酶聯(lián)免疫法檢測唾液中幽門螺桿菌抗體的效果分析

滕巖 遲偉 姜順愛 楊梅

酶聯(lián)免疫法檢測唾液中幽門螺桿菌抗體的效果分析

滕巖 遲偉 姜順愛 楊梅

目的 探討酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測唾液中幽門螺桿菌(Hp)抗體在診斷Hp感染中的臨床效果。方法 通過對110例感染幽門螺桿菌患者唾液中的Hp抗體進行ELISA和其他三種常規(guī)方法檢測,評價ELISA檢測Hp感染的臨床效果。結(jié)果 110例患者應(yīng)用ELISA法檢測Hp感染與其他三種常規(guī)方法之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), Hp抗體在胃腸道疾病中檢出率較高。結(jié)論 ELISA對唾液中的Hp抗體檢測靈敏度和特異度高, 且具有創(chuàng)傷小、恢復(fù)快、方法簡單等特點, 可作為檢測Hp感染的診斷指標。

酶聯(lián)免疫法；幽門螺桿菌；唾液

Hp是一種呈現(xiàn)螺旋狀或弧狀的慢性感染性細菌, Hp通常是導(dǎo)致胃腸道出現(xiàn)炎癥的主要因素, 在人群中的感染率較高, 但是由于Hp感染沒有臨床特異性癥狀, 在我國診斷治療中, 主要是借助臨床病理學(xué)診斷檢查和快速尿素酶實驗(Rapid Urease Test, RUT)等方法作為主要診斷依據(jù)［1］, 但是此類方法較為繁瑣, 且對患者機體造成一定的傷害。臨床檢驗需要一種簡便、可行及易被患者接受的快速檢測Hp的方法, 通過對國內(nèi)外檢測方法的研究［2,3］, 應(yīng)用ELISA對唾液中的Hp抗體進行檢測, 檢測出Hp抗體呈現(xiàn)陽性。本院對110例感染幽門螺桿菌患者唾液中的Hp抗體進行檢查, 同時采用臨床常規(guī)檢測方法對比, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取110例本院2013年6月~2014年12月消化內(nèi)科住院患者進行研究, 其中男54例, 女56例, 年齡14~75歲, 平均年齡(44.5±4.8)歲, 110例患者患病包括慢性胃炎、胃、十二指腸潰瘍、胃、十二指腸急性穿孔及胃癌等。所有患者檢測前應(yīng)用唾液采集器采集患者唾液, 并置于-18℃冰箱中保存, 同時在食管和胃腸道活檢黏膜若干塊,以備快速尿素酶試驗、HE染色和病理學(xué)檢查使用。

1.2 試劑材料和儀器 唾液采集應(yīng)用北京中創(chuàng)先鋒科技有限責任公司的唾液采集器及Hp-IgG試劑盒, 幽門螺桿菌抗體檢測采用北京美康生物技術(shù)研究中心有限責任公司提供的檢測試劑盒, 酶標儀采用上海賽默科技生物發(fā)展有限公司Thermo MK3酶標儀及其相關(guān)試劑, 分光光度計采用北京普析通用儀器有限責任公司T6紫外可見分光光度計。

1.3 方法 通過酶聯(lián)免疫法檢查患者唾液中的幽門螺桿菌抗體, 在受檢者做內(nèi)鏡檢查前40 min用唾液采集器采集患者唾液, 通過Thermo MK3酶標儀對唾液中的Hp-IgG檢測, 對IgG進行標記形成抗原復(fù)合物, 捕獲標記的親和物顯色后, 在450 nm波長下測定A值(吸光值), 陰性孔A值+0.20為上限值, 大于上線值判定為陰性。內(nèi)鏡活檢樣本分別進行RUT、HE染色及WS染色法檢測Hp。通過以上三項檢查, 如果其中大于等于兩項檢查為陽性者預(yù)判為陽性, 三項檢查均為陰性者為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 唾液Hp抗體檢測 通過對110例患者唾液樣品檢測, ELISA法Hp陽性檢測結(jié)果為79例, Hp陰性為31例；三種常規(guī)檢測方法檢出陽性均值為81例, 陰性均值為29例。通過與RUT比較, ELISA的靈敏度為97.4%(76/78), 特異度為90.6%(29/32)。與HE染色法比較, 靈敏度為96.2%(75/78),特異度為87.5%(28/32)。與WS染色法比較, 靈敏度為97.5%(77/79), 特異度為93.5%(29/31)。通過統(tǒng)計學(xué)分析得出ELISA與其他三種常規(guī)方法之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

