L-FABP和NAG在重癥急性胰腺炎合并急性腎損傷中的早期診斷價值

柯貴寶，劉 哲，徐云瀅，向 謙，蒲 紅，鄧茂林

(成都大學附屬醫院內科，四川 成都 610081)

L-FABP和NAG在重癥急性胰腺炎合并急性腎損傷中的早期診斷價值

柯貴寶，劉 哲，徐云瀅，向 謙，蒲 紅，鄧茂林

(成都大學附屬醫院內科，四川 成都 610081)

目的：探討肝型脂肪酸結合蛋白(L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(NAG)在急性重癥胰腺炎(SAP)合并急性腎損傷(AKI)患者中的早期診斷價值。方法：收集15例健康體檢者作為正常對照，將161例急性胰腺炎(AP)患者分為輕度(MAP)、中度(MSAP)、重度(SAP)3組，其中SAP 組又分為AKI和非AKI亞組。分別采用酶聯免疫分析法(ELISA)和終點法測定正常對照組及AP患者發病后4～24 h的尿液L-FABP、NAG水平。結果：SAP組中AKI亞組的L-FABP和NAG水平明顯高于非AKI亞組(P<0.01)。結論：尿L-FABP和NAG可以作為檢測SAP合并 AKI的早期生物標記物。

重癥急性胰腺炎；急性腎損傷；肝型脂肪酸結合蛋白；N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶

急性腎損傷(acute kidney injury，AKI)是重癥急性胰腺炎 (severe acute pancreastitis，SAP)常見的并發癥之一，其發生率僅次于肺功能障礙，一旦發生急性腎衰竭(acute renal failure，ARF)，會導致其他臟器衰竭的發生率明顯升高，患者的病死率高達71%～84%。傳統的診斷指標如血清尿素和肌酐不能早期反映腎小球濾過率的下降，且受影響的因素較多。近年來發現的一些新型的生物學標志物如：肝型脂肪酸結合蛋白(Liver-type fatty acid binding protein，L-FABP)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase，NAG)等能在早期反映腎功能的變化。本實驗主要探討L-FABP和NAG在SAP并發AKI的早期診斷價值。

1 資料和方法

1.1 一般資料 前瞻性收集2012年5月至2014年2月期間我院健康體檢者及住院患者的尿液共176例。正常對照組15例為我院門診健康體檢者。161例急性胰腺炎(acute pancreastitis，AP)患者均為我院住院患者，其中：男113例，女48例；年齡24～68歲，平均50.2歲。將急性胰腺炎患者分為4組：輕度急性胰腺炎(mild acute pancreatitis，MAP)組(MAP組)、中度急性胰腺炎(moderately severe acutepancreatltls，MSAP)組(MSAP組)、重度急性胰腺炎非AKI亞組(NO-AKI組)和重度急性胰腺炎AKI亞組(AKI組)。所有入選患者均簽署知情同意書。AP診斷符合中華醫學會消化病學分會胰腺疾病學組的診斷標準[1]。根據AKI診斷標準[2]，設計AP合并AKI診斷標準：尿量減少[尿量<0.5 mL/(kg·h)]超過6 h；或血清SCr水平較前升高>50%；或SCr升高絕對值>25 μmol/L。排除標準：住院治療時間超過發病時間24 h，既往有慢性腎臟疾病，本次發病前有AIDS、腫瘤、嚴重感染、嚴重創傷及手術后的患者均不納入本研究。

1.2 標本采集和主要試劑 收集健康體檢者和入選患者發病后4～24 h內的清潔中段尿液20 mL，離心后取上清液置-80℃冰箱保存待測。記錄入院患者的24 h尿量，每12～24 h監測一次SCr變化。尿L-FABP采用ELISA法檢測，試劑盒購自美國RD公司。尿NAG采用終點法檢測，試劑盒購自浙江夸克生物科技有限公司。

1.3 尿L-FABP和NAG檢測 尿L-FABP用ELISA試劑盒進行檢測，操作嚴格按說明書進行，結果除以尿肌酐值進行校正。尿NAG檢測采用Olympus AU5400自動生化分析儀。

1.4 統計學處理 采用SPSS17.0軟件進行統計分析，多樣本均數比較采用單因素方差分析。

2 結 果

2.1 AKI發生情況 本實驗中，MAP、MSAP、SAP患者分別為94例、38例、29例。29例SAP患者有17例發生AKI，約占SAP患者的58.62%，其中4例AKI患者依據尿量減少標準診斷，另13例患者依據SCr變化診斷AKI，其SCr升高達到AKI診斷標準的時間約在發病后60～72 h。MAP和MSAP患者無AKI發生者。

2.2 尿L-FABP和尿NAG表達 結果詳見表1。

表1 各組尿L-FABP、尿NAG水平比較

注：1)與AKI組比較P<0.01

AKI組L-FABP水平明顯高于NO-AKI組、MSAP組、MAP 組、正常對照組(P<0.01)；NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較無顯著性差異(P>0.05)。AKI組NAG水平明顯高于NO-AKI組、MSAP組、MAP組、正常對照組(P<0.01)；NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)。

