孫 巖,孫長杰,劉 冰
(吉林大學第一醫院,吉林長春130021)
人類胃液中EB病毒的檢測
孫 巖,孫長杰,劉 冰*
(吉林大學第一醫院,吉林長春130021)
EB病毒(Epstein-barr vinus)與許多人類惡性腫瘤的發生有密切相關,這些腫瘤包括Burkitt淋巴瘤,霍奇金惡性淋巴瘤,非霍奇金惡性淋巴瘤、胃癌、鼻咽癌及一些部位的淋巴上皮瘤樣癌[1-3]。自Burke于1990年首次報告EB病毒與胃癌相關以來,部分學者相繼在淋巴上皮瘤樣胃癌及其他類型的胃癌細胞中檢測出EB病毒。本文對經臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的胃液標本進行了檢測,現報告如下。
1.1 一般材料
經臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的胃液共124例,其中胃癌40例,胃潰瘍45例,非潰瘍疾病39例患者,年齡在19-70歲之間(平均56歲)。男67例,女57例。
1.2 提取DNA的方法
吸取胃液0.5ml于1.5ml的Eppendort中離心(7500轉/20min),將上清棄取。加入ATL1800 μl及20μl proteinaseK,稍離心,置55℃水浴1小時30分鐘后直至透明。再加入AL1及AL2共200μl(AL1 160μl+AL2 240μl),經離心后置水浴10 min,待冷卻后加入(CH3)2OH210ml,輕輕混合3 min,再重復以上步驟。離心所得的液體即是提取的DNA。
1.3 聚合酶鏈反應(PCR)
PCR試劑盒購自生物試劑有限公司,操作按說明書進行。
2.1 PCR擴增產物分析
擴增產物是121bp,EB病毒DNA陽性對照出現預期結果,見圖1。
2.2 EB病毒DNA檢出情況
胃癌、胃潰瘍、非胃潰瘍疾病的胃液EB病毒DNA檢出情況見表1。

圖1 PCR擴增產物
124例胃液標本中EB病毒DNA陽性9例(6%);其中胃癌有5例檢測出EB病毒陽性(12.5%),HP(Helicobacter pylori)陽性(93%)。潰瘍病胃液標本EB病毒DNA陽性4例(7%),HP陽性(66%),非潰瘍疾病胃液標本EB病毒均為陰性,HP陽性(30%)。

表1 檢驗結果
EB病毒是與人類密切相關的病毒之一,世界上幾乎所有的成人都被其感染過。EB病毒與人類的許多惡性腫瘤有關。文獻報道EB病毒主要存在于具有廣泛淋巴細胞侵犯的特殊類型胃癌組織中,其陽性率可高達80%以上[4],文獻報道在普通型的胃癌組織中也有EB病毒存在,其陽性率在不同地區差別很大[5,6]。但是,目前為止對于胃潰瘍及非胃潰瘍疾病報道極少。
本組病例用聚合酶鏈反應(PCR)方法檢測本地區經臨床病理確診的胃癌、胃潰瘍及非胃潰瘍疾病的共124例胃液標本中EB病毒DNA陽性9例(6%);其中胃癌有5例EB病毒陽性(12.5%),HP陽性(93%)。
本組45例潰瘍病胃液標本EB病毒DNA陽性4例(7%),HP陽性(66%)。提示EB病毒陽性的潰瘍病有可能是發展為胃癌的潛在高危人群。Fukayanma[7]等認為EB病毒可通過被激活的攜帶EB病毒的淋巴細胞,感染胃的表面上皮。EB病毒可能是有些病毒相關型胃癌發生的一個因素,而用原位雜交的方法檢測EB病毒抗體或可用作篩檢EB病毒相關胃癌的高危人群。非胃潰瘍疾病的胃液標本中EB病毒均為陰性,HP陽性(30%)。但Shousha[8]等報道19例各種類型的胃癌組織中,僅在其中1例淋巴上皮瘤樣組織中檢出病毒,而在11例癌旁正常胃黏膜或十二指腸中有7例被檢出有散在的含有EB病毒。
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2014-04-29)
1007-4287(2015)09-1530-02
*通訊作者