. bireticulata、A. tuberculata為常見種，AMF種類更豐富，且不同香大蕉根際土壤中的AMF種類也有一定差別，粉蕉的AMF種類最多，共35種，芭蕉和野芭蕉均為20種，香蕉最少，僅11種，前人研究發現在同一地區，菌根真菌的種類會隨宿主、環境耕作栽培等的變化而發生一定程度上的改變[41-42]，此結果在本研究中再一次得到驗證。

2008年張科立等[5]對海南儋州、樂東、云龍、感城、興隆5個香蕉主栽區的香蕉AMF研究發現了Glomus、Paraglomus和Gigaspora共4個屬，但未確定到種，與他們的研究相比，本研究初步明確了海南香大蕉的AMF共有9屬45種，且調查了海南的14個市縣，調查地區更多、更全面，并有4種香大蕉，只是未分離到Paraglomus的孢子；2012年Jefwa等[6]報道肯尼亞50個農場香蕉的AMF有5個屬的AMF，其中以Acaulospora孢子密度最大，本研究結果與其研究基本相似，只是未發現Archaespora，多發現了Kuklospora、Dentiscutata、Racocetra、Quatunica 4個屬，且確定的種更豐富，同時表明了海南獨特的氣候條件造就了香大蕉豐富的AMF資源。研究香大蕉根際的AMF資源，可為進一步篩選防治香大蕉土傳病害生防真菌提供有用的參考。

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