日本最古老的牛種——見島牛的研究進展

和占星 張繼才 亐開興 王安奎 黃必志

摘 ?要：旨在介紹日本見島牛的保種及利用經驗，為中國地方良種牛遺傳資源的保護與開發利用提供參考。本研究通過對日本山口大學和山口縣農林綜合技術中心參觀訪問和參閱相關見島牛的研究資料，較系統地介紹“見島牛”的形成過程、生產和繁殖性能及其利用現狀。結果表明：見島牛于1928年被指定為日本“國家自然珍寶”，被認為是日本最古老的本土和牛，也是日本極為重要的牛種遺傳資源。見島牛肉質優良，能產生極好的“降霜肉”。通過采用見島牛公牛（冷凍精液）與荷斯坦母牛雜交方式可生產高產、優質肉牛。見島牛不但晚熟、體型小、繁殖率低，而且種群數量少，近交系數高。用見島牛公牛（冷凍精液）改良肉、奶牛生產高產優質肉牛具有良好應用的前景。

關鍵詞：見島牛;外貌特征;生產性能

中圖分類號：S823.8 ? ?文獻標志碼：A ? ?論文編號：2013-0812

Research Progress on the Oldest Bovine Species in Japan： Mishima Cattle

He Zhanxing1，2， Zhang Jicai1， Qu Kaixing1，2， Wang Ankui1， Huang Bizhi1

（1Yunnan Academy of Grassland and Animal Science， Kunming 650212， Yunnan， China;

2Yunnan Beef Engineering and Technological Research Center， Kunming 650212， Yunnan， China）

Abstract： In order to provide the guidance and reference on protection， development and utilization of genetic resources to the local rare bovine species in China， the experience of conservation and utilization on Mishima Cattle in Japan was introduced. The formation process， production and reproductive performances in Mishima Cattle were systematically stated via visiting Yamaguchi University and the Technological Center of Agriculture and Forestry， Yamaguchi Prefecture in Japan， and referring the related data of Mishima Cattle. Mishima Cattle were designated as Japanese ‘national natural treasure in 1928， which was regarded as the oldest Japanese Cattle and the most important bovine resource in Japan. Mishima Cattle had the ability of top-quality beef with ‘flake meat. Mishima bull （and/or frozen semen） crossed Holstein cows to produce the hybrids with high yield and high-quality beef. However， Mishima Cattle not only matured later， possessed small body size， low reproduction rate， but also had smaller population size and high inbreeding coefficient. It is practical that Mishima bull and/or frozen semen cross beef and dairy breeds to produce high-quality beef.

