結核分枝桿菌快速培養兩種前處理方法分析比較

摘要：目的 分析比較結核分枝桿菌快速培養兩種前處理方法，從而大大減少了操作過程中被污染的幾率，也提高了該培養方法的準確性。方法 采用的結核菌快速液體培養方法中使用的前處理方法為N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）-NaOH法，與我院經改良后的結核菌快速液體培養方法為NaOH-生理鹽水法相比較。結果 使用N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）-NaOH法進行前處理的培養陽性結果為92例。使用NaOH-生理鹽水法進行前處理的培養陽性結果為90例。結論 使用NaOH-生理鹽水法進行前處理可以減少前處理過程中的許多環節，減少被污染，降低了實驗成本。

關鍵詞：結核分枝桿菌； 快速液體培養；培養方法

Abstract：Objective Comparison of mycobacterium tuberculosis fast develop two kinds of pretreatment method， thus greatly reducing the chance of contamination in the process of operation， and also improve the accuracy of the training methods. Methods N/med tuberculosis bacterium rapid liquid culture method used in the pretreatment method for n-acetyl - L - cysteine （NALC） - NaOH method，with our improved n/med tuberculosis bacterium rapid liquid culture method for NaOH - saline method comparison. Results Use n-acetyl - L - cysteine （NALC） - NaOH method for pretreatment of the positive results of 92 cases. Using NaOH - saline method for pretreatment of the positive results of 90 cases. Conclusion Using NaOH - saline method for pretreatment can reduce many links in the process of pretreatment， reduce the pollution， reduce the experiment cost.

Key words：Mycobacterium tuberculosis； Rapid liquid culture； Training method

結核分枝桿菌的快速液體培養方法在結核分枝桿菌檢測陽性率方面顯著高于涂片法，也高于羅氏培養法。在檢測時間上遠遠短于羅氏培養法。因此能達到快速診斷的目的。但是，目前用于快速培養的標本前處理方法因其使用的處理試劑繁多，而且程序繁瑣容易在前處理過程中產生污染。本方法采用的前處理方法只需使用無菌生理鹽水代替前處理過程中的繁多試劑，從而大大減少了操作過程中被污染的幾率，也提高了該培養方法的準確性。

1資料與方法

目前國際和我國采用的結核菌快速液體培養方法中使用的前處理方法為N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）-NaOH法。具體操作過程如下：

試劑配制： ①2.94%（0.1mol/L）枸櫞酸鈉溶液50ml，加4%NaOH溶液50ml混勻。臨用前加入0.5NALC，混勻后置室溫24～48h內使用，此溶液不穩定，應密閉冷藏。②處理方法：取被檢標本2ml左右，加等量的上述試劑進行消化處理，振蕩30s，如果標本粘稠，可適當延長時間，室溫（20℃～25℃）放置15min，加入0.067mol/LPB緩沖液20ml，混勻，以10000rmp離心10min，倒掉上清液。加入0.067mol/LPB緩沖液20ml，洗滌2次后，加入0.5ml0.067mol/LPB緩沖液，混勻后接種于快速液體培養基中。

我院經改良后的結核菌快速液體培養方法為NaOH-生理鹽水法。具體操作過程如下：試劑配制：4%NaOH溶液，0.9%滅菌生理鹽水。

處理方法：取被檢標本2ml左右，加等量的4%NaOH溶液，振蕩30s室溫放置15min，如果標本粘稠，可適當延長放置時間，混勻，以10000rmp離心沉淀10min，去掉上清液。加入0.9%滅菌生理鹽水20ml充分混勻洗滌，再次以10000rmp離心沉淀10min，如此反復兩次，去掉上清液，，加入0.9%滅菌生理鹽水0.5ml，混勻后接種于快速液體培養基中。實驗結果：自2013年1月～12月，我院共收集痰菌陽性結核病患者痰標本200例進行結核菌快速液體培養，并將每個痰標本分為兩組，分別使用兩種前處理方法對兩組標本進行前處理然后進行快速液體培養。得出結果為使用N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）-NaOH法進行前處理的培養陽性結果為92例。使用NaOH-生理鹽水法進行前處理的培養陽性結果為90例。其培養陽性檢出率分別為46%和45%。兩 種前 處理 法培 養陽 性率 比較：？字2=0.5，0.5>P>0即：N-乙酰-L-半胱氨酸（NALC）-NaOH法和NaOH-生理鹽水法的前處理標本培養陽性率無顯著差異。

2討論

目前進行結核菌快速液體培養的前處理方法由于使用處理的試劑種類繁多，而且操作程序繁瑣，所以容易在前處理的過程中產生污染。使用NaOH-生理鹽水法進行前處理不僅可以減少前處理過程中的許多環節，減少被污染的幾率。而且，減少許多試劑，從而降低了實驗成本。為患者減少了就診中的費用。

參考文獻：

[1]傳染性肺結核診斷標準及處理原則[S].中華人民共和國國家標準，GB15987-1995.

[2]衛生部疾病控制司、衛生部醫政司.全國結核病防治工作手冊[S].1999. 編輯/孫杰