廣南鐵皮石斛化學(xué)成分提取方法研究

馬小雙 李程程

摘要采用水浴回流、索氏、超聲3種不同方式及甲醇、乙醇、氯仿等不同溶劑對廣南鐵皮石斛化學(xué)成分進(jìn)行提取，應(yīng)用薄層色譜確定提取效果。結(jié)果表明，鐵皮石斛是以氯仿為溶劑、超聲 2 h提取效果最好，并確定環(huán)己烷-丙酮（6∶4）系統(tǒng)為分離①索氏甲醇提取、②索氏乙醇提取、③索氏氯仿提取、④水浴回流甲醇提取4 h、⑤水浴回流乙醇提取4 h、⑥水浴回流氯仿提取4 h、⑦超聲甲醇提取2 h、⑧超聲乙醇提取2 h、⑨超聲氯仿提取2 h這些樣品液的化學(xué)成分的最佳展開劑。

關(guān)鍵詞廣南鐵皮石斛；化學(xué)成分；提取方法；薄層色譜

中圖分類號S567文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A文章編號0517-6611（2015）29-031-01

石斛為常用貴重藥材，我國共有76種石斛屬植物，其中30多種作藥用，它具有滋陰清熱、益胃生津、潤肺止咳等功效，目前石斛藥材主要采自于安徽、上海、四川、貴州、云南。石斛在云南一帶廣泛種植，僅文山州收載記錄了18種石斛屬植物，而廣南鐵皮石斛是云南文山特有石斛品種，栽種范圍廣泛。廣南縣是文山州開展鐵皮石斛人工種植最早的地區(qū)，已有20多年的種植歷史。

廣南鐵皮石斛作為一種藥食同源的中草藥，對廣南鐵皮石斛化學(xué)成分的提取進(jìn)行研究具有一定的實(shí)際意義。

筆者在此對人工種植廣南鐵皮石斛采用不同的提取方式和不同的提取試劑對其化學(xué)成分進(jìn)行提取，并利用薄層色譜對提取效果進(jìn)行確定。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗(yàn)儀器。

高效薄層層析硅膠G板（煙臺化工研究院）、超聲波振蕩器（文山三七研究院超聲儀器）、索氏提取儀、恒溫水浴鍋、電熱套、粉碎機(jī)、烘箱、電爐。

1.1.2試驗(yàn)試劑。甲醇、甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、正己烷、乙酸乙酯、乙醚、硫酸（分析純）。

1.1.3試驗(yàn)材料。供試材料為新鮮采摘人工種植廣南鐵皮石斛組， 文山藥材市場購買。

1.2方法

1.2.1材料制備。樣品于50 ℃烘箱內(nèi)干燥后，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎成粉放于密封袋中備用。

1.2.2供試樣品液的制備。

分別采用索氏提取法、水浴回流提取法、超聲提取法3種提取方法制備樣品液。供試樣品液共有9種，分別標(biāo)號為①索氏甲醇提取、②索氏乙醇提取、③索氏氯仿提取、④水浴回流甲醇提取4 h、⑤水浴回流乙醇提取4 h、⑥水浴回流氯仿提取4 h、⑦超聲甲醇提取2 h、⑧超聲乙醇提取2 h、⑨超聲氯仿提取2 h。

1.2.2.1索氏提取法。分別精密稱取1 g鐵皮石斛粉末3份，用紗布包裹置于索氏提取器中。分別取100%甲醇、100%乙醇、100%氯仿各50 ml于燒瓶中，在150 ℃的條件下回流提取至無色，過濾。提取液置于水浴上濃縮蒸干。分別取少量甲醇（色譜純）溶解，并分別轉(zhuǎn)移至10 ml容量瓶中定容，搖勻。

1.2.2.2水浴回流提取法。分別精密稱取1 g鐵皮石斛粉末3份，用紗布包裹置于圓底燒瓶中，分別取100%甲醇、100%乙醇、100%氯仿各50 ml于燒瓶中，在85 ℃的條件下水浴回流提取4 h，過濾，濃縮蒸干。分別取少量甲醇（色譜純）溶解，并分別轉(zhuǎn)移至10 ml容量瓶中定容，搖勻。

1.2.2.3超聲提取法。分別精密稱取1 g鐵皮石斛粉末3份，用紗布包裹置于具塞錐形瓶中，分別取100%甲醇、100%乙醇、100%氯仿各50 ml于塞錐形瓶中，常溫靜置2 h，超聲提取2 h，過濾。提取液轉(zhuǎn)移至燒瓶中置于水浴上濃縮蒸干。分別取少量甲醇（色譜純）溶解，并分別轉(zhuǎn)移至10 ml容量瓶中定容，搖勻。