Key words： Mishima Cattle; Physical Characteristics; Production Performances

0 ?引言

家養動物的遺傳多樣性為遺傳育種提供了寶貴的遺傳資源，保持最大水平的遺傳多樣性及降低近交系數的增加也是大多數保種方案得以實施的前提[1-2]，最大程度地保存種群的遺傳多樣性是主要的保種目標[3]。然而在過去100多年中，由于品種的滅絕率增加而導致的生物多樣性一直處在凈喪失的過程[4]。因此，開展畜禽品種的保存、種質特性的研究和開發利用工作也是解決當前畜禽業出現世界性遺傳基因貧乏最重要的手段之一[5]。借鑒國外優良地方牛種的保護和利用經驗，對中國地方良種特別是珍稀牛種（如大額牛）的保種和開發利用具有重要意義。日本沒有土生土長的古老的家養動物[6]，大約在公元二世紀，隨稻作傳入，牛可能從中國北方經朝鮮半島引到日本[7]，并作為役用畜。“見島牛（Mishima Cattle）”是最古老的日本土著牛種之一，因其長期飼養在偏遠的孤島——見島（Mishima Island），使家系得到保存，1928年被指定為日本“國家自然珍品”[8-9]。從系統發生學分析證實，見島牛群體可以與另一個日本土著牛——口之島牛（Kuchinoshima Cattle）相區別[10]。見島牛作為日本重要的牛遺傳資源，本橋[11]、芝田等[12]、林田等[13]、福倉[14]、原田等[15]和西村[16]先后對其體尺、體重進行了調查;米屋等[9]基于見島牛的發育，使用Brody、Gompertz、Bertalanffy 3種非線性發育模型，制定了發育標準值;Nagamine等[8]對見島牛及日本大陸的黑毛和牛（Wagyu）、短角牛、褐牛3個肉牛品種微衛星DNA標記，發現見島牛的雜合基因型數量和等位基因位點顯著低于其他3個品種;Tsudat等[10]全基因組測序表明，見島牛具有較高的多態性。國內關振寰等 [17]介紹了見島牛的來源、特征以及見島牛與荷斯坦牛、日本黑毛和牛雜交試驗情況;張彬等[6]介紹了日本牛的遺傳資源狀況和對見島牛、口之島牛、黑毛和牛、日本褐牛、日本短角牛、日本無角牛各主要牛品種的特征特性進行初步描述，但沒有對見島牛更詳細、深入的報道。到明治維新時期，日本人受西方飲食文化的影響，才開始食用牛肉和豬肉。為了獲得體型大、產肉量高的肉牛，日本育種工作者根據各地的自然氣候條件和本土牛品種的體型小、產肉量低等特點及人們生產需要制定了相應的肉牛改良方針，先后從國外引進西門塔爾牛（Simmental）、愛爾夏牛（Aryshire）、瑞士褐牛（Brown Swiss）、安格斯（Angus）和短角牛（Shorthorn）等肉牛品種與本地牛進行雜交，通過雜交育種培育出具有各地方特色的黑毛和牛（Japanese Black）、褐毛和牛（Japanese Brown）、短角和牛（Japanese Shorthorn）和無角和牛（Japanese Polled）肉牛品種，形成了日本牛的獨特性狀，是生產高檔雪花牛肉的著名肉牛品種。然而，隨著各地引種和育種力度的加大，日本土著牛種的基因庫被“稀釋”，絕大多數地方牛種已經消失[6]，目前，僅存有山口縣的見島牛和鹿兒島縣的口之島牛為至今未受外血侵蝕的日本純種和牛。本研究通過筆者對日本山口大學和山口縣農林綜合技術中心（原山口縣畜產試驗場）的參觀訪問及參閱相關對見島牛的研究資料，較系統地介紹見島牛的形成過程、生產和繁殖性能及其利用現狀，期望對中國地方珍稀良種牛的保護與利用有所啟示與借鑒。

1 ?見島概況

見島位于日本山口縣（Yamaguchi）萩市（Hagi）西北端的日本海（圖1～2），地理坐標131°8′E，34°46′N，距萩市約45 km，是萩市的7個島嶼之一，面積7.85 km2;氣候暖和，冬無積雪。農業、水產業和牛業是當地的主要產業，盛產大米、黃瓜、煙草等。

2 ?見島牛的形成及特性、特征

見島牛因產地為山口縣萩市的見島而得名，但其起源無明確定論。早在室町時代（1336—1573）的古書中就有飼養見島牛的記載，很可能是由中國北方經朝鮮半島引到日本的，并逐漸從西日本向全國范圍內擴繁飼養;回顧日本黑毛和牛與見島牛的關系，認為是從1778年分化出來的;遺傳學和歷史數據分析，見島牛大約在1800年從中國大陸引入的，至今已有200多年歷史[8]，但從歷史資料記載的存欄情況分析，見島牛至少應有300多年的飼養歷史[8]。

見島牛為小型役用牛，在當時主要用于農耕和運輸。由于受地理環境條件的限制（圖2），見島牛至今未曾與任何外來牛種雜交過，是日本最古老的純種和牛（即現代和牛的祖先），是極其珍貴的牛種和重要的家畜遺傳資源。1928年（昭和3年），見島牛作為日本唯一的純種和牛被指定為“國家自然珍品”。目前，見島牛除用于研究外，僅在山口縣境內飼養，以放牧為主，舍飼為輔。

見島牛體型比日本黑毛和牛小，晚熟（一般3～6歲成熟）、增重慢、產奶量和產肉量均低，但其性情溫順、易調教，行動靈活、善于山地行走、耐粗飼、抗病力和負重力強，是理想的役用牛。同時，見島牛具有沉積理想大理石花紋的基因，肌纖維細嫩、肉質好，育肥后肌纖維間脂肪沉積細小，而成為生產頂級“降霜肉”（雪花肉）的品種。因此，日本將其視為珍寶。