3 討 論

AP是指多種病因導致的胰酶在胰腺內被激活后引起胰腺組織自身消化、水腫、出血、壞死的炎癥反應，若發展為SAP，常累及腎臟，發生AKI甚至多臟器功能衰竭，病死率極高。故早期發現并防治AKI的進展，對SAP患者的預后具有重要意義。SAP伴AKI主要表現包括無尿、少尿和血清肌酐升高，目前主要依據SCr來診斷AKI，但SCr反應較慢，常在腎臟受損后約72 h才能診斷出AKI[3]。本研究中，通過SCr依據診斷為SAP伴AKI的患者，均在AP發病2 d后。故如果依據SCr標準來診斷SAP伴AKI，將不利于患者腎功能的恢復。

近年來，已有大量報道提示[4-5]，尿L-FABP、尿NAG可作為AKI的早期生物標志物。研究提示，腎臟受損傷因素影響后4～24 h，L-FABP和NAG水平明顯增高[6-7]；故本研究收集AP發病后4～24 h的尿液來檢測L-FABP和NAG，明確L-FABP和NAG能否作為SAP合并AKI檢測的早期生物標志物。

脂肪酸結合蛋白(fatty acid binding protein ，FABP)是在人體脂肪酸代謝活躍的組織中大量表達的細胞質蛋白，相對分子質量為14 000。腎臟中有2種類型，心臟型(H-FABP，表達于遠端腎小管)和肝臟型(L-FABP，表達于近端腎小管)，在近端腎小管游離脂肪酸與上皮細胞胞漿FABP結合，進而轉運到線粒體或過氧化物酶體進行β-氧化代謝。L-FABP與Cys C一樣，相對分子質量很小，所以能被腎小球濾過，又像其他小分子蛋白那樣在近端小管被重吸收。本研究結果提示L-FABP在NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)，而在AKI組則明顯高于NO-AKI組(P<0.01)，提示尿L-FABP可以作為檢測SAP合并AKI早期的生物標志物。

NAG是近端腎小管溶酶體酶，是腎小管損害敏感和持久的指標，在糖尿病腎病、慢性腎小球疾病、腎毒性物質損傷、移植腎功能延遲恢復等都可觀察到尿NAG增高。尿NAG增高也是危重患者AKI的敏感指標，可早于血清肌酐升高12～96 h。AKI的患者尿NAG越高，預后越差[8]。本研究結果提示NAG在NO-AKI組、MSAP組、MAP組及正常對照組之間兩兩比較均無顯著性差異(P>0.05)，而在AKI組則明顯高于NO-AKI組 (P<0.01)，提示尿NAG可以作為檢測SAP 合并AKI早期的生物標志物。

總之，對于既往無慢性腎臟疾病、無惡液質、發病前無嚴重感染的患者，尿L-FABP和尿NAG對SAP合并AKI的早期診斷具有重要意義。

[1]中華醫學會消化病學分會胰腺疾病學組.中國急性胰腺炎診治指南(2013)[J].中華消化雜志，2013，33(4)：217-222.

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[3]BAGSHAW S M,BELLOMO R,DEVARAJAN P,et al.Review article: Acute kidney injury in critical illness[J].Can J Anaesth,2010,57(11):985-998.

[4]韋莉，王敏，施瑞華，等.24h尿NAG與尿NAG/肌酐比值在IgA腎病早期腎損害檢測中的臨床意義[J].南京醫科大學學報:自然科學版，2013，33(3)：396-397.

[5]劉艷，劉丹，黃澤智.血清α1-MG、β2-MG、Hs-CRP和尿NAG聯合檢測對早期腎損害診斷的臨床應用研究[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33(20)：2544-2545.

[6]吳衛華.尿NAG檢測在造影劑腎病早期診斷中的應用[J].檢驗醫學，2012，27(4)：318-320.

[7]劉紅，岳華，趙紅娟，等.尿NAG、mALB、β2-MG、α1-MG檢測對早期腎損害的診斷價值[J].西部醫學，2011，23(2)：239-241.

[8]LIANGOS O,PERIANAYAGAM M C,VAIDYA V S,et al.Urinary N-acetyl-beta-(D)-glucosaminidase activity and kidney injury molecule-1 level are associated with adverse outcomes in acute renal failure[J].J Am Soc Nephrol, 2007,18(3):904-912.

The Diagnostic Value of L-FABP and NAG in Adult Severe Acute Pancreatitis with Acute Kidney Injury

KE Guibao,LIU Zhe,XU Yunyin,XIANG Qian,PU Hong,DENG Maolin

(Department of Internal Medicine,Affiliated Hospital of Chengdu University,Sichuan Chengdu 610081,China)

Objective:To investigate whether human urinary L-FABP and NAG should be regarded as early predictive markers in SAP with AKI.Methods:161 cases of acute pancreatitis(AP) were divided into the mild acute pancreatitis(MAP) group; moderately severe acute pancreatitis(MSAP) and SAP group;and the latter were divided into non-AKI subgroup and AKI subgroup. L-FABP was measured by using sandwich ELISA and NAG levels was measured by using End-point method.Results:The urinary L-FABP and NAG levels in AKI subgroup were significantly higher than those in the non-AKI subgroup(P<0.01).Conclusion:The urinary L-FABP and NAG levels can be used as early potential markers in SAP with AKI.

severe acute pancreatitis;acute kidney injury;liver-type fatty acid binding protein;N-acetyl-β-D-glucosaminidase

四川省衛生廳科研課題項目資助(100074)，成都大學附屬醫院科研課題項目資助(201317)

柯貴寶，gbke@outlook.com

R657.51 <[文獻標志碼]A class="emphasis_bold">[文獻標志碼]A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008[文獻標志碼]A

10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

A DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2015.04.008

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20150721.1717.042.html

2014-07-07)