酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀在HIV抗體初篩檢測(cè)中的應(yīng)用

摘要：通過(guò)對(duì)比使用酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀與傳統(tǒng)的水浴箱方法在使用相同檢驗(yàn)試劑的條件下，分別對(duì)10份陰陽(yáng)性的對(duì)照血清、標(biāo)準(zhǔn)品血清、90份隨機(jī)抽樣血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）HIV抗體初篩檢測(cè)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在確定最佳反應(yīng)時(shí)間條件下，運(yùn)用酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀與傳統(tǒng)的水浴箱方法在HIV抗體初篩檢測(cè)中具有等效性，并能加快反應(yīng)的速度。

關(guān)鍵詞：HIV抗體初篩檢測(cè)；酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀；傳統(tǒng)水浴箱

酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀的原理是利用高頻電磁波加強(qiáng)生物分子振動(dòng)，合理提供免疫反應(yīng)所需的能量，從而加快酶免反應(yīng)的速度，使抗原抗體反應(yīng)更快以及更徹底。HIV即人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus）是一種感染人類免疫系統(tǒng)細(xì)胞的慢病毒（Lentivirus），屬于反轉(zhuǎn)錄病毒的一種。臨床特征表現(xiàn)為抗感染能力低下，從而導(dǎo)致容易發(fā)生反復(fù)而嚴(yán)重的感染，同時(shí)，容易伴有自身穩(wěn)定和免疫監(jiān)視功能的異常，使發(fā)生自身免疫性疾病、過(guò)敏性疾病和惡性腫瘤的機(jī)率增加。目前，HIV抗體初篩檢測(cè)在臨床檢驗(yàn)中已經(jīng)是普遍開(kāi)展的項(xiàng)目。但是因?yàn)槿粘z測(cè)任務(wù)比較大，提高HIV抗體初篩檢測(cè)的效率對(duì)于該項(xiàng)目在臨床更好的應(yīng)用具有重要意義。本研究通過(guò)采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀和傳統(tǒng)的水浴箱兩種方法的比較，進(jìn)一步明確酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀在HIV抗體初篩檢測(cè)中的適用性。

1資料與方法

1.1試劑 HIV抗體檢測(cè)試劑由廈門英科新創(chuàng)公司生產(chǎn)。

1.2儀器 NY/MMJ酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀（四川諾亞醫(yī)療科技有限責(zé)任公司）、37℃恒溫水浴箱、Tecan Sunrise酶標(biāo)儀、Tecan Freedom Evolyzer 100-4洗板機(jī)、微量振搖器以及50～100 μl加樣槍數(shù)支。

1.3樣本來(lái)源 10份陰陽(yáng)性對(duì)照血清由本實(shí)驗(yàn)室提供，標(biāo)準(zhǔn)品血清為衛(wèi)生部臨檢中心下發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)品，隨機(jī)抽樣血清為本院住院患者90份血清標(biāo)本。

1.4方法 酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，即抗原、抗體結(jié)合反應(yīng)放置在酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀內(nèi)30 min，顯色反應(yīng)放置在酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀內(nèi)7.5 min；傳統(tǒng)的水浴箱方法嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用spss 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，運(yùn)用t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1線性試驗(yàn) 待測(cè)樣本的濃度為衛(wèi)生部臨檢中心提供的HIV標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋所用血清為正常人血清，使用兩種儀器方法分別對(duì)HIV抗體初篩測(cè)定線性結(jié)果比較，見(jiàn)表1。

2.2 10份陰陽(yáng)性對(duì)照血清以及90份隨機(jī)抽樣血清，共計(jì)100份血清樣本，2種檢測(cè)方法的定性結(jié)果。用酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀法和37℃?zhèn)鹘y(tǒng)的水浴箱方法對(duì)100份HIV血清樣本進(jìn)行HIV抗體初篩檢測(cè)，結(jié)果行χ2檢驗(yàn)，χ2100，P=1，2種方法對(duì)100例血清樣本檢測(cè)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，陽(yáng)性符合率100%，陰性符合率100%，見(jiàn)表2。

3討論

酶聯(lián)免疫反應(yīng)的基本原理是以酶作為標(biāo)記指示物，以抗原抗體免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的固相吸附測(cè)定方法[1]。抗原抗體的特異性結(jié)合是基于抗原決定簇與抗體超變區(qū)分子間互補(bǔ)性和親和性，它們的結(jié)合是因?yàn)榭乖瓫Q定簇與抗體超變區(qū)構(gòu)槽分子表面的結(jié)合，抗原表位與抗體超變區(qū)必須緊密接觸才會(huì)有足夠的結(jié)合力[2]。酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀能夠加強(qiáng)抗原、抗體的結(jié)合，為酶聯(lián)免疫反應(yīng)提供最佳反應(yīng)條件，保證了檢測(cè)結(jié)果的一致性，大大縮短了反應(yīng)時(shí)間。提高了工作效率，減少患者等待時(shí)間[3]。楊曙梅[4]、劉軍禮[5]等對(duì)酶聯(lián)免疫加速儀在乙肝表面抗原檢測(cè)中的應(yīng)用已做報(bào)道。本文結(jié)果表明酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀對(duì)HIV抗體的初篩檢測(cè)具有重要應(yīng)用價(jià)值，在臨床檢驗(yàn)中是非常值得推廣的。

參考文獻(xiàn)：

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[2]王蘭蘭.臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)學(xué)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：14.

[3]余曉慧.酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀在二步法乙肝病毒表面抗原檢測(cè)中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，29（1）：97-98.

[4]楊曙梅，俞娟，王惠民.酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀在檢測(cè)乙肝表面抗原中的作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2009，13（12）：153-154.

[5]劉軍禮，馬艷俠.酶聯(lián)免疫加速儀在檢測(cè)乙肝表面抗原中的應(yīng)用[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9（15）：32-36.編輯/張燕