見島牛毛色為黑色或黑褐色，公、母牛均有角，角細、長度適中;額較窄、鼻梁長;體型小、前軀相對發達、中軀較長、身軀較狹窄、后軀欠發達;斜尻、X腿，尾細長;外形較粗糙（圖3）。

3 ?見島牛的數量變化與相關保護政策

由表1所示，見島牛的數量出現起落不穩的變化。1672年在見島飼養的350頭因發生牛瘟全部死亡，在之后幾年里，重新建立了牛群。1739—1955年間，存欄頭數保持在433～580頭。隨著社會的發展，特別是農業機械化的普及，見島牛的役用需求逐漸減少，其數量也逐年下降，到1975年僅存欄33頭，處于嚴重瀕危狀態。之后，在相關部門和飼養戶的努力下，見島牛的數量得到增加，但均未突破120頭。1739—1960年間，見島牛以農戶零散飼養為主，戶均飼養規模不到3頭;從1965年開始，見島牛的飼養農戶及飼養量大幅減少，到1995—2000年飼養戶數只有7戶，但其飼養規模提高到戶均15頭左右。

為保護和利用見島牛這一重要的遺傳資源，日本各級政府部門采取了各項措施，1967年成立了“見島牛保護會”，1990年實施了見島牛“母牛保留對策”和“母牛繁殖促進事業”，1999年成立了“見島牛保護與振興委員會”。

4 ?見島牛的生產性能

4.1 ?見島牛的繁殖性能

母牛利用年限長，到15～17歲仍有繁殖能力，有的到20歲也能正常分娩，公牛可使用到12歲左右。據1995—1996年調查結果，母牛初產年齡（33.1±9.6）月齡、產犢間隔（18.6±4.3）個月、產犢數（3.5±2.5）頭，與1970—1975年的調查結果比較，分別晚1.5個月、長0.6～1.2個月、少0.8頭[14-15]。由表2可見，見島牛的繁殖率較低，僅有30.1%～53.7%。據米屋等[9]在2003年對7戶飼養的86頭見島牛母牛的年齡結構調查結果，母牛平均年齡為6.1歲，最大年齡17.6歲。隨著母牛選留強度的增加，2歲以下育成母牛的數量有所增加。

4.2 ?見島牛的生長性能

4.2.1 ?見島牛的體尺、體重 ?見島牛的初生重較小，平均19.3 kg。采用Brody模型推定90%成熟值為標準，見島牛體高、胸圍和體重分別為17月齡、22月齡和42月齡，分別比黑毛和牛的12月齡、11月齡和20月齡晚5個月、11個月和22個月[9]。

據山口縣畜產試驗場2004—2005年研究資料，見島牛母牛體高和體重成熟年齡分別為45月齡和85月齡，其成年母牛的維持營養需要量是黑毛和牛的1.33倍。表明：見島牛晚熟，而且維持營養需要量高。如表3所示，60月齡以上成年母牛的體重為256.8～265.5 kg，BPI（beef purpose index，肉用指數）為2.29～2.36。1995年測定的見島牛母牛體尺與1930年比較，體高、胸圍、胸深和尻長分別小2.4、5.9、2.7、0.7 cm，腰角寬大0.3 cm，表明60月齡以上繁殖母牛體型呈小型化傾向。與黑毛種的發育基準（35月齡）比較，見島牛的體高為87.4%、胸圍為76.8%、胸深85.5%、尻長81.3%、腰角寬75.2%，屬小體型牛種[14]。

1964—1995年對60月齡以上成年見島牛公牛（n=10）的測定結果見表4。60月齡以上（61～142月齡）的體高、十字部高、體長、胸圍、胸深、胸寬、尻長、腰角寬、坐骨端寬和管圍分別為126.5～131.5 cm、122～127 cm、145～163 cm、185～201.8 cm、69～76 cm、40～49 cm、46.5～49 cm、41～48.2 cm、25～30.8 cm和17.5～20.0 cm，各平均體尺指標均高于1930年的測定結果，表明體型有所改善。73月齡公牛體重達488 kg，BPI為3.75，體重為黑毛和牛的1/2左右。

