杜安玲
初治肺結核患者的菌型鑒定與耐藥性分析
杜安玲
目的 分析肺結核患者的菌型及耐藥情況, 為臨床治療肺結核提供有力的證據。方法 肺結核患者痰菌培養陽性256例, 用改良羅氏法培養進行痰培養, 選擇培養后的陽性菌株為標本, 進行各種菌型鑒定及4種抗結核藥物[鏈霉菌(SM)、異煙肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)]的單藥、二藥、三藥、四藥的耐藥性檢測。結果 256例痰陽性菌株經羅氏培養, 人型分枝桿菌247株(96.48%),牛型分枝桿菌7株(2.73%), 非典型分枝桿菌2株(0.78%);其耐藥率分別為耐單藥59例(23.05%), 耐二藥30例(11.72%), 耐三藥12例(4.69%), 耐四藥4例(1.56%)。結論 嚴格遵循抗結核藥物治療的原則,及時對結核菌型鑒定和耐藥性及藥敏的檢測, 隨時調整化療方案, 增加藥物療效, 降低耐藥率, 對有效控制結核病的傳播及疾病有重要價值。
肺結核;菌型鑒定;耐藥性;藥敏分析
結核菌耐藥性發生率的增加, 是導致結核病化療失敗的主要因素, 增加了臨床治療肺結核的難度, 故肺結核菌型鑒定與耐藥性的檢測, 對肺結核病控制工作起主要作用。現將本所2012年6月~2014年6月門診肺結核患者256例結核分支桿菌耐藥情況分析如下。
1.1 一般資料 結核菌株來自于本所2012年6月~2014年6月門診肺結核患者痰菌培養陽性256例, 其中男165例, 女91例, 按照《結核病診斷實驗室檢驗規程》進行各項系統檢驗。
1.2 試劑與方法
1.2.1 試劑 改良羅氏培養基(L~J培養基)由本單位配制, SM、INH、RFP、EMB 4種藥敏培養基及對硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸酰肼(TCH)鑒別培養基由貝索公司提供。
1.2.2 方法 采集患者清晨未服用抗結核藥物, 漱口后深部咳嗽出的痰為標本, 痰液用4%氫氧化鈉處理20 min, 接種于改良羅氏培養基, 培養出256例陽性菌株。
1.3 藥敏試驗及菌型鑒定 依據《結核病診斷實驗室檢驗規程》, 采用比例間接法作藥物敏感試驗, 用分離出的分枝桿菌菌株分別制成10-2mg/m l 和10-4mg/m l的混懸液, 用22SWG標準接種環移取0.01 m l分別接種在空白對照和各含有鏈霉素(S)、乙胺丁醇(E)、異煙肼(H)、利福平(R)4種藥物的改良羅氏培養基中, 檢測它們的耐藥性, 若含藥培養基菌落數/對照管培養基菌落數>1%則認為受試菌對該抗結核藥耐藥[1]。用10-3mg/m l菌液接種于PNB和TCH鑒別培養基進行分型。
256例陽性耐藥菌株中, 人型分枝桿菌247株(96.48%),牛型分枝桿菌7株(2.73%), 非典型分枝桿菌2株(0.78%)。其耐藥率檢測的結果為:耐單藥59例(23.05%) , 耐二藥30例(11.72%), 耐三藥12例(4.69%), 耐四藥4例(1.56%)。256株結核分支桿菌的耐藥株及耐藥率見表1。

表1 256株分支桿菌的耐藥株及耐藥率(n, %)
肺結核病是一種呼吸道傳染病。我國成人患活動性肺結核的人數占全世界的人數將近50%, 肺結核死亡率很高, 目前肺結核感染預防和控制面臨兩大難點:①抗結核藥物的高度耐藥, 控制結核菌感染難度增加, 傳染源不能有效控制, 病情進一步加重, 嚴重時危及生命。②一些結核桿菌沒有特異性,致病菌種繁多, 不易檢測, 且耐藥情況與菌型鑒定需要的時間比較長, 患者的早期用藥不明確, 處于盲目用藥狀態[2]。
從本組病例中根據菌型和耐藥藥敏的測定情況來看, 牛型分枝桿菌感染發病率呈上升趨勢, 且單藥耐藥率高, 耐單藥以耐SM、INH、RFP為主, 而INH為抗結核方案中主要化療藥, 也是高耐藥之一, 它的高耐藥會給導致整個化療失敗, 而耐兩種、三種、四種藥物的耐藥率呈下降趨勢, 抗結核藥物產生耐藥性, 原因有用藥種類單一, 沒有監測藥物療效并隨時更換, 不重視聯合用藥, 導致耐藥性的發生[3];用藥沒有規律, 且方法及時間沒有按標準, 漏服或未長期堅持,繼發性耐藥與用藥時間不正確有因果關系。肺結核治療失敗的主要原因可能與用藥療程不足、藥物治療不規律及未全程用藥、耐藥變異菌株的產生有直接的關系。抗肺結核病的治療, 要嚴格遵循早期、規律、全程、聯合的原則, 加強對肺結核患者特別是初治患者進行宣傳教育工作, 取得患者合作,才能使抗結核治療成功率提高。
總之, 加強結核患者歸口管理, 抓好初治病例治療和管理, 實施抗結核藥物統一管理和推行全程督導化治療, 結合結核菌型鑒定和藥敏的檢測結果, 隨時改變化療方案, 增加藥物療效, 進一步降低耐藥率, 對更好地控制結核病的傳播及病情有重要價值[4]。
[1] 全國結核病流行病學抽樣調查技術指導組, 全國結核病流行病學抽樣調查辦公室.2008年全國結核病流行病學抽樣調查報告.中國防癆雜志, 2010, 30(2):65-108.
[2] 馬嶼.耐多藥結核病及其防治.臨床肺科雜志, 2005, 10(2):137.
[3] 屠德華.耐藥性結核病的流行病學特征和意義.中華結核和呼吸雜志, 2010, 32(3):327.
[4] 王福權, 孫玉卿.痰結核菌耐藥性測定469例分析.中華結核和呼吸系疾病雜志, 2007, 34(6):355.
10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.15.135
2014-12-29]
455000 安陽市結核病防治所