2.2 不同疾病患者唾液Hp-IgG檢出情況 Hp抗體在不同疾病患者檢出率有所不同, 其中在胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎等疾病中檢出率相對較高。見表2。

表1 110例患者唾液幽門螺桿菌抗體與三種常規(guī)檢查方法比較(n)

表2 不同疾病患者唾液幽門螺桿菌抗體檢出情況(n, %)

3 討論

通過本次研究得出, Hp與胃、十二指腸潰瘍及慢性胃炎相關(guān), 這也與Marshall［4］的研究結(jié)果一致, 消除和降低Hp對于改善胃腸道疾病有顯著性意義, 可以降低疾病的復(fù)發(fā)和其他并發(fā)癥的出現(xiàn)。目前我國診斷Hp感染主要采用內(nèi)鏡活檢在黏膜上的檢查［5］, 但是此種方法屬于侵入性檢查, 且費用較高, 多數(shù)患者在經(jīng)濟和精神上難以接受。部分醫(yī)院采用13C和14C呼氣試驗間接檢測Hp抗原, 但是14C對人體及環(huán)境會造成污染, 尤其不適用于孕婦及嬰幼兒檢查, 作為14C升級版的13C檢查雖然去除了放射性, 但由于造價較高, 不易被患者接受, 推廣程度并不高。

本次研究通過與其他三種常規(guī)檢測方法進行比較發(fā)現(xiàn), ELISA檢測結(jié)果與常規(guī)方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。此外, 作者還發(fā)現(xiàn)測定血清中的抗Hp-IgG與測定唾液抗Hp-IgG一致性較高, 說明在體內(nèi)循環(huán)的作用下血清中的抗Hp-IgG可以循環(huán)到唾液及胃液等地方, 可以作為診斷是否感染Hp的依據(jù), 因此Hp-IgG可以作為Hp感染的診斷指標。此外, 本次研究結(jié)果顯示, ELISA檢測Hp的靈敏度和特異度均較高, 口腔中存在多種不同的菌體抗原和免疫蛋白可能是導(dǎo)致診斷出現(xiàn)少數(shù)假陽性和假陰性結(jié)果的原因［6］。本研究結(jié)果顯示唾液中的Hp-IgG水平高低可以作為檢測Hp感染的診斷指標, 與三種常規(guī)檢測方法之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), 并且易被患者接受, 具有臨床診斷意義, 值得推廣。

［1］ 俞瑩瑩, 吳勤動, 許凱聲.唾液幽門螺桿菌抗原檢測與慢性胃炎活動性及癌前病變關(guān)系的研究.中國實用內(nèi)科雜志, 2006, 26(18):1421-1423.

［2］ 宋敏, 李進, 李仕英, 等.用聚合酶鏈反應(yīng)擴增16SrRNA基因檢測幽門螺桿菌.中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 2003, 16(5):268.

［3］ Desai HG, Gill HH, Shankaran K, et al.Dental plaque: a Permanent Reservoir of Helicobacter pylori? Scand J Gastroenterol, 1991, 26(11):1205-1208.

［4］ Marshall BJ, Warren JR.Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration.Lancet, 1984, 1(8390): 1311-1315.

［5］ 朱人敏, 路又可, 王琳.唾液抗幽門螺桿菌抗體的檢測.中華內(nèi)科雜志, 1997(36):469-470.

［6］ Patel P, Mendal MA.Salivary antibodies to Helicobacter pylori: screeing dyspetic patients befor endoscopy.Lancet, 1994, 344(8921): 511-512.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.030

2015-01-21］

154002 佳木斯市傳染病院(滕巖 姜順愛 楊梅)；佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院(遲偉)