4.2.2 ?見島牛的育肥效果及產肉性能 ?見島牛公牛大部分作為種牛，僅有少量去勢后作肉用飼養，年出欄不超過12頭。西村強等[16]對見島牛經產母牛進行育肥和屠宰試驗，結果表明：（1）在濃縮飼料及粗飼料自由采食的條件下，母牛的最大采食量為體重的1.75%～2.51%，接近黑毛和牛（2.50%）。（2）育肥210天的平均日增重為0.20～0.30 kg，顯著低于黑毛和牛日增重的0.86 kg;胸寬、胸深、腰角寬、胸圍也顯著低于黑毛和牛。（3）見島牛的胴體重215.2 kg、胴體長135.8 cm、屠宰率56.1%;皮下脂肪厚1.5 cm、眼肌面積29 cm2，顯著小于黑毛和牛，但脂肪含量、肉色、脂肪顏色等與黑毛和牛差異不顯著。（4）見島牛的頭、內臟和生殖器官占體重的比例顯著高于黑毛和牛，脂肪則顯著低于黑毛和牛。不同部位肉的pH值、水分、粗脂肪、加熱損失率、剪切力見表5，其水分含量多、粗脂肪含量較少，蒸煮損失、拉伸率和剪切力較高。由表6可見，見島牛的脂肪特征是皮下脂肪和腎脂肪的熔點比其他品種牛的低，加之，見島牛的牛肉肌纖維細，肉質細嫩，脂肪沉積好，形成的“降霜肉”（雪花肉）極好，因而被視為“超高級肉”，經濟價值高。

4.2.3 ?見島牛的產奶性能 ?見島牛的產奶量低，僅為和牛的1/2左右[21]。

5 ?見島牛的群體遺傳分析

Kato等[22]對血型、血液蛋白型、乳蛋白質型、微衛星DNA多態性等研究表明，黑毛和牛、褐毛和牛和短角和牛3個品種的遺傳可變性幾乎與荷斯坦牛相同，見島牛和口之島牛的遺傳可變性相近，且明顯低于其他品種牛。荷斯坦牛、褐毛和牛、短角和牛、黑毛和牛、口之島牛和見島牛的有效等位基因平均數分別是2.51、2.90、2.51、2.28、1.48和1.40;平均雜合度分別是0.521、0.560、0.516、0.446、0.242和0.209。純種日本本土牛（見島牛和口之島牛）與培育成的和牛、荷斯坦牛有較大的遺傳距離。盡管和牛起源于日本土著牛，但因和牛品種在培育的早期階段就與外來品種進行了雜交，導致與純正的日本土著牛存在較大的遺傳差異[6]。

Nagamine等[8]利用微衛星DNA標記對日本見島牛、黑毛和牛（Wagyu）、短角牛、褐牛3個肉牛品種的起源分析表明，21個位點中見島牛純合子座位為9個，而黑毛和牛僅為1個，短角牛和褐牛為0個，見島牛、黑毛和牛、日本短角牛和日本褐牛的雜合度分別為0.229、0.488、0.56和0.612，等位基因數分別為1.85個、4.38個、4.33個和4.76個。見島牛的雜合型數量和等位基因位點數顯著低于其他3個品種。

Tsudat等[10]對8頭見島牛的全基因組測序分析，鑒定出6.54百萬?個單核苷多態位點（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs），在313個獨特基因中含有400個非同義SNPs，而在8頭牛之間約有3.17百萬個SNPs共享見島牛群體具有獨立的分類地位，與另一個日本土著牛——口之島牛相差較遠;但尚未發現與肉質相關的基因。見島牛和口之島牛間存在大的遺傳距離是由于地理差異和發生了不同方向的遺傳漂變造成，許多性狀也有較大差異。雖然見島牛和口之島牛均屬小型牛，但前者體型更小;見島牛毛色為黑色或黑褐色，肉質好，能產生雪花肉（降霜肉），而口之島牛的毛色腹部有白斑，四肢偶呈棕褐色，產瘦肉更多。

