膜聯蛋白A3在前列腺癌早期診斷中的價值

魏 偉 楊明洲 宗華風 姜興金 楊進益

膜聯蛋白A3在前列腺癌早期診斷中的價值

魏 偉 楊明洲 宗華風 姜興金 楊進益

目的 研究膜聯蛋白A3（Annexin A3）在前列腺癌患者尿液中的表達, 探討其在前列腺癌早期診斷中的價值。方法 59例可疑前列腺癌（總前列腺特異性抗原、直腸指診異常）的住院患者, 采集前列腺按摩后的初始尿液標本, 使用聚合酶鏈式反應（PCR）檢測尿沉渣中Annexin A3的表達, 結合穿刺病理結果分析不同尿Annexin A3濃度診斷早期前列腺癌的敏感性和特異性。結果 前列腺穿刺活檢病理結果為前列腺癌19例, 前列腺增生40例。結論 檢測尿液Annexin A3對于早期前列腺癌的診斷具有較高價值。

前列腺癌；膜聯蛋白A3；前列腺特異性抗原；穿刺活檢

前列腺癌的發病率有逐年增高的趨勢, 常用的腫瘤標記物為前列腺特異性抗原（PSA）［1,2］。本研究探討Annexin A3在可疑前列腺癌患者尿液中的表達, 提高早期前列腺癌的無創診斷率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院2010年5月～2014年9月因可疑前列腺癌住院患者59例, 年齡58～89歲, 平均年齡68歲；血PSA異常（4.13～10.19 ng/mL, 平均7.9 ng/mL）。

1.2 尿標本采集和處理 收集前列腺按摩后初始尿50 ml,離心收集尿沉渣, 2 h內送檢或-80℃保存備用。超聲引導下行前列腺穿刺10～12針, 行病理學診斷。

1.3 主要試劑和儀器 Trizol試劑（日本Takara公司）, 脫氧核糖核苷三磷酸（dNTP）, 焦炭酸二乙酯（DEPC）水, 昏隨機引物, EXT-apTMR-PCR；高速離心機, MJ DNA Engine OPTICON2實時定量PCR儀。

1.4 實驗步驟

1.4.1 核糖核酸（RNA）提取 用紫外分光光度儀測定A260和A280值；用2%甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳, 以鑒定RNA質量。按Takara一步法提取RNA, 使用微量分光光度計測定RNA濃度和純度。

1.4.2 定量PCR反應。

1.5 統計學方法 數據采用SPSS17.0統計學軟件進行分析。計量資料用均數±標準差（ χ-±s）表示, 采用t檢驗；計數資料用率（%）表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

前列腺癌組與前列腺增生癥組患者Annexin A3 mRNA陽性率比較, 前列腺癌患者Annexin A3 mRNA陽性率明顯高于前列腺增生患者, 差異具有統計學意義（P<0.01）。見表1。

表1 前列腺癌組與前列腺增生癥組患者Annexin A3 mRNA陽性率比較［n, %］

3 討論

近年來, PSA作為診斷前列腺癌的標記物, 在臨床診斷前列腺癌的決定性價值越來越受到質疑, 減少不必要的前列腺穿刺活檢, 是臨床研究的熱點。Annexin A3是膜聯蛋白家族的一個亞型, 是新近發現的前列腺癌特異性標記物［3］。Kollermann等［4］檢測到了Annexin A3在前列腺癌與良性上皮和高分級前列腺上皮內瘤中的表達水平。

血PSA是臨床上廣泛認可的診斷前列腺癌敏感的指標,研究顯示PSA異常者患前列腺癌的可能性僅為20%～25%, 而10%的前列腺癌患者血清PSA和直腸指診可以均正常。研究發現, 6例前列腺增生患者Annexin A3 mRNA陰性, 經過前列腺穿刺活檢病理結果除外前列腺癌, Annexin A3 mRNA表達隨著前列腺癌惡性程度增加而降低［5］, 在31.58%的前列腺癌患者中表達缺失；在前列腺良性增生患者中, 15%的患者表達缺失, 差異有統計學意義（P<0.05）。

Annexin A3作為篩查前列腺癌有益的指標, 可大幅提高早期前列腺癌的檢出率, 具有檢測方便、無創等優點。然而,本實驗樣本量較少, 檢測方法較為單一, Annexin A3 的最優檢測方法與參考值仍需進一步行多中心、大樣本的前瞻性研究［6］。

［1］ 楊進益.應用PSA篩查前列腺癌的爭論焦點.醫學與哲學, 2009, 30（24）:51-52.

［2］ Hessels D, Schalken JA.Urinary biomarkers for prostate cancer: a review.Asian J Androl, 2013, 15（3）:333-339.

［3］ Rifai N, Watson ID, Miller WG.Commercial immunoassays in biomarkers studies: researchers beware! Clin Chem, 2012, 58（10）: 1387-1388.

［4］ Kollermann J, Schlomm T, Bang H, et al.Expression and prognostic relevance of annexin A3 in prostate cancer.Eur Urol, 2008, 54（6）:1314-1323.

［5］ Wozny W, Schroer K, Schwall GP, et al.Differential radioactive quantification of protein abundance ratios between benign and malignant prostate tissues: cancer association of annexin A3.Proteomics, 2007（7）:13-22.

［6］ Schr?der FH, Venderbos LD, van den Bergh RC, et al.Prostate cancer antigen 3: diagnostic outcomes in men presenting with urinary prostate cancer antigen 3 scores≥100.Urology, 2014, 83（3）:613-616.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.10.060

2015-02-11］

116001 遼寧省大連市友誼醫院泌尿外科（魏偉楊明洲 姜興金 楊進益）, 病理科（宗華風）

楊進益