C反應蛋白聯合檢測試劑盒在小兒感染性疾病診療中的應用

摘要：目的 評價韓國i-CHROMA CRP試劑盒檢測全血hsCRP的可靠性。方法 選擇2014年3月～7月來我院兒科就診的患病兒童100例，用CRP試劑盒檢測全血hsCRP，用全自動生化儀檢測血清hsCRP，比較其相關性。結果 檢測的hsCRP陰性（<3.0 mg/L）均值全血組為（1.7±1.1），血清組為（1.64±0.92）；hsCRP陽性（>3.0 mg/L）均值全血組為（6.8±2.3），血清組為（6.89±2.06），差異無顯著性（P>0.05）。結論 CRP試劑盒聯合檢測hsCRP的結果準確可靠，且用血量少，非常適合兒科臨床使用的要求。

關鍵詞：超敏C反應蛋白；試劑盒；兒科

C反應蛋白（CRP）能夠參與體內多種生理及病理過程，同時發揮抗炎及促炎的雙重作用，是急性時相反應蛋白中變化最為明顯的一種。絕大多數疾病如細菌感染、糖尿病和動脈硬化等心血管疾病均與CRP的升高有關[1]，在臨床上將其作為一種具有非特異性而且敏感的炎癥指標使用。

隨著科技的發展，用更加敏感的方法可以檢測到濃度更低、計量單位更精密的C反應蛋白，稱為超敏C反應蛋白（hsCRP）。近些年隨著hsCRP（可定量1 mg/L以下）檢測的普及，hsCRP被越來越多的用于對兒科常見疾病的診斷[2]。但現在常見的CRP及hsCRP的檢測所用標本都采取血清，采血量最少也需要2～3 ml，增加了采集的難度，從開始測定到完成報告耗時也較長，無法滿足兒科門診需求。本文通過用生化儀與CRP聯合檢測試劑盒對同一批標本進行相同檢測來評價此試劑盒的性能及可靠性。

1資料與方法

1.1一般資料 2014年3月～7月來我院就診的患兒100例（男56例，女44例），年齡8個月～6歲。

1.2儀器與試劑 日立7600型全自動生化儀及配套試劑，韓國BodiTech公司生產的i-CHROMA（艾可美）免疫熒光分析儀和杭州麗珠醫療器械有限公司代理的hsCRP聯合檢測試劑盒。

1.3試劑盒主要組成成分 hsCRP聯合檢測試劑盒由反應板和檢測緩沖液組成。反應板有獨立包裝，內有干燥劑，檢測緩沖液被分裝在小管子中，與反應板分開運輸。

1.4方法 所有檢測對象均于就診當日抽取1ml靜脈血于加有EDTA的抗凝管中搖勻備用以及3 ml靜脈血于促凝管中制備血清，避免溶血發生。

全血樣本嚴格按照hsCRP聯合檢測試劑盒說明書操作加樣，然后將反應板放到艾可美免疫熒光分析儀中進行檢測。血清樣本用生化儀按操作程序設置參數，兩組樣本同時進行hsCRP測定，記錄檢測結果。

1.5統計學處理 所獲得的各項數據中，hsCRP值>3.0 mg/L為陽性，<3.0 mg/L為陰性；兩種方法所得CRP值采用SPSS 17.0統計學軟件進行處理。結果采用均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

對兩種檢測方法的測定結果進行比較，二者差異無統計學意義（P>0.05），兩者之間無顯著差異，見表1。再將測定值經線性回歸方程計算相關系數r=0.986，其相關性良好。

3討論

韓國i-CHROMA免疫熒光干式定量法CRP聯合檢測試劑盒是一種利用免疫熒光的定量檢測技術，測定方法為干化學層析法：將檢測緩沖液和血液樣本在檢測瓶中進行混合，緩沖液中的熒光標記抗CRP抗體與血液中的相關抗原結合形成抗原抗體復合物。然后將混合樣本放到反應板上，通過毛細管作用擴散到硝化纖維基質的測試帶，該復合物會被測試帶上的抗標記抗體捕獲。因此，血液樣本中的CRP越多，測試帶上的復合物聚集的越多，產生的熒光抗體的信號強度能夠反映被捕獲的CRP的量，再通過艾可美免疫熒光分析儀的處理，從而確定血液樣本中CRP的濃度。測試樣本可以采用血清、血漿或全血，擺脫了生化法只能用血清檢測的限制。樣本用量僅為10 μl，門診初診病患檢測時采集手指或足跟部的末梢血即可，使標本的采集難度降低。測定方法簡便快速，5 min即可獲得檢測結果，方便對嬰幼兒及兒童病患的檢測，有效避免了生化法病患抽血困難、檢測時間較長等不利于兒科臨床早期診斷的問題[3]。

作為一種新型的快速檢測方法，該試劑盒的局限性表現為：①檢測值超出了檢測限（hsCRP的檢測限為0.5～5.0mg/L，CRP的檢測限為5～200 mg/L），其相關性會相應下降[4]；②人類血液中某些非特異性成分具有相似抗原決定基捕獲緩沖液中抗體導致假陽性；③某些未知成分屏蔽了抗原決定基使之無法與抗體結合而導致假陰性，但經過稀釋后再檢測就可避免。④不穩定的CRP抗原隨著時間和溫度逐漸退化而無法被抗體識別，想要得到準確的測試結果需要依靠良好的試劑存儲環境和規范的操作流程。但總體來說，檢測CRP和hsCRP比起用外周血白細胞計數作為炎性反應的標志要更加可靠[5]，CRP含量升高和降低的過程非常迅速的特點也決定了其應該采用方便快捷而且可以多次復查的檢測方法。用免疫熒光干式定量法CRP聯合檢測試劑盒替代生化法用于對兒科初診病患的CRP檢測上還是很有價值的。

參考文獻：

[1]王金良.超敏CRP檢驗的臨床價值[J].開卷有益.求醫問藥，2011，2（1）：15.

[2]林德美.血清C反應蛋白在兒童哮喘急性發作時的變化情況分析[J].當代醫學，2013，19（8）：11-12.

[3]焦瑞寶，唐吉斌，陳然，等.全血超敏C反應蛋白與血清C反應蛋白的相關性分析[J]國際檢驗醫學雜志，2011，32（4）：528.

[4]趙彩虹.超敏C反應蛋白試劑盒線性范圍的驗證[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33（15）：1819-1821.

[5]柳紅花.超敏C反應蛋白檢測和血球分析在兒科上呼吸道感染中的應用[J].中國保健營養，2012，09（095）：3117.

編輯/張燕