6 ?見島牛的家系與近交

1995—1996年調查資料表明，見島牛的母系有6個，分別是Yoshimaki、Kamekichi、Mimatsu、Shiraume、Takatada和Mitarou，而父系只有1個家系，即Kari[14-15]。牛群（n=93）的近交系數和血緣系數分別為0.343（0.227～0.496）和0.559（0.372～0.824）[15]。這是由于見島牛種群小、種公牛數量有限，單一的家系和長期閉鎖繁育可能是造成近交系數高的主要原因。一般認為，動物的近交衰退主要表現為生活力、生產力、繁殖力、抗逆性、適應性下降和生長發育緩慢等。奶牛的近交衰退造成其繁殖力下降，但肉牛的近交衰退現象不是十分突出[23]。Nagamine等將1896—2005年見島牛的繁殖率按年份（1896—1950年、2000—2005年和1896—2005年）分為3組進行分析，結果表明，繁殖性能沒有隨著年限延長而發生明顯下降。1930年、1955年、1996年和2003年成年母牛體重分別為260～300 kg[11]、253 kg[24]、262 kg[25]和256.8 kg[9]，體重也沒有明顯的下降趨勢。表明：隨時間的推移，見島牛的種群數量和家系在減少，近交系數在升高，但母牛的生長和繁殖性能未出現明顯的近交衰退。

7 ?見島牛的飼養管理

4—10月份，以牧場或休閑地放牧為主，并根據牧草生長狀況進行輪牧管理，少部分牛進行舍飼。

11月—翌年3月，全部采用舍飼，以每圈1～2頭或母犢同圈管理，飼喂配合飼料、麥麩、稻草、黑麥草等。

8 ?見島牛的雜交利用現狀

目前，主要利用見島牛公牛與荷斯坦母牛生產雜交一代的“見蘭牛”（Mishima-Holstein Cattle，日語讀音“Ken Ran Gyu”）生產牛肉。見蘭牛毛色為黑色，既具有見島牛的肉質好，又具有荷斯坦牛的生長發育快，產肉、產奶量高等優點。20月齡見蘭牛體重可達540 kg，平均日增重900 g，為見島牛的2倍多;按日本標準，見蘭牛18月齡閹牛脂肪的分布度較高（3.0），居見島牛（5.0）和荷斯坦牛（0.5）之間，乳脂率可達5.0%[17];肉細嫩、味美，深受消費者的歡迎。

為避免因自然災害發生等因素造成見島牛滅絕的危險和有效保存其寶貴的遺傳資源，日本農林水產省于1985年開始對其公牛采精并保存。由于公牛數量少，保存凍精的數量有限，不能滿足科研和生產的需要。山口縣農林綜合技術中心從見島引進見島牛公、母牛10頭，通過舍飼對公牛采集精液和冷凍保存，結合人工授精方式進行見島牛的純繁，以活體和凍精兩種方式更好地保存其遺傳資源。同時，開展見島牛公牛（凍精）與日本和牛等雜交試驗研究，以期獲得肉質更好的肉牛（圖4為以黑毛和牛為母本，用見島牛凍精配種獲得的后代）。但目前尚不允許采用超排和胚胎移植的方式進行擴繁。

9 ?小結

現在的日本和牛是由引進的外來牛品種與日本本土牛雜交形成的。由于見島牛長期在遠離日本陸地的孤島——見島上飼養與閉鎖繁育，未曾受到外來牛種的遺傳侵蝕，因而被視為日本最古老的本土純種和牛，是日本極為重要的牛遺傳資源。見島牛的肉質優良，能產生頂級“降霜肉”，但晚熟、體型小、繁殖率低，而且其家系（特別是公牛）逐漸減少，近交系數高;母牛體型呈小型化傾向，其種群數量難以在較短時間內明顯增長。通過采用見島牛公牛（冷凍精液）與荷斯坦母牛雜交方式可生產高產、優質肉牛。

隨著繁殖生物技術（人工授精和胚胎工程技術）以及遷地保護技術在見島牛保護中的應用，其擴繁速度和質量有望得到提高，并以活體和凍精、胚胎等保存方式更好地保存好其遺傳資源。采用見島牛公牛（冷凍精液）與肉奶牛母本雜交，充分利用見島牛的肉質優良的特性以及肉奶牛母本的早熟、生長發育快、產肉、產奶量高等優點，具有良好的應用前景。

日本見島牛的保種及利用經驗對中國地方良種牛遺傳資源的保護與開發利用有重要的參考作用。

參考文獻

[1] Frankham R， Ballou J D， Briscoe D A. Introduction to conservation genetics. Cambridge[M]. UK： Cambridge University Press，2002.

[2] Montgomery M E， Woodworth L M， Nurthen R K， et al. Frankham R. Relationships between population size and loss of genetic diversity： comparisons of experimental results with theoretical predictions[J]. Conservation Genetics，2000，1：33-43.

[3] Cervantes I， Meuwissen T H E. Maximization of total genetic variance in breed conservation programmes[J]. Journal of Animal Breeding and Genetics，2011，128：465-472.

[4] Food and Agriculture Organization of the United Nations. The state of the worlds animal genetic resources for Food and Agriculture錢[R]. Guidelines for the Development of Country Reports，2007.

[5] 魯云風，王茜，黃文波，等.畜禽保種群體遺傳多樣性的模擬[J].中國農業科學，2012，45（18）：3849-3858.

[6] 張彬，李麗立，薛立群，等.日本牛的遺傳資源[J].家畜生態學報，2005，26（1）：74-77.

[7] Namikawa T. Genetic aspect of domestication and phylogeny in the cattle[J].Japanese Society of Zootechnical Science，1980，49：817- 827.

[8] Nagamine Y， Nirasawa K， Takahashi H， et al. Estimation of the time of divergence between Japanese Mishima Island cattle and other cattle populations using microsatellite DNA markers[J].Journal of Heredity，2008，99：202-207.

[9] 米屋宏志，惠本茂樹，島田芳子ら. 見島牛の発育調査に基づく成長曲線の作成[A].山口県畜産試験場研究報告[C].2007，22：1-5.

[10] Tsuda K， Kawahara-Miki R， Sano S， et al. Abundant sequence divergence in the native Japanese cattle Mishima-Ushi （Bos taurus） detected using whole-genome sequencing[J].Genomics，2013，102：372-378.

[11] 本橋一朗.純粋和牛見島種に関する研究第一報（見島の産牛）[J].鳥取農學會報，1930，2（1）：83-122.

[12] 芝田清吾，山內美気夫，吉田正三郎.見島牛に就いて[A].広島農業特別報告（中國四國農學大會講演集）[C]. 1949，2：10-12.

[13] 林田重幸.大塚閏一ら.Ⅱ見島牛調査[A]. 日本在來家畜調査団報告（財団法人名古屋畜産研究所）[C].1964，2： 60-78.

[14] 福倉一浩. 見島牛の性能調査[A]. 平成7年度食肉に関する助成研究調査成果報告書（財団法人伊藤記念財団）[C].1995，14：144-147.

[15] 原田佳典，小澤忍，細井栄嗣ら.見島牛の性能調査（1）——見島牛の系譜および牛群の體型[A].山口県畜産試験場研究報告[C].1998，14：43-53.

[16] 西村強，三宅俊三，石川豊ら.見島牛の性能調査（2）[A].山口県畜産試験場研究報告[C].2002，17：41-73.

[17] 關振寰，王德，白曉坤.見島牛——日本優秀和牛之一[J].黑龍江畜牧獸醫，1994（7）：11.

[18] http：//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/f/fa/Map _of_Japan_with_highlight_on_35_Yamaguchi_prefecture.svg.

[19] http：//upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/c/c7/Hagi _in_Yamaguchi_Prefecture_Ja.svg.

[20] http：//www.buiatrics.com/fileok/file/Mishima-Cattle-Japan.pdf.

[21] 田先威和夫.新編畜産大事典[M].東京：株式會社養賢堂，1995：535-538.

[22] Kato K. Studies on genetic variability of Japanese native cattle based on microsatellite DNA polymorphisms[D].Masters thesis， Graduate School of Bioagricultural Sciences. Nagoya University，2002：72.

[23] 內藤元男.畜産大事典[M].東京：株式會社養賢堂，1978：1079-1129.

[24] Ishihara M， Tsuchiya H， Taguchi H. Comparative studies of the native Japanese cattle （the Mishima cattle） with that of the modern improved Japanese cattle[J].Bull Chugoku Nat Agric Exp Stn，1955，2：22-54.

[25] Harada Y， Sakata S， Akimoto I， et al. Experiment for the performance of Mishima cattle[A].Japanese Society of Zootechnical Science[C].1996，356-357.

致謝：訪學得到云南省科學技術廳技術創新人才海外培養計劃的資助，日本山口大學、山口縣農林綜合技術中心提供學習和參觀的機會，同時得到山口大學音井威重教授、山口縣農林綜合技術中心藤井陽一研究員、竹下和久研究員的大力幫助，在此一并謝忱！