TNRC9基因多態(tài)性與乳癌發(fā)病的相關性

李睿

（青島市市立醫(yī)院超聲科，山東 青島 266011）

乳癌是世界范圍內嚴重危害婦女健康的惡性腫瘤，其發(fā)生和發(fā)展受多種風險因素的影響，與許多基因和蛋白質的表達密切相關。近幾年來，全基因組關聯(lián)分析迅猛開展。EASTON等［1］的研究結果顯示，TNRC9基因與乳癌有較強的關聯(lián)性。本文主要研究了乳癌TNRC9基因及有關因素對乳癌發(fā)病風險的影響，以期為乳癌的病因研究及高危人群的基因篩查提供理論依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2005年6月—2014年1月，收集于我院就診乳癌病人375例及健康對照382例，采集兩組基本信息，包括年齡、月經(jīng)初潮年齡、絕經(jīng)年齡、生育史、哺乳情況和既往史。調查員為我科住院醫(yī)師，對研究對象進行問詢調查，所得資料雙份核對并錄入Excel表格。研究對象均知情同意，并提供血液樣本。

1.2 TNRC9rs12443621基因型檢測

根據(jù)GenBank dbSNP數(shù)據(jù)庫中的TNRC9基因rs12443621設計引物和TaqMan－MGB探針，進行單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測。PCR反應體積為25μL，其中 DNA模板約5μL、2×TaqMan Universal PCR Master Mix 10μL（美國ABI公司）、引物各0.5μL、探針各0.5μL。反應在 Real－PCR擴增儀（美國BioRad公司）上進行。擴增參數(shù)：94℃預變性5min；94℃變性15s，60℃退火1min，共45個循環(huán)。反應結束后確認擴增曲線并由儀器自動進行SNP基因分型讀取。判斷標準：純合基因型1，F(xiàn)AM染料擴增可見明顯擴增信號，VIC染料無擴增信號；純合基因型2，VIC染料擴增可見明顯信號，F(xiàn)AM染料無擴增信號；雜和基因型，兩種染料均可見明顯信號。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結 果

2.1 兩組基本資料比較

兩組年齡差異無顯著性（P＞0.05）。病例組的初潮年齡小于對照組（t＝1.71，P＜0.05），而兩組絕經(jīng)年齡差異無顯著性（P＞0.05）。與對照組比較，病例組哺乳時間短，分娩次數(shù)多，無母乳喂養(yǎng)史及無生育史者所占比例高（t＝9.43，χ2＝9.58～18.73，P＜0.05）。兩組流產(chǎn)史、流產(chǎn)次數(shù)比較差異無顯著性（P＞0.05）。見表1。

2.2 TNRC9rs12443621基因型與乳癌易感性分析

兩組TNRC9rs12443621的基因型分布及等位基因頻率差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。TNRC9 rs12443621基因型與乳癌患病風險無關。見表2、3。將病例組按絕經(jīng)情況、有無哺乳史和生育史進一步分層分析，以等位基因純合子AA基因型為參照，AG＋GG基因型分布在各病例組間差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表4。

表1 兩組基本資料比較（）

表1 兩組基本資料比較（）

組別 n 年齡（歲）初潮年齡（歲）絕經(jīng)年齡（歲）哺乳時間（月）母乳喂養(yǎng)史（例（χ／%）） 生育史（例（χ／%））無有無有對照組 382 49.91±4.02 15.02±1.99 49.07±3.56 14.56±11.71 50（13.09） 332（86.91） 13（3.40） 369（96.60）病例組 375 50.35±3.89 14.68±2.56 51.56±3.24 8.75± 7.64 81（21.60） 294（78.40） 34（9.97） 341（90.93）組別 n 分娩次數(shù)0 1～2 ≥3流產(chǎn)史（例（χ／%））無有流產(chǎn)次數(shù)0 1～2 ≥3對照組 382 16（4.19） 361（94.50） 5（1.31） 112（29.32） 270（70.68） 112（29.32） 214（56.02） 56（14.66）病例組 375 34（9.07） 320（85.33） 21（5.60） 123（32.80） 252（67.20） 123（32.80） 218（58.13） 34（8.53）

表2 兩組TNRC9rs12443621基因型分布及等位基因頻率比較

表3 TNRC9rs12443621基因型與乳癌患病風險的多因素Logistic回歸分析

表4 TNRC9rs12443621基因型與乳癌患病風險的分層分析

3 討 論

國內外許多研究探討了年齡、生育因素等與乳癌的關系，但所得結論并不完全相同［2－9］。本研究結果顯示，無生育史、月經(jīng)初潮年齡早為乳癌的危險因素，而哺乳時間長、初潮年齡晚、分娩次數(shù)多則為保護因素，這與多個研究結果一致［2－5］。月經(jīng)初潮年齡早增加乳癌的患病風險可能與機體長時間處于較高水平性激素的環(huán)境中有關。分娩次數(shù)多、哺乳時間長的有利作用可能與經(jīng)產(chǎn)婦乳腺組織的增殖減弱、孕期激素水平的改變有關［10－11］。因此，生育和母乳喂養(yǎng)對預防乳癌的發(fā)生具有一定的作用。本研究未顯示絕經(jīng)年齡、流產(chǎn)史與乳癌的發(fā)病有關，這與國內一些研究結果不一致［3－5］。乳癌的發(fā)病受遺傳、環(huán)境、生活方式、衛(wèi)生條件、飲食等的影響，而這些因素的地域差異可能導致國內外甚至國內不同地區(qū)的研究結果不完全相同。

TNRC9基因含有3個核苷酸重復基序和1個假定基因LOC643714，rs12443621位于TNRC9基因的5′－端連鎖不平衡區(qū)。EASTON等［1］用全基因組掃描技術進行病例對照研究，結果顯示，TNRC9 rs12443621的SNP與乳癌發(fā)病有很強的相關性。WOOLCOTT等［12］研究顯示，該基因通過改變乳腺腺體的纖維密度而影響乳癌發(fā)生風險。最近的研究還顯示，該基因與乳癌的臨床預后和5年生存率關系密切［13］。國內LIANG等［14］的研究結果表明，rs12443621與雌激素受體陽性的乳癌發(fā)病相關。但ZHENG等［15］的研究結果顯示，rs12443621位點與中國漢族女性乳癌發(fā)生不相關，這與本研究結果是一致的。本研究進一步分層分析，也未顯示TNRC9rs12443621與乳癌的相關危險因素有相關性。國內外研究結論不一致的原因可能是由種族差異或者所選樣本的腫瘤特異性造成的，今后需要增大樣本量、設計更為嚴格的實驗來驗證該基因位點對乳癌的作用。

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