1.2.3薄層色譜鑒別。

1.2.3.1點(diǎn)樣。

選用高效薄層層析硅膠G板，取“1.2.2”項(xiàng)下制備的各種樣品液，手動(dòng)點(diǎn)樣，點(diǎn)樣量為毛細(xì)管點(diǎn)3次，晾干備用。

1.2.3.2展開及顯色。配制10%濃硫酸乙醇溶液為顯色劑。分別配制己烷-丙酮-乙酸乙酯 （2∶1∶1）、環(huán)己烷-乙醚（1∶1）、環(huán)己烷-乙酸乙酯（6∶4）、環(huán)己烷-丙酮（6∶4）、氯仿-甲醇（10∶0.8）、氯仿-乙酸乙酯（1∶1）、環(huán)己烷-丙酮（7∶3）、氯仿-甲醇（10∶0.5）、氯仿-乙醇-乙酸乙酯（10∶10∶

0.5）、環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯（2∶2∶1）、氯仿-乙酸乙酯-丙酮（10∶0.5∶0.5）、環(huán)己烷-氯仿-乙酸乙酯（2∶3∶3）12種溶劑作為展開系統(tǒng)對供試樣品液進(jìn)行薄層檢測。 將點(diǎn)好樣的薄層板分別放入12種展開劑系統(tǒng)中進(jìn)行樣品化學(xué)成分分離，當(dāng)溶劑至距薄層板上端邊緣3 cm時(shí)取出，平鋪晾干；然后將薄層板浸于顯色劑中10 s左右取出，晾干；再將晾干的薄層板置于電爐上烘烤至顯色。

2結(jié)果與分析

2.1不同提取溶劑對鐵皮石斛化學(xué)成分提取效果的影響采用不同提取溶劑對鐵皮石斛化學(xué)成分進(jìn)行提取，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乙醇的提取效果最差，甲醇提取效果較乙醇稍好，而氯仿的提取效率較高，因此以氯仿為提取溶劑較為合適，能較大程度提取出較多的化學(xué)成分。

2.2不同提取方式與提取時(shí)間對鐵皮石斛化學(xué)成分提取效果的影響分析不同提取方式、不同提取時(shí)間的鐵皮石斛化

學(xué)成分發(fā)現(xiàn)，水浴回流提取的效果不太理想，而超聲提取和

索氏提取的效率較高，提取時(shí)間以超聲提取2 h的效果較好，且提取時(shí)間較短。因此，以超聲提取2 h的效果較好。

2.3薄層色譜鑒別結(jié)果分析

將12種展開劑展開的薄層色譜板進(jìn)行對比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)環(huán)己烷-丙酮（6∶4）系統(tǒng)將①～⑨號樣品液的化學(xué)成分分離效果較好（圖1）。從圖1可以看出，④號樣品和⑨號樣品的斑點(diǎn)與其他幾號樣品的斑點(diǎn)相比較明顯。由此可見，在①～⑨號樣品液提取方法中，水浴回流甲醇提取4 h（④）與超聲氯仿提取2 h（⑨）對鐵皮石斛化學(xué)成分提取效果較好。

3結(jié)論

該研究首次探究了人工種植廣南鐵皮石斛不同提取方式、提取時(shí)間及提取溶劑對鐵皮石斛化學(xué)成分的影響， 結(jié)果表明， 以氯仿為溶劑、超聲提取 2 h的效果最好， 可將鐵皮石斛的化學(xué)成分盡可能提取出來，該研究結(jié)果與前人采用的提取方式不一致[3-5]， 這可能與藥材品種和產(chǎn)地不同有關(guān)。另外該研究也對薄層色譜分離石斛化學(xué)成分的展開劑系統(tǒng)進(jìn)行考察，最終確定環(huán)己烷-丙酮（6∶4）系統(tǒng)為分離①索氏甲醇提取、②索氏乙醇提取、③索氏氯仿提取、④水浴回流甲醇提取4 h、⑤水浴回流乙醇提取4 h、⑥水浴回流氯仿提取4 h、⑦超聲甲醇提取2 h、⑧超聲乙醇提取2 h、⑨超聲氯仿提取2 h這些樣品液的化學(xué)成分的最佳展開劑。

參考文獻(xiàn)

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安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，Journal of Anhui Agri. Sci.2015，43（29